JPS6141556B2 - - Google Patents
Info
- Publication number
- JPS6141556B2 JPS6141556B2 JP55074967A JP7496780A JPS6141556B2 JP S6141556 B2 JPS6141556 B2 JP S6141556B2 JP 55074967 A JP55074967 A JP 55074967A JP 7496780 A JP7496780 A JP 7496780A JP S6141556 B2 JPS6141556 B2 JP S6141556B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- callus
- medium
- red pigment
- cultured
- plant
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
本発明は植物の組織から誘導したカルスを培養
して赤色色素を生産させる方法に係り、更に詳し
くはユーホルビア属植物のハナキリンの植物組織
から誘導したカルスを培地中で培養して赤色色素
クリサンテミン（シアニジン−３−グルコシド）
を生産させる方法に関する。 色素は食品着色剤などとして食品に美感などを
付与するために多用されているが、合成着色剤は
その毒性、例えば突然変異原性等の点で発ガン性
物質としていろいろ問題を起している。従つて、
食品等に用いられる着色剤としてはその安全性の
面から天然物に由来する色素の使用が望まれてい
る。しかしながら、天然栽培は季節、気候、温
度、緯度等の自然環境の制約を受け易いために、
天然植物からの採取では安定した供給を続けるこ
とができない。また、耕地を利用した大量の栽培
は、当然食糧生産と拮抗するのでその供給に限界
があり、しかもその生産性にも自から限界があり
著しく高価なものとなる。 然るに、近年、植物成分を生産する手法とし
て、植物細胞培養の研究が進められている。植物
細胞培養は、年単位又は月単位で生育する天然植
物に比べ、はるかに速い速度で生育するので短時
間に目的とする成分を生産することができ、また
天然栽培と違つて天候等の影響を受けず、採取に
も多くの人手を煩わすことなく、しかも工業的規
模で計画生産することができるという利点を有す
る。 かかる細胞培養法により天然色素を生産する方
法が既にいくつか提案されている。例えば、特開
昭49−94897号公報にはアカメガシワの組織培養
による多成分から成るアントシアニン系色素Ｍ−
１の生産方法（収率0.28％）が開示されており、
特開昭53−84026号公報にはアイ植物の組織培養
により多成分から成るアントシアン系色素を製造
する方法が開示され、更に特開昭54−11281号公
報にはデリス属に属する植物を組織培養して多成
分から成るアントシアン系色素を製造する方法
（収率0.2％）が開示されている。 本発明者らはかかる観点から植物細胞培養によ
り天然色素を工業的に有利に生産することを可能
にすべく鋭意研究を進めた結果、ここにユーホル
ビア属植物のハナキリンの植物組織から誘導した
カルスを培養せしめることにより天然色素クリサ
ンテミンを高い収率で選択的に生産できることを
見出し、本発明をするに至つた。 本発明によつて生産される赤色色素は下記構造
式をもつクリサンテミン（シアニジン−３−グル
コシド）であり、しかも多成分系の色素ではなく
クリサンテミン一種のみであるので生産された色
素の抽出精製操作も容易である。 本発明において使用する植物培養細胞はユーホ
ルビア属植物ハナキリンを原料として、これから
常法に従つて誘導することによつて得られる。以
下にその一例を説明する。 先ず、ハナキリンの葉を脱イオン水で充分洗浄
した後、70％エチルアルコールに５〜10分間、次
いで10％さらし粉溶液に５〜10分間浸漬して表面
に付着している雑菌を殺菌した後、無菌蒸留水で
