JPH0583081B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

〔産業上の利用分野〕 本発明は、分枝したシクロデキストリンを含有
する溶液から分枝したシクロデキストリンを精製
および分離するための方法に関し、より具体的に
は分枝したβ−シクロデキストリンの精製および
分離に関する。 〔発明の背景〕 澱粉は、無水グルコースのポリマーであり、
種々の植物、例えばコーン、ジヤガイモ、モロコ
シ、米等に存在する。たとえ植物の品種が何んで
あろうとも、澱粉は化学的に２つの形状で存在す
る澱粉アミロース（直鎖状）およびアミロペクチ
ン（分枝鎖状）として抽出される。アミロース
は、α−１，４結合により共に結合した無水グル
コース単位の直鎖状ポリマーであるが、ところが
一方、アミロペクチンは、α−１，４無水グルコ
ースの直鎖ポリマー上にα−１，４無水グルコー
スポリマーの側鎖が結合したものから成る。アミ
ロペクチンにおいては、直鎖と側鎖との間の結合
は、α−１，６結合である。一般に澱粉は、アミ
ロースとアミロペクチン分子の両方を含み、その
量はそれぞれの澱粉の起源に依存している。例え
ば、高アミロースコーン澱粉は、約50：50のアミ
ロペクチン対アミロースの比率を有し、一方ワキ
シー・メイズ・コーン（waxy maize corn）澱
粉は99：１のアミロペクチン対アミロースの比率
を有する。一般に、殆んどの澱粉は、いくらかの
アミロペクチンを含んでいる。 またシヤルデインガー・デキストリン、シクロ
アミロース、シクロマルトースおよびシクログル
カンとも称されるシクロデキストリンは、無水グ
ルコースのポリマーであり、α−１，４結合によ
り共に結合され環状化合物を形成する。６員環
は、α−シクロデキストリンと、７員環はβ−シ
クロデキストリンと、そして８員環はγ−シクロ
デキストリンと称される。また、これらの６，７
および８員環は、それぞれシクロマルトヘキサオ
ース、シクロマルトヘプタオースおよびシクロマ
ルトオクタオースとも称される。 分枝したシクロデキストリンは、Frenchおよ
び彼の共同研究者により早くも1965年に発表され
た（French等、Archives of Biochem.and
Biophys.第３巻、153〜160頁、1965.参照）が、
しかし最近は殆んど研究されていない。これらの
名称が意味するところの分枝したβ−シクロデキ
ストリンは、分枝していないβ−シクロデキスト
リン上に少なくとも１単位の無水グルコースを、
分枝その還構造から外へ伸びるように結合したも
のである。分枝は、α−１，６結合により還に結
合されていて、この結合は、アミロペクチンはそ
の直鎖上に側鎖を結合するために用いるものと同
一の結合である。定義として、修飾語「分枝し
た」または「分枝していない」を伴わない「β−
シクロデキストリン」の語は、分枝したβ−シク
ロデキストリンと分枝していないβ−シクロデキ
ストリンの両方を意味する。分枝したおよび分枝
していないβ−シクロデキストリンにいつては、
そのままそれらを称するであろう。 シクロデキストリンは、多数の化合物のホスト
として機能し得るため広範囲な種々の用途を有
し、農業および製薬業の分野並びにその他の分野
での使用が既でに見られる。 分枝したβ−シクロデキストリンは、分枝して
いないβ−シクロデキストリンに比し、水に割合
溶解する。具体的には、分枝していないβ−シク
ロデキストリンは、重量で約２％の解度を有する
が、一方、分枝したβ−シクロデキストリンは、
重量で約50％およびそれ以上の溶解度を有する。
不溶性化合物に対するホスト分子として分枝した
β−シクロデキストリンを使用することにより、
不溶性化合物を水に溶解することができる。 分枝したβ−シクロデキストリンの他の重要な
態様は、分枝そのものが、他の特殊な用途のβ−
シクロデキストリンの誘導体を形成するための位
置を提供することである。一般に、分枝上への付
加は、β−シクロデキストリンの還構造を妨害せ
ず、分枝したβ−シクロデキストリンの還構造が
ホスト分子として機能することを許容する。一般
に、分枝それ自体は、ホスト分子としての還の機
能を妨害しない。 β−シクロデキストリン類を含有する溶液は、
澱粉スラリーを酵素、シクロデキストリン・グリ
コシルトランスフエラーゼ（CGT）を用い、選
ばれるCGTにとつて適するPH、温度および時間
にて、処理することにより製造される。澱粉は、
任意に選択した植物種に由来するものであること
ができる。酵素CGTは、微生物、例えばバシラ
ス・マセランス（Bacillus macerans）、B.メガ
テリウム（B.egaterium）、B.サーキユランス
（B.circulans）、B.ステアロサーモフイラス（B.
