JPH0125756B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

本発明はビンカ二量体の新規製造方法に関す
る。さらに詳述すれば、本発明はビンクリスチン
およびホルミルロイシンのようなＮ−ホルミルビ
ンカ二量体の改良製法に関する。 ビンブラスチン（VLB）をビンクリスチンに
変換する方法としてはすでに３つの方法が文献に
報告されている。その１つはペルオキシダーゼと
過酸化水素による酸素的酸化方法（Gorman、米
国特許第3354163号）であり、第２の方法はギ酸
中、常温において分子状酸素による接触酸化方法
（ソ連特許第521845号にもとづいたDerwent
Abstract 33812Y／19）であり、そして第３の方
法は氷酢酸およびアセトン中、−60℃において無
水クロム酸で酸化する方法（米国特許第3899943
号）である。 本発明は、先行技術の欠点を補つた、VLBを
ビンクリスチンに変換する方法を提供するもので
ある。 本発明は下記式Ｉ 〔式中、R¹およびR²を単独に用いると一方が
水素もしくはヒドロキシであつて、他方はエチル
を表わし、R³は水素を表わす。また、R²とR³が
一体となつてα−エポキシドを表わす場合、R¹
はエチルであり、R⁴はホルミルを表わす。〕 で表わされるビンカ二量体の製造方法を提供する
ものであつて、その要旨は、式ＩにおいてR¹，
R²およびR³が前記と同意義であつて、R⁴がメチ
ルを表わす化合物を、テトラヒドロフラン中、−
50℃以下でクロム酸塩−硫酸水溶液と反応させる
点にある。 Ｎ−ホルミルビンカ二量体の好ましい製造方法
は、出発物質の遊離塩基をテトラヒドロフラン
（THF）に溶解し、溶液の温度を−60乃至−77℃
に冷却し、約−50℃以下に維持しながら二クロム
酸塩−硫酸水溶液を加え、実質的にすべての出発
物質がＮ−ホルミルビンカ二量体に変換されるま
で混液を約−60℃以下で撹拌し、得られたＮ−ホ
ルミルビンカ二量体を回収する方法である。 上記酸化工程によつて得られたビンクリスチン
は、シリカゲルもしくはアルミナまたはこれらを
組合せたものを用いて高速液体クロマトグラフイ
ーにより、および／または再結晶することによ
り、医薬用純度に容易に精製し得る。精製された
ビンクリスチンは、クロマトグラフイーおよび／
または結晶化後、硫酸塩に変換されるのが通常で
ある。 二クロム酸カリウム、クロム酸カリウム、クロ
ム酸ナトリウムなどの二クロム酸塩
（dichromates）やクロム酸塩（chromates）を
用いることも出来るが、上記反応には二クロム酸
ナトリウムが好ましい。一般に用いられるTHF
の量はVLBの約100乃至200倍（ｖ／ｗ）であつ
て、その比が約150：１（ｖ／ｗ）の場合が好まし
い。反応温度はドライアイス／アセトン（−77
℃）から−55℃の間であるが、最も良い結果が得
られるのは、アセトン／ドライアイス浴（−77
℃）を用いて約−70℃以下に保つた場合である。
至適温度ではないが、−50℃以下の場合には不純
物の形成が減少する。一般には−60℃以下で反応
を実施する。前記反応条件では２時間反応させる
のが好ましく、反応時間が短い程望ましくない酸
化副生成物の形成が減少する。しかし、より長い
反応時間でも充分実施できる。硫酸第一鉄あるい
はメタ亜硫酸水素ナトリウムのような還元剤で洗
浄することは、過酸化物あるいは残存酸化体の還
元に得策である。過塩素酸のような強酸を用いる
ことも出来るが、酸化剤に用いるのは硫酸が好ま
しい。 −60℃におけるVLBのクロム酸酸化において
は、アセトン−酢酸よりもテトラヒドロフラン
（THF）の方が溶媒として優れているので、
THFと二クロム酸ナトリウムとの組合せは、実
験結果が示している通り、THFとクロム酸また
はアセトンと二クロム酸との組合せよりも意外に
すぐれている。本発明の新規製造方法の利点を示
すために、以下の酸化方法を用いた。 VLB硫酸塩から製造したVLB塩基（VLB検定
用）２ｇを、表１に示した一定量の溶媒に溶解
し、氷酢酸を加え、陽圧の窒素ブランケツトを施
した。クロロホルム／ドライアイスを用いて溶液
の温度を約−61℃に冷却し、撹拌下にクロム酸塩
あるいはクロム酸塩の水溶液を徐々に加えた。こ
の間、溶液の温度はおよそ−55℃以下に保持し
た。添加終了後、混液を−61℃において約３時間
撹拌し、次のような処理を行なつた。この反応混
液を14N水酸化アンモニウム35mlと水200mlから
成る水溶液に加え、各200mlの塩化メチレンで３
回抽出した。抽出液を合して無水硫酸ナトリウム
で乾燥し、過して溶媒を蒸発留去し、残渣に含
まれているビンクリスチン、デスホルミルビンク
リスチンおよびVLBを分析した。収率は、分析
した物質、分子量変化および出発物質の純度をも
とに算出した。反応条件およびその時のアルカロ
イドの収率を表１に示した。表１において、表１
欄は反応記号（Ａ−Ｄ）、第２欄は溶媒、第３欄
は氷酢酸の添加量、第４欄は酸化混合物、そして
第５〜７欄はビンクリスチン、デスホルミルビン
クリスチンおよびVLBの収率（％）をそれぞれ
示している。 酢酸−ギ酸混合物を用いて常温（約25℃）にお
いて１時間再ホルミル化すると、多少のデスホル
ミルビンクリスチン副生成物が含まれるものの、
以下に示すような収率でビンクリスチンが得られ
る。 Ｂ 53.3％ Ｃ 79.8％ Ｄ 64.8％ THFは氷酢酸−アセトンよりも溶媒として利
点はある（最少限、5¹−アセトニルが形成されな
い）が、THFと二クロム酸塩、好ましくは二ク
ロム酸ナトリウムとの組合せは、ビンクリスチン
が高収率で得られること、およびデスホルミルビ
ンクリスチンもデスホルミルVLBも実質的に得
られない点で、THFとクロム酸との組合せより
もすぐれている。デスホルミルビンクリスチンが
存在しなければ、上記のような再ホルミル化の必
要性がなくなる。