残存殺菌剤を洗浄除去する。 次に、殺菌した葉を適当な大きさに滅菌メスで
切断して小片とし、２・４−ジクロルフエノキシ
酢酸などのオーキシン作用物質を含む合成培地
（例えば、ムラシゲ−スクーグ培地）上に置床す
る。 置床後、20〜30℃、好ましくは28℃前後の一定
温度条件下の明所、好ましくは100ルツクス以
上、更に好ましくは3000〜100000ルツクスの光照
射下において培養する。かかる培養により一週間
経過後頃にはハナキリンの葉から前記赤色色素を
生産するカルスが形成されるので、これを適当な
組成の新しい寒天培地上に移植し、20〜30℃、好
ましくは28℃前後の一定温度下、明所、好ましく
は100ルツクス以上、更に好ましくは3000〜
100000ルツクスの光照射下において培養をつづけ
る。なお、工業的規模でカルスを得るには、上記
カルスを一般微生物の培養と同じ操作で静置培養
法又は液体培養法によつて培養増殖させればよ
い。液体培養法としては、例えば振とう式培養機
上で培養する振とう培養法、或いはガラス、金属
等の密閉した槽に無菌空気を通気して培養する方
法などを目的に応じて適宜選択することができ
る。 本発明に従つて前記カルスを誘導又は培養する
のに用いられる培地としては、各種既知の無機合
成寒天培地を基本とし、これにビタミン等の微量
有機物、炭素源、植物ホルモンおよび各種天然抽
出物質を添加したものを用いる。 前記無機合成寒天培地の代表例としては、ホワ
イト培地、ヒルデブランド培地、リスマイヤー−
スクーグ培地、ムラシゲ−スクーグ培地等があげ
られる。その他、これらの培地の組成を改良した
ものも使用することができる。 前記ビタミン等の微量有機物としては、チアミ
ン塩酸塩、ピリドキシン塩酸塩、ニコチン酸等の
ビタミン；グリシン、アスパラギン等のアミノ
酸；イノシツト、ソルビツト等の６価アルコール
をあげることができるが、これらの微量有機物は
培地に添加しなくても良好な生育を示す場合があ
る。 前記炭素源としては、シヨ糖、ブドウ糖、麦芽
糖などの炭水化物；酢酸などの有機酸；メタノー
ル、グリセリンなどのアルコールなどを使用する
ことができるが、特にシヨ糖の使用が色素生産性
が高く好ましい。使用濃度は１〜10%w/v、好ま
しくは４〜７%w/vである。 前記植物ホルモンとしては、２・４−ジクロル
フエノキシ酢酸（２・４−Ｄ）、β−インドール
酢酸（IAA）、α−ナフタレン酢酸（NAA）など
のオーキシン作用物質やカイネチンなどのサイト
カイニン類などを使用することもできるが、赤色
色素クリサンテミンの生産性及び選択性の点から
カルスの誘導又は培養には２・４−Ｄの使用が好
ましい。ただし、オーキシンを除く他の植物ホル
モンの併用を妨げるものではない。２・４−Ｄの
使用濃度は10-4〜10-7M、好ましくは10-6〜
10-7Mであり、この濃度が高過ぎると、カルスが
生育しないので好ましくなく、逆に低過ぎる場合
には縁化したり、生育しなかつたりするので好ま
しくない。 前記各種天然抽出物質としては、例えばカゼイ
ン加水分解物（０〜２%w/v）、ココナツツミル
ク（０〜25%w/v）、酵母エキス（０〜２%w/
ｖ）、麦芽エキス（０〜２%w/v）などを単独又
は任意に組み合せて使用することができる。 本発明方法においては前述の如くカルスの培養
は、カルスを内蔵した培養器を100ルツクス以
上、好ましくは3000〜100000ルツクスの光照射下
に設置して実施する。光源としては、太陽光、螢
光灯、白熱電灯、水銀灯などを用いることができ
る。光照射を実施しない場合には色素が生産され
ない。 このようにして培養したカルスから赤色色素ク
リサンテミンを分離採取するには、公知の方法、
例えば溶媒抽出法によつて行なうことができる。
以下にその一例を説明する。 先ず、塩酸、酢酸、ギ酸などの酸を0.01〜５重
量％程度の濃度で含む溶媒、好ましくは水又はメ
タノール、エタノールなどのアルコール系溶媒に
培養細胞、好ましくは常法に従つて凍結乾燥した
培養細胞を−５〜10℃の温度において浸漬し生産