stearothermophilus）およびバシラス
（Becillus）sp.（好アルカリ性）並びにその他のも
のから得られる。選んだCGT酵素と選んだ澱粉
との間のパラメーターは、通常のものであり、そ
して文献中にかなり記載されている。一般に、澱
粉は、固形物重量で約35％までの濃度において水
溶液中でスラリー化される。次に、スラリーは、
酵素または酸により約１〜5DEになるまでゲル化
および液化にさらされる。液化にとつて好ましい
酵素は、細菌α−アミラーゼである。次に、選ん
だCGTは、ゲル化および液化スラリーに添加さ
れ、そしてPH、温度および処理時間は、選んだ酵
素に依存して調整される。一般に、PHは4.5〜約
8.5の間であり、温度範囲は、室温から約75℃ま
での間であり、そして反応の長さは、約10時間〜
７日間行われる。 β−シクロデキストリン類の量は、処理条件お
よび使用される酵素により変化するであろう。そ
の後、分枝していないβ−シクロデキストリン
は、常法の結晶化または濾過により反応溶液から
除去される。 最近になり、分枝したβ−シクロデキストリン
は、常法のアミロペクチンへのCGTの作用によ
り形成されると考えられている。主としてβ−シ
クロデキストリンを製造するために、CGTとゲ
ル化および液化澱粉スラリーとの間の反応は、ト
ルエンまたはｐ−キシレンのような溶媒の存在下
で行われる。かかる溶媒は、β−シクロデキスト
リンの収量を実質的に増加する。 一般的に、澱粉をCGTで処理すると、分枝し
たβ−シクロデキストリン、分枝していないβ−
シクロデキストリン、および非環式デキストリン
が生成する。溶液からの分枝したβ−シクロデキ
ストリンの分離および精製は、極めて困難であ
り、そして従来から使用されている方法は、非常
に複雑であり、かつ分枝していないβ−シクロデ
キストリンおよび非環式デキストリンから分枝し
たβ−シクロデキストリンを大規模に分離するこ
とは不可能であつた。分枝していないβ−シクロ
デキストリンおよび非環式デキストリンから分枝
したβ−シクロデキストリンを分離および精製す
るための既知の方法は、特殊なクロマトグラフイ
ー法だけであり、言うまでもなく、これらの方法
は真に工業的な操作としては現実的でない。 〔課題を解決するための手段〕 分枝したβ−シクロデキストリンを分枝してい
ないβ−シクロデキストリンおよび非環式デキス
トリンから分離し、そして精製する実用的方法
が、ここに発明された。 広範囲には、本発明の精製および分離方法は：
分枝したβ−シクロデキストリンを含有する出発
水溶液にβ−シクロデキストリン包接化合物を形
成する化合物（complexant）を添加することに
より、第１溶液としての前記出発水溶液から一次
沈殿および一次母液を形成し；前記第１溶液から
一次沈殿を回収し；一次沈殿で第２水溶液を形成
し；前記第２溶液へのβ−シクロデキストリン包
接化合物を形成する化合物の添加により該第二溶
液から二次沈殿および二次母液を形成し；二次母
液を回収し；そして、最後に前記二次母液から分
枝したβ−シクロデキストリンを回収することを
含んでなる。 β−シクロデキストリン包接化合物を形成する
化合物は、周知の化学品である。 好ましくは、一次沈殿は第２溶液を形成する前
に洗浄される。かかる洗浄段階は、少量の水を使
用して沈殿を洗浄することを包含し、そして一次
沈殿に由来する少なくとも一部の非環式デキスト
リンを除去する。 また好ましくは、分枝したβ−シクロデキスト
リンの純度を上昇せしめるには、二次母液から分
枝したβ−シクロデキストリンを回収する代わり
に、その二次母液から第３溶液を形成し、そして
β−シクロデキストリン包接化合物を形成する化
合物を該第３溶液に添加して三次沈殿および三次
母液を形成し、三次母液を回収し、そして最後
に、この三次母液から分枝したβ−シクロデキス
トリンを回収する。 本発明に使用される出発水溶液または第１溶液
は、溶液の総固形物含有量の約１％かまたはそれ
以上が分枝したβ−シクロデキストリンであり、
そして分枝していないβ−シクロデキストリン
が、分枝したβ−シクロデキストリンの過剰量存