【表】

【表】 ＊＊ 第１欄の肩数字は反覆数を表わす
ロイロシン（ビンロイロシン、VLR）をホル
ミルロイシン（ロイロホルミン、FVLR）に変換
する反応を、二クロム酸ナトリウム／テトラヒド
ロフラン（THF）を用いて実施すると、三酸化
クロム／アセトンを用いるRichterの修飾法と比
較して、収率に同様な改良がみとめられる。 修飾したRichterの方法は以下に述べるとおり
である。ロイロシン塩基5.0ｇを塩化メチレン50
mlに溶解してアセトン550mlを加え、窒素パージ
およびブランケツトを適用し、ドライアイス／ク
ロロホルム浴を用いて溶液の温度を−60℃乃至−
70℃に冷却した。三酸化クロム５ｇ、水10mlおよ
び氷酢酸50mlから成る溶液を10分間にわたつて加
え、混液を−59℃乃至−68℃で120分間撹拌した。
混液を、水500mlに溶解した28％水酸化アンモニ
ウム100mlに加え、各300mlの塩化メチレンで３回
抽出した。有機抽出物を合して減圧下に蒸発に付
し、粗製のホルミルロイシン4.55ｇを得た。

【表】

【表】 表２で比較した収率は、表１に示したVLB／
VCRの収率に非常に近い値を示している。 HPLCおよびTLCプロフイルによれば、前記
反応条件下において二クロム酸ナトリウム／
THFを用いた反応の方が、すべての点において
修飾したRichterの反応よりもはるかに優れてい
ることが明らかである。この実験に用いた
Richterの条件は、VLBの場合と同様に、出発物
質の修飾（硫酸塩の代わりに遊離塩基）および一
般的な改良事項（容積の減少、改良処理法など）
などの点で修飾した。 従つて、VLBの場合と同様に、二クロム酸／
THF条件における反応の方が、Richter法の場合
よりも高収率、過反応および反応不足の回避、な
らびに副生成物（特に5¹−アセトニル誘導体）の
回避に関してすぐれていることは疑う余地がな
い。 以下の実施例は上記反応をさらに詳述するもの
である。 実施例 １ VLB硫酸塩から製造したVLB遊離塩基２ｇを
THF240mlに溶解して氷酢酸7.5mlを加え、陽圧
窒素ブランケツトの適用下、クロロホルム／ドラ
イアイス浴を用いて約−65℃に冷却した。二クロ
ム酸ナトリウム・二水和物３ｇを水15mlに溶解し
て18M硫酸２mlを加えた溶液を１〜２分間かけ
て、撹拌下の上記VLB遊離塩基溶液に加え、こ
の間、反応温度を約−50℃以下に保持した。混液
を約−65℃に保ちながらさらに３時間撹拌し、
14M水酸化アンモニウム35mlを含む水200mlに注
加した。この溶液を各200mlの塩化メチレンで３
回抽出し、有機抽出物を合して乾燥し、溶媒を留
去して、検出し得るVLBもしくはＮ−デスホル
ミルビンクリスチンを含まない粗製のビンクリス
チン2.05ｇを得た。ビンクリスチンの収率は91.2
％（表３において反応１〜４の平均）であつて、
これは出発物質の純度および最終生成物のビンク
リスチン分析用に修正したものである。 次の表３は前記方法に従つて実施した一連の反
応の結果を示したものである。表において、第１
欄は反応の番号、第２欄は分析によるVLBの重
量、第３欄はビンクリスチンの原重量、第４欄は
分析によるビンクリスチンの収率、第５欄は分析
したVLBから得られるビンクリスチンの理論量、
そして第６欄は分析したVLBをもとにしたビン
クリスチンの収率をそれぞれ表わす。 反応１〜４は前記実施例に従つて実施した。反
応５および６は酢酸を除去した点を除けば反応１
〜４と同じであつた。反応７〜８はTHF200mlだ
けを用いた点を除けば反応５〜６と同一である。
また、反応９〜12は、合併した有機抽出液を硫酸
第一鉄溶液（５ｇ／水100ml）で洗浄してから処
理する、という追加工程を除けば反応７〜８と同
じである。