された赤色色素を抽出する。次に得られた抽出液
を、ロ過などの操作で固形分を除去した後、40℃
以下の温度（この温度が高過ぎると赤色色素が分
解しやすくなるので好ましくない）で減圧濃縮
し、この濃縮液を分液ロートに移し、例えばエー
テル（エーテルに代えてヘキサン、ヘプタン、石
油エーテル、クロロホルム、二酸化メチレン、酢
酸エチルなどを用いることもできる）を加えて振
とうし、油溶性不純物をエーテルに溶解させて分
離除去する。このエーテル洗浄操作を数回繰り返
した後、色素抽出液を減圧乾燥することによつて
目的とする赤色色素クリサンテミンを得ることが
でき、更にセルロース薄層クロマトグラフイー、
セルロースカラムクロマトグラフイー、ペーパー
クロマトグラフイーなどによつて精製することが
できる。なお得られたクリサンテミンは以下の実
施例に示したようにペーパークロマトやUV吸収
スペクトルによつて標品クリサンテミンと比較す
ることによつて同定できる。 以上説明したように、本発明方法に従えば、ユ
ーホルビア属植物のハナキリンの植物組織から誘
導したカルスを特定の培地中で培養させることに
より食品着色剤などとして好適な天然赤色色素ク
リサンテミンを純粋な形で生産することができ、
天然植物から製造する場合に比較して極めて効率
よく生産することができる。 以下に本発明の実施例を説明するが、本発明の
範囲を以下の実施例に限定するものでないことは
いうまでもない。 実施例 ハナキリンの葉を充分に水洗し、広さ４cm2程度
に切断した。次いで、これらの切片を70％エチル
アルコールに５分間浸漬し、更に10％さらし粉溶
液に10分間浸漬して殺菌処理した後、無菌箱内で
無菌蒸留水中に数回浸漬して洗浄し、充分に残存
殺菌剤を除去した。これらの葉切片を滅菌メスを
用いて広さ１cm2程度の小片に切断し、得られたハ
ナキリンの葉の小切片を以下の組成の合成寒天培
地に無菌的に置床した。 培地としては、ムラシゲ−スクーグの無機塩培
地に、シヨ糖３%w/v、麦芽エキス0.2%w/v、
２・４−D10-6M、チアミン塩酸塩0.1ppm、ピリ
ドキシン塩酸塩0.5ppm、ニコチン酸0.5ppm、グ
リシン2ppmおよびイノシトール100ppmを加え
てPH6.0に調整し、寒天0.8%w/vを加え常法通り
殺菌した培地を用いた。 このような培地に置床したハナキリンの葉の小
片を培養温度25℃で3000ルツクスの光照射下培養
した。１週間経過した頃から葉の切口周辺から赤
色のカルスが生じた。１ケ月経過後、大きく生長
したカルスを細かく分割し、上記のカルス誘導の
際に用いたのと同一組成の培地に無菌的に移植
し、培養温度25℃で3000ルツクスの光照射下カル
スの培養を、同様の操作を４〜６週間毎に繰返し
乍ら、合計６ケ月間実施した。 このようにして増殖したハナキリンの培養細胞
を固形培地から分離し、真空凍結乾燥機において
水分を除去し、乾燥カルス8.1ｇを得た。この乾
燥カルスを乳鉢で磨砕後、２％塩酸性メタノール
に冷所において24時間浸漬した。ロ過後得られた
抽出液を40℃以下の温度でメタノールを飛ばして
50ml程度まで濃縮し、分液ロートに移した後100
mlのエーテルを加え、充分振とう後エーテル層と
分離した。かかるエーテル洗浄操作を数回繰り返
した後、更に40℃以下で減圧濃縮して乾固させ
た。この乾固物を少量の0.01％塩酸性メタノール
に溶解し、セルロースTLC（20cm×20cm）に帯
状に塗布し、塩酸／酢酸／水＝５／１／５の展開
溶媒を用いて展開させた。赤色のバンドをかき取
り、２％塩酸性メタノールに浸漬し、赤色色素を
抽出した。この抽出液を40℃以下で減圧乾固して
黒赤色粉末58mg（収率0.7％）を得た。 この色素のペーパークロマト（東洋ロ紙
No.51、以下同じ）（溶媒：ｎ−ブタノール／酢
酸／水＝４／１／５上層、ｎ−ブタノール／塩
酸／水＝５／１／４上層、１％塩酸および酢酸／
塩酸／水＝15／３／82）のＲf値は下記第１表に