在するような分枝したβ−シクロデキストリンお
よび分枝していないβ−シクロデキストリンを含
有する水溶液である。出発水溶液または第１溶液
は、澱粉スラリーをCGT酵素を用いて、特定の
CGT酵素について適するPH、温度および時間の
長さで処理することによる常法で形成することが
できる。より好ましくは、出発または第１溶液
は、特定のCGT酵素について適するPH、温度お
よび時間の長さでCGT酵素処理し、次いで常法
の結晶化かまたは濾過操作で分枝していないβ−
シクロデキストリンを除去する処理を施したもの
から得られる。 より具体的に言えば、澱粉スラリーに対する
CGTの作用によりβ−シクロデキストリンの工
業的な製造後に残存する母液を使用することが、
本発明の方法のために非常に優れた出発たは第１
溶液となることを見い出した。 好ましくは、本発明の第１または出発溶液を形
成する上で使用される澱粉は、ワキシー澱粉、そ
してより好ましくはモチトウモロコシ
（waxymaize）である。 分枝したβ−シクロデキストリンを優位に得る
には、CGTによる澱粉スラリーの処理が溶剤、
例えばトルエンまたはｐ−キシレンの存在下で行
われる。 具体的には、本発明による好ましい出発または
第１溶液は、分枝したβ−シクロデキストリンを
重量で約１％〜約２％含み、分枝していないβ−
シクロデキストリンを重量で約５％〜約20％含有
する。 この出発水溶液に、β−シクロデキストリン包
接化合物を形成する化合物を添加し、一次沈殿お
よび一次母液を形成する。β−シクロデキストリ
ン包接化合物を形成する化合物は、β−シクロデ
キストリンと結合し、溶液外に沈殿する包接化合
物を形成する。この包接化合物の沈殿物を一次沈
殿と称する。 β−シクロデキストリン包接化合物を形成する
化合物の添加は、通常の装置を用いる常法で遂行
される。具体的には、β−シクロデキストリン包
接化合物を形成する化合物は、溶液を攪拌しなが
らその溶液に添加される。攪拌溶液の温度は、好
ましくは、約10〜約25℃の間に、より好ましくは
約15〜約20℃の間に維持される。 β−シクロデキストリン包接化合物を形成する
化合物が添加されている第１または出発溶液は、
沈殿を形成する目的で約１日〜約７日間静置して
おかれる。沈殿は、瞬には生じず一定時間経過後
に生じることが、当業者には理解されるであろ
う。約３日間の経過後に、一次沈殿の全部か、ま
たは大部分が形成されることが見い出された。最
も好ましくは、沈殿形成のための期間は約３日か
またはそれ以上である。 出発水溶液の濃度は、好ましくは固形物重量で
約24％〜約40％、より好ましくは固形物重量で約
30％である。 β−シクロデキストリン包接化合物を形成する
化合物の第一次添加物中に添加される包接化合物
を形成する化合物の量は、溶液中のβ−シクロデ
キストリンの100重量部を基にして少なくとも約
10重量部であり、そして好ましくは溶液中のβ−
シクロデキストリンの100重量部を基にして約20
重量部である。一次沈殿は、分枝したβ−シクロ
デキストリンと分枝していないβ−シクロデキス
トリンの両方を含有する。 β−シクロデキストリン包接化合物を形成する
化合物は、当業者に周知である。第１または出発
溶液に添加するには、好ましくは、ｐ−キシレン
またはトルエンが使用され、最も好ましくはｐ−
キシレンが使用される。 この一次沈殿の回収は、通常の装置を使用する
常法で遂行される。濾過器または遠心機を使用す
ることができ、濾過器が好ましいものである。こ
の段階は、副生成物として一次母液を生成する。 第２溶液の形成は、通常の装置を使用する常法
で水と一次沈殿を混合することにより遂行され
る。好ましくは、沈殿を加熱しそして攪拌するこ
とにより沈殿を水に再溶解し、固形物重量で約
1.0％〜約20％、より好ましくは約10重量％の溶
液を形成する。一次沈殿を完全に溶解するために
要求される加熱量は、第２溶液を沸騰し、そして
一次沈殿中に含まれているβ−シクロデキストリ
ン包接化合物を形成する化合物の一部が蒸発する
ようなものであることが見い出された。 好ましくは、沈殿を再溶解する前に、沈殿を常
法で洗浄して非環式デキストリンの一部を除去す