【表】

【表】 溶媒としてTHFを用いた前記実験においては、
検出し得るＮ−デスホルミルビンクリスチンは末
反応のVLB出発物質と同様に、１％以下であつ
た。従つて、上記収率は実質的な収率であつて、
回収した出発物質または副生成物のＮ−デスホル
ミルビンクリスチンをホルミル化する工程を加え
て製造したビンクリスチンに基づいた収率ではな
い。さらに、アセトンを溶媒として使用しない限
り、5¹−アセトニルVLB副生成物は得られない。 上記各反応において、VLB塩基は、VLB含有
量分析用のVLB硫酸塩から製造した。（VLB硫
酸塩製造方法には、様々な量の溶媒および他の不
純物が含まれる。）同様に、VLB硫酸塩から単離
したVLB遊離塩基の重量は著しく変化したので
VLB遊離塩基含有量として分析した。理論上の
ビンクリスチンの収率は、分析したVLB塩基の
量を基にした。従つて、各反応においては2.00ｇ
のVLB塩基を用いた。表３の第２欄は、各2.00
ｇの試料中に実際に含まれているVLB塩基の割
合、具体的には約90％を示したものである。実質
的な収率と分析値との差は、揮発性成分に依存す
る。 実施例 ２ VLB塩基のバツチ2.00ｇ（実質量1.57ｇ、78.4
％）を用いて、実施例１と同様な酸化を行なつ
た。VLBは前記と同様にTHF240mlに溶解し、
クロロホルム／ドライアイス浴（−65℃）を用い
て冷却した。酸化溶液の構成々分は、二クロム酸
ナトリウム・二水和物2.5ｇ、水15mlおよび18M
硫酸1.7mlである。合併した有機抽出液を５％メ
タ亜硫酸水素ナトリウム水溶液で2.5ｇ／50mlの
割合（表２の反応９〜12における硫酸第一鉄に代
えて）で洗浄してから処理する点を除いて、実施
例１のようにビンクリスチンを単離した。 上記方法に従えば、分析による収率が98％以上
のビンクリスチンが一般に得られる。純度78.9％
のVLB塩基20ｇを用いた大規模生産では、分析
によるビンクリスチンの収率は93.4％であつた。 実施例 ３ ロイロシン塩基5.0ｇをテトラヒドロフラン
（THF）600mlに溶解して窒素パージとブランケ
ツトを適用し、ドライアイス／アセトン浴を用い
て溶液を−70℃乃至−77℃に冷却した。二クロム
酸ナトリウム6.25ｇ、水37.5mlおよび濃硫酸4.5ml
から成る溶液を10分間にわたつて加え、温度を−
70℃乃至−77℃に保ちながら120分間撹拌した。
冷却浴を取り除き、28％水酸化アンモニウム35ml
と水500mlから成る溶液を加えた。この溶液を各
300mlの塩化メチレンで３回抽出し、合併した有
機抽出液をメタ亜硫酸水素ナトリウム6.25ｇと水
125mlとから成る溶液で洗浄し、減圧下に蒸発に
付して粗製のホルミルロイシン5.24ｇを得た。こ
の粗生成物は出発物質および比較物質と共に
HPLCによつて分析した。収率89.9％は、分子量
を考慮せずに、生成物の収量および純度ならびに
出発物質をもとに決定した。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 式 〔式中、R¹およびR²を単独に用いると、一方
   が水素もしくはヒドロキシを表わし、他方はエチ
   ルを表わし、そしてR³は水素を表わす。また、
   R²とR³が一体となつてα−エポキシドを表わす
   場合、R¹はエチルでR⁴はホルミルをそれぞれ表
   わす。〕 で表わされる化合物の製造に際して、式Ｉにおい
   てR¹，R²およびR³が前記と同意義でR⁴がメチル
   である化合物を、テトラヒドロフラン中、−50℃
   以下でクロム酸塩−硫酸水溶液と反応させること
   を特徴とするビンカ二量体の製造方法。 ２ テトラヒドロフランと出発物質の遊離塩基と
   の比が約150：１（ｖ／ｗ）である特許請求の範囲
   １に記載の製造方法。 ３ クロム酸塩が二クロム酸ナトリウムである特
   許請求の範囲１または２に記載の製造方法。 ４ 二クロム酸ナトリウムと出発物質の遊離塩基
   との比が約1.6：１（ｗ／ｗ）である特許請求の範
   囲１乃至３に記載の製造方法。 ５ 18M硫酸と出発物質の遊離塩基との比が
   1.2：1.0（ｖ／ｗ）である特許請求の範囲１乃至
   ４に記載の製造方法。 ６ ビンカ二量体がビンクリスチンである特許請
   求の範囲１乃至５に記載の製造方法。 ７ ビンカ二量体がホルミルロイシンである特許
   請求の範囲１乃至５に記載の製造方法。