示す如く標品クリサンテミン（デラウエア種ブド
ウより抽出単離して構造決定したもの）とよく一
致した。
して赤色色素を生産させる方法に係り、更に詳し
くはユーホルビア属植物のハナキリンの植物組織
から誘導したカルスを培地中で培養して赤色色素
クリサンテミン（シアニジン−３−グルコシド）
を生産させる方法に関する。 色素は食品着色剤などとして食品に美感などを
付与するために多用されているが、合成着色剤は
その毒性、例えば突然変異原性等の点で発ガン性
物質としていろいろ問題を起している。従つて、
食品等に用いられる着色剤としてはその安全性の
面から天然物に由来する色素の使用が望まれてい
る。しかしながら、天然栽培は季節、気候、温
度、緯度等の自然環境の制約を受け易いために、
天然植物からの採取では安定した供給を続けるこ
とができない。また、耕地を利用した大量の栽培
は、当然食糧生産と拮抗するのでその供給に限界
があり、しかもその生産性にも自から限界があり
著しく高価なものとなる。 然るに、近年、植物成分を生産する手法とし
て、植物細胞培養の研究が進められている。植物
細胞培養は、年単位又は月単位で生育する天然植
物に比べ、はるかに速い速度で生育するので短時
間に目的とする成分を生産することができ、また
天然栽培と違つて天候等の影響を受けず、採取に
も多くの人手を煩わすことなく、しかも工業的規
模で計画生産することができるという利点を有す
る。 かかる細胞培養法により天然色素を生産する方
法が既にいくつか提案されている。例えば、特開
昭49−94897号公報にはアカメガシワの組織培養
による多成分から成るアントシアニン系色素Ｍ−
１の生産方法（収率0.28％）が開示されており、
特開昭53−84026号公報にはアイ植物の組織培養
により多成分から成るアントシアン系色素を製造
する方法が開示され、更に特開昭54−11281号公
報にはデリス属に属する植物を組織培養して多成
分から成るアントシアン系色素を製造する方法
（収率0.2％）が開示されている。 本発明者らはかかる観点から植物細胞培養によ
り天然色素を工業的に有利に生産することを可能
にすべく鋭意研究を進めた結果、ここにユーホル
ビア属植物のハナキリンの植物組織から誘導した
カルスを培養せしめることにより天然色素クリサ
ンテミンを高い収率で選択的に生産できることを
見出し、本発明をするに至つた。 本発明によつて生産される赤色色素は下記構造
式をもつクリサンテミン（シアニジン−３−グル
コシド）であり、しかも多成分系の色素ではなく
クリサンテミン一種のみであるので生産された色
素の抽出精製操作も容易である。 本発明において使用する植物培養細胞はユーホ
ルビア属植物ハナキリンを原料として、これから
常法に従つて誘導することによつて得られる。以
下にその一例を説明する。 先ず、ハナキリンの葉を脱イオン水で充分洗浄
した後、70％エチルアルコールに５〜10分間、次
いで10％さらし粉溶液に５〜10分間浸漬して表面
に付着している雑菌を殺菌した後、無菌蒸留水で
残存殺菌剤を洗浄除去する。 次に、殺菌した葉を適当な大きさに滅菌メスで
切断して小片とし、２・４−ジクロルフエノキシ
酢酸などのオーキシン作用物質を含む合成培地
（例えば、ムラシゲ−スクーグ培地）上に置床す
る。 置床後、20〜30℃、好ましくは28℃前後の一定
温度条件下の明所、好ましくは100ルツクス以
上、更に好ましくは3000〜100000ルツクスの光照
射下において培養する。かかる培養により一週間
経過後頃にはハナキリンの葉から前記赤色色素を
生産するカルスが形成されるので、これを適当な
組成の新しい寒天培地上に移植し、20〜30℃、好
ましくは28℃前後の一定温度下、明所、好ましく
は100ルツクス以上、更に好ましくは3000〜
100000ルツクスの光照射下において培養をつづけ
る。なお、工業的規模でカルスを得るには、上記
カルスを一般微生物の培養と同じ操作で静置培養
法又は液体培養法によつて培養増殖させればよ
い。液体培養法としては、例えば振とう式培養機