る。一次沈殿の洗浄は、沈殿のグラム当たり１ま
たは２mlの水を使用して遂行される。洗浄は、２
ないし３度繰り返えされる。 二次沈殿および二次母液の形成は、第２溶液に
β−シクロデキストリン包接化合物を形成する化
合物の添加によつて遂行される。第２溶液へのβ
−シクロデキストリン包接化合物を形成する化合
物の添加は、第１または出発溶液へのβ−シクロ
デキストリン包接化合物を形成する化合物の添加
と同様に遂行される。溶液中のβ−シクロデキス
トリン100重量部を基にして、少なくとも約10重
量部、そして好ましくは約20重量部のβ−シクロ
デキストリン包接化合物を形成する化合物が添加
される。二次沈殿の形成を通じての第２溶液の好
ましい温度は、約10℃〜約25℃の間、より好まし
くは約15℃〜約20℃である。二次沈殿形成の期間
は、好ましくは約３日か、またはそれ以上であ
る。二次沈殿および二次母液の形成に使用される
好ましいβ−シクロデキストリン包接化合物を形
成する化合物は、トルエンである。 β−シクロデキストリン包接化合物を形成する
化合物の第２添加物から二次母液の回収は、通常
の装置、例えば遠心機または濾過器を用いる常法
で遂行される。好ましくは、二次沈殿を濾去し、
濾液のみを残こす。この濾液または母液は、包接
化合物でなく、そして二次沈殿を形成する分枝し
たβ−シクロデキストリンおよび若干の分枝して
いないβ−シクロデキストリンを含む。 分枝したβ−シクロデキストリンを二次母液の
濃縮または乾燥により二次母液から回収し、分枝
したβ−シクロデキストリンを取り去る。分枝し
たβ−シクロデキストリンを得るための二次母液
の濃縮および乾燥は、通常の装置を使用する常法
で遂行される。 より高純度の分枝したβ−シクロデキストリン
が望まれるならば、さらに、分枝したβ−シクロ
デキストリンを回収する前に、形成される第３溶
液にβ−シクロデキストリン包接化合物を形成す
る化合物を添加し、三次沈殿および三次母液を形
成する。次に、三次母液を回収し、そして分枝し
たβ−シクロデキストリンが三次母液から回収さ
れる。 第３溶液は、固形物重量で約1.％〜約20％間
の、より好ましくは約10重量％溶液の二次母液か
ら形成される。一般に、二次母液は、好ましい固
形物重量で約10％溶液を得るには濃縮されねばな
らない。 三次沈殿および三次母液を形成するための第３
溶液へのβ−シクロデキストリン包接化合物を形
成する化合物の添加は、第１または出発溶液およ
び第２溶液に添加されるβ−シクロデキストリン
包接化合物を形成する化合物の添加と同様に遂行
される。溶液中のβ−シクロデキストリンの100
重量部に基づき、少なくともβ−シクロデキスト
リン包接化合物を形成する化合物の重量で約10
％、そしてより好ましくは前記重量で約20％が第
３溶液に添加される。三次沈殿および三次母液を
形成する間の第３溶液の好ましい温度は、約10℃
〜約25℃、そしてより好ましくは約15℃〜約20℃
の間である。好ましくは、三次沈殿を形成するた
めの期間は、約３日かまたはそれ以上である。ト
ルエンが、三次沈殿および三次母液の形成におい
て使用される好ましいβ−シクロデキストリン包
接化合物を形成する化合物である。三次溶液への
β−シクロデキストリン包接化合物を形成する化
合物の現実的な添加は、通常の装置を用いる常法
で遂行される。 ３溶液からの三次母液の回収は、通常の装置、
例えば遠心機または濾過器を用いる常法で遂行さ
れる。 好ましくは、これは水溶液を乾燥固形物になる
まで減少せしめる濃縮および乾燥により遂行され
る。かかる乾燥生成物は、約70％〜約80％の分枝
したβ−シクロデキストリンを含有することが見
い出された。 本発明における別の段階は、抽出段階を実施す
ることである。このような段階は、β−シクロデ
キストリン包接化合物を形成する化合物の第２添
加前の一次沈殿について実施される。抽出段階
は、沈殿１重量部に基に、約９重量部の水を一次
沈殿に添加し、そして約20℃〜約40℃の範囲温度
で水と沈殿を混合することにより実施される。こ
の抽出段階は、煮沸することなく実施される点で