上で培養する振とう培養法、或いはガラス、金属
等の密閉した槽に無菌空気を通気して培養する方
法などを目的に応じて適宜選択することができ
る。 本発明に従つて前記カルスを誘導又は培養する
のに用いられる培地としては、各種既知の無機合
成寒天培地を基本とし、これにビタミン等の微量
有機物、炭素源、植物ホルモンおよび各種天然抽
出物質を添加したものを用いる。 前記無機合成寒天培地の代表例としては、ホワ
イト培地、ヒルデブランド培地、リスマイヤー−
スクーグ培地、ムラシゲ−スクーグ培地等があげ
られる。その他、これらの培地の組成を改良した
ものも使用することができる。 前記ビタミン等の微量有機物としては、チアミ
ン塩酸塩、ピリドキシン塩酸塩、ニコチン酸等の
ビタミン；グリシン、アスパラギン等のアミノ
酸；イノシツト、ソルビツト等の６価アルコール
をあげることができるが、これらの微量有機物は
培地に添加しなくても良好な生育を示す場合があ
る。 前記炭素源としては、シヨ糖、ブドウ糖、麦芽
糖などの炭水化物；酢酸などの有機酸；メタノー
ル、グリセリンなどのアルコールなどを使用する
ことができるが、特にシヨ糖の使用が色素生産性
が高く好ましい。使用濃度は１〜10%w/v、好ま
しくは４〜７%w/vである。 前記植物ホルモンとしては、２・４−ジクロル
フエノキシ酢酸（２・４−Ｄ）、β−インドール
酢酸（IAA）、α−ナフタレン酢酸（NAA）など
のオーキシン作用物質やカイネチンなどのサイト
カイニン類などを使用することもできるが、赤色
色素クリサンテミンの生産性及び選択性の点から
カルスの誘導又は培養には２・４−Ｄの使用が好
ましい。ただし、オーキシンを除く他の植物ホル
モンの併用を妨げるものではない。２・４−Ｄの
使用濃度は10-4〜10-7M、好ましくは10-6〜
10-7Mであり、この濃度が高過ぎると、カルスが
生育しないので好ましくなく、逆に低過ぎる場合
には縁化したり、生育しなかつたりするので好ま
しくない。 前記各種天然抽出物質としては、例えばカゼイ
ン加水分解物（０〜２%w/v）、ココナツツミル
ク（０〜25%w/v）、酵母エキス（０〜２%w/
ｖ）、麦芽エキス（０〜２%w/v）などを単独又
は任意に組み合せて使用することができる。 本発明方法においては前述の如くカルスの培養
は、カルスを内蔵した培養器を100ルツクス以
上、好ましくは3000〜100000ルツクスの光照射下
に設置して実施する。光源としては、太陽光、螢
光灯、白熱電灯、水銀灯などを用いることができ
る。光照射を実施しない場合には色素が生産され
ない。 このようにして培養したカルスから赤色色素ク
リサンテミンを分離採取するには、公知の方法、
例えば溶媒抽出法によつて行なうことができる。
以下にその一例を説明する。 先ず、塩酸、酢酸、ギ酸などの酸を0.01〜５重
量％程度の濃度で含む溶媒、好ましくは水又はメ
タノール、エタノールなどのアルコール系溶媒に
培養細胞、好ましくは常法に従つて凍結乾燥した
培養細胞を−５〜10℃の温度において浸漬し生産
された赤色色素を抽出する。次に得られた抽出液
を、ロ過などの操作で固形分を除去した後、40℃
以下の温度（この温度が高過ぎると赤色色素が分
解しやすくなるので好ましくない）で減圧濃縮
し、この濃縮液を分液ロートに移し、例えばエー
テル（エーテルに代えてヘキサン、ヘプタン、石
油エーテル、クロロホルム、二酸化メチレン、酢
酸エチルなどを用いることもできる）を加えて振
とうし、油溶性不純物をエーテルに溶解させて分
離除去する。このエーテル洗浄操作を数回繰り返
した後、色素抽出液を減圧乾燥することによつて
目的とする赤色色素クリサンテミンを得ることが
でき、更にセルロース薄層クロマトグラフイー、
セルロースカラムクロマトグラフイー、ペーパー
クロマトグラフイーなどによつて精製することが
できる。なお得られたクリサンテミンは以下の実
施例に示したようにペーパークロマトやUV吸収
スペクトルによつて標品クリサンテミンと比較す
ることによつて同定できる。 以上説明したように、本発明方法に従えば、ユ
ーホルビア属植物のハナキリンの植物組織から誘
導したカルスを特定の培地中で培養させることに
より食品着色剤などとして好適な天然赤色色素ク
リサンテミンを純粋な形で生産することができ、
天然植物から製造する場合に比較して極めて効率
よく生産することができる。 以下に本発明の実施例を説明するが、本発明の
範囲を以下の実施例に限定するものでないことは
いうまでもない。 実施例 ハナキリンの葉を充分に水洗し、広さ４cm2程度
に切断した。次いで、これらの切片を70％エチル
アルコールに５分間浸漬し、更に10％さらし粉溶
液に10分間浸漬して殺菌処理した後、無菌箱内で
無菌蒸留水中に数回浸漬して洗浄し、充分に残存
殺菌剤を除去した。これらの葉切片を滅菌メスを
用いて広さ１cm2程度の小片に切断し、得られたハ
ナキリンの葉の小切片を以下の組成の合成寒天培
地に無菌的に置床した。 培地としては、ムラシゲ−スクーグの無機塩培
地に、シヨ糖３%w/v、麦芽エキス0.2%w/v、
２・４−D10-6M、チアミン塩酸塩0.1ppm、ピリ
ドキシン塩酸塩0.5ppm、ニコチン酸0.5ppm、グ
リシン2ppmおよびイノシトール100ppmを加え
てPH6.0に調整し、寒天0.8%w/vを加え常法通り
殺菌した培地を用いた。 このような培地に置床したハナキリンの葉の小
片を培養温度25℃で3000ルツクスの光照射下培養
した。１週間経過した頃から葉の切口周辺から赤
色のカルスが生じた。１ケ月経過後、大きく生長
したカルスを細かく分割し、上記のカルス誘導の
際に用いたのと同一組成の培地に無菌的に移植
し、培養温度25℃で3000ルツクスの光照射下カル
スの培養を、同様の操作を４〜６週間毎に繰返し
乍ら、合計６ケ月間実施した。 このようにして増殖したハナキリンの培養細胞
を固形培地から分離し、真空凍結乾燥機において
水分を除去し、乾燥カルス8.1ｇを得た。この乾
燥カルスを乳鉢で磨砕後、２％塩酸性メタノール
に冷所において24時間浸漬した。ロ過後得られた
抽出液を40℃以下の温度でメタノールを飛ばして
50ml程度まで濃縮し、分液ロートに移した後100
mlのエーテルを加え、充分振とう後エーテル層と
分離した。かかるエーテル洗浄操作を数回繰り返
した後、更に40℃以下で減圧濃縮して乾固させ
た。この乾固物を少量の0.01％塩酸性メタノール
に溶解し、セルロースTLC（20cm×20cm）に帯
状に塗布し、塩酸／酢酸／水＝５／１／５の展開
溶媒を用いて展開させた。赤色のバンドをかき取
り、２％塩酸性メタノールに浸漬し、赤色色素を
抽出した。この抽出液を40℃以下で減圧乾固して
黒赤色粉末58mg（収率0.7％）を得た。 この色素のペーパークロマト（東洋ロ紙
No.51、以下同じ）（溶媒：ｎ−ブタノール／酢
酸／水＝４／１／５上層、ｎ−ブタノール／塩
酸／水＝５／１／４上層、１％塩酸および酢酸／
塩酸／水＝15／３／82）のＲf値は下記第１表に
示す如く標品クリサンテミン（デラウエア種ブド
ウより抽出単離して構造決定したもの）とよく一
致した。
【表】
また、得られた色素と標品クリサンテミンの
UV吸収スペクトルを測定したところ、第１図Ａ
及びＢに示すように、上記赤色色素のUV吸収ス
ペクトルは標品クリサンテミンのものとよく一致
した。 次に、上で得た赤色色素を20％塩酸で５分間煮
沸し、加水分解して得たアグリコンのペーパーク
ロマト（溶媒：ｎ−ブタノール／酢酸／水＝４／
１／５上層、ｎ−ブタノール／塩酸／水＝５／
１／４上層、酢酸／塩酸／水＝５／１／５および
ギ酸／塩酸／水＝２／１／２）のＲf値も下記第
２表に示すように標品シアニジン（標品クリサン
テミンを加水分解して得たもの）の結果とよく一
致した。
UV吸収スペクトルを測定したところ、第１図Ａ
及びＢに示すように、上記赤色色素のUV吸収ス
ペクトルは標品クリサンテミンのものとよく一致
した。 次に、上で得た赤色色素を20％塩酸で５分間煮
沸し、加水分解して得たアグリコンのペーパーク
ロマト（溶媒：ｎ−ブタノール／酢酸／水＝４／
１／５上層、ｎ−ブタノール／塩酸／水＝５／
１／４上層、酢酸／塩酸／水＝５／１／５および
ギ酸／塩酸／水＝２／１／２）のＲf値も下記第
２表に示すように標品シアニジン（標品クリサン
テミンを加水分解して得たもの）の結果とよく一
致した。
【表】
更に上記赤色色素の糖部分のペーパークロマト
（溶媒：フエノール／水／＝４／１およびピリジ
ン／ブタノール／水＝３／６／１）の結果も以下
の第３表に示す如くグルコースと一致した。これ
らの結果から上で得た赤色色素がクリサンテミン
であることが同定できる。
（溶媒：フエノール／水／＝４／１およびピリジ
ン／ブタノール／水＝３／６／１）の結果も以下
の第３表に示す如くグルコースと一致した。これ
らの結果から上で得た赤色色素がクリサンテミン
であることが同定できる。
第１図は実施例でカルスから得た赤色色素と標
品クリサンテミンのUV吸収スペクトルのチヤー
ト図であり、図Ａがカルスの赤色色素の吸収スペ
クトルを示し、図Ｂが標品クリサンテミンの吸収
スペクトルを示す。
品クリサンテミンのUV吸収スペクトルのチヤー
ト図であり、図Ａがカルスの赤色色素の吸収スペ
クトルを示し、図Ｂが標品クリサンテミンの吸収
スペクトルを示す。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ ユーホルビア属植物のハナキリンの植物組織
から誘導したカルスを培養させて赤色色素クリサ
ンテミンを生産させることを特徴とする赤色色素
クリサンテミンの生産方法。 ２ 前記カルスの培養を２・４−ジクロルフエノ
キシ酢酸（２・４−Ｄ）を10-4〜10-7Mの濃度で
含む培地中で実施する特許請求の範囲第１項記載
の方法。 ３ 前記カルスの培養を100ルツクス以上の光照
射下で実施する特許請求の範囲第１項記載の方
法。 ４ 前記カルスの培養を、シヨ糖を１〜10重量％
の濃度で含む培地中で実施する特許請求の範囲第
１項又は第２項記載の方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7496780A JPS572696A (en) | 1980-06-05 | 1980-06-05 | Production of red dye chrysanthemin by tissual culture of euphorbia millii ch. des moulins |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7496780A JPS572696A (en) | 1980-06-05 | 1980-06-05 | Production of red dye chrysanthemin by tissual culture of euphorbia millii ch. des moulins |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS572696A JPS572696A (en) | 1982-01-08 |
| JPS6141556B2 true JPS6141556B2 (ja) | 1986-09-16 |
Family
ID=13562564
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP7496780A Granted JPS572696A (en) | 1980-06-05 | 1980-06-05 | Production of red dye chrysanthemin by tissual culture of euphorbia millii ch. des moulins |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS572696A (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2009007261A (ja) * | 2007-06-26 | 2009-01-15 | Dainichiseika Color & Chem Mfg Co Ltd | 美白剤および化粧料組成物 |
-
1980
- 1980-06-05 JP JP7496780A patent/JPS572696A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS572696A (en) | 1982-01-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE69433120T2 (de) | Methode zur Herstellung von Taxan-Typ Diterpen und Methode zur Gewinnung von Kulturzellen die Taxan-Typ Diterpen in hohen Ausbeuten herstellen | |
| DE68916407T2 (de) | Zuchtverfahren für pflanzliche gewebe. | |
| EP0479459B1 (en) | Production of quercetin glucuronide and cultured cells containing the same | |
| JPS6141556B2 (ja) | ||
| JP2967532B2 (ja) | タキサン類化合物の製造方法 | |
| JPS6331200B2 (ja) | ||
| JPS63240795A (ja) | 紫色色素およびその製法 | |
| JP2937435B2 (ja) | 木本植物の組織培養方法 | |
| EP0206691A2 (en) | Production of deuterium-containing chemical substances | |
| JPS6314953B2 (ja) | ||
| JP4491655B2 (ja) | イチゴ培養細胞を用いたアントシアニンの製造方法 | |
| JPH0420596B2 (ja) | ||
| DE1056082B (de) | Verfahren zur Herstellung von zur Bakterienanreicherung von landwirtschaftlichen Kulturboeden und als Eiweissfuttermittel geeigneten Bakterienpraeparaten | |
| US5217892A (en) | Method of plant tissue culture | |
| Carrier et al. | Ginkgo biloba L.(maiden hair Tree): In vitro culture and the formation of ginkgolides | |
| JPS585196A (ja) | 抗腫瘍性物質の製造法 | |
| JP3125007B2 (ja) | ローズマリーの組織培養による赤色色素の生産方法 | |
| JPS5835680B2 (ja) | Ｓ−ノルニコチンの製造法 | |
| JPH0541993A (ja) | 地衣植物組織培養による地衣成分の製造法 | |
| JP2813101B2 (ja) | スターチス培養細胞による赤色色素の生産法 | |
| JPH02249495A (ja) | グリシルリチンの製造方法 | |
| JPH0130474B2 (ja) | ||
| JP2539339B2 (ja) | 抗酸化剤 | |
| JPS5940440B2 (ja) | 抗腫瘍性物質の製造法 | |
| JPH01243993A (ja) | 苔類の細胞培養によるエイコサペンタエン酸及びそれを含有する脂質の製造方法 |