重要である。この抽出段階に由来する母液は、次
に濃縮されそして乾燥される。濃縮および乾燥し
た母液は、分枝したβ−シクロデキストリンを生
じる。抽出段階後に残存する固形物または沈殿
は、さらに第２溶液を形成するために使用され、
そしてβ−シクロデキストリン包接化合物を形成
する化合物の第２の添加、そして残りの処理が施
される。 さらに他の別法は、第２溶液の形成前に一次沈
殿段階を繰り返すことである。この別法の実施で
は、他の溶液との間の区別の目的で第４溶液と称
される溶液が、一次沈殿と水との混合により形成
される。この第４溶液の固形物濃度は、好ましく
は固形物重量で約24％〜約40％の間に、そしてよ
り好ましくは固形物重量で約30％である。 この第４溶液については、溶液中のβ−シクロ
デキストリンの100部を基に、約10重量部かまた
はそれ以上の、より好ましくは約20部の量でβ−
シクロデキストリン包接化合物を形成する化合物
が添加される。この第４の添加に使用される好ま
しいβ−シクロデキストリン包接化合物を形成す
る化合物は、ｐ−キシレンである。添加は、通常
の装置を使用する常法で遂行される。出発溶液の
温度は、好ましくは約10℃〜約25℃に、より好ま
しくは15℃〜20℃の間に維持される。この第４溶
液からの沈殿の形成のための期間は、約１日〜約
17日である。より好ましくは約３日〜７日の間
で、そして最も好ましくは約３日かまたはそれ以
上である。識別の目的で、この第４溶液に由来す
る沈殿および母液を四次沈殿および四次母液と称
する。 第１図は、出発溶液の形成８、次に出発溶液へ
のβ−シクロデキストリン包接化合物を形成する
化合物の添加による一次沈殿および一次母液の形
成に関する本発明の方法を図示する。 次の段階は、出発溶液に由来する一次沈殿を回
収するためのものである１２。次に、第２溶液
は、一次沈殿と水とを加熱し、そして攪拌して形
成される１４。二次沈殿および二次母液は、第２
溶液へのβ−シクロデキストリン包接化合物の形
成する化合物の添加により、第２溶液から形成さ
れる１６。第２溶液に由来する二次母液が回収さ
れ１８、そして最後に、分枝したβ−シクロデキ
ストリンが二次母液から回収される。 第２図は、洗浄段階２２が一次沈殿と洗浄した
一次沈殿に由来する第２溶液の形成１４′との間
で実施される本発明の好ましい態様を図示し、そ
の他の点では、第１図の段階１６〜２０が実施さ
れ、そして段階１２の前には段階８および１０が
実施される。 第３図は、第３溶液から三次母液および三次沈
殿が形成される本発明のさらに別の好ましい態様
が図示され、そしてこの第３溶液は、二次母液か
ら形成されるものである。β−シクロデキストリ
ン包接化合物を形成する化合物は、この第３溶液
に添加され、三次沈殿および三次母液が形成され
る。三次沈殿は、回収され２６、そして三次母液
から分枝したβ−シクロデキストリンが回収され
る。２８。 第４図は、抽出段階を図示する。出発または第
１溶液に由来する一次沈殿を回収した１２後、一
次沈殿が段階３０にかけられる。抽出段階から抽
出溶液が回収され３２、そして濃縮および乾燥処
理を施して分枝したβ−シクロデキストリンが回
収される３４。抽出段階後に回収される一次沈殿
３６は、第２溶液１４″の形成に使用される。段
階１６から２０は、１４″後に続いて遂行される。 第５図は、一次沈殿段階の繰り返しを図示し、
ここでは、第４溶液が形成され３８、そして一次
沈殿と水との混合により重量で約24％〜40％間
の、そしてより好ましくは重量で約30％の濃度を
有する溶液が形成される。第４溶液へのβ−シク
ロデキストリン包接化合物を形成す化合物、好ま
しくはｐ−キシレンの添加により、四次沈殿およ
び四次母液が形成される。四次沈殿の形成後、そ
のものは回収される４２。次に、この四次沈殿が
使用され、前述の手順に従い第５図の第２溶液１
４を形成する。 例 １ 30％固形物として、炭水化物463ｇを含有する
出発水溶液に、ｐ−キシレン45mlを添加し、そし
て約20時間攪拌し、さらに14日間静置して、一次
沈殿を形成した。次に、溶液を減圧下でブフナ−
漏斗中の18.5cmの濾紙上で濾過した。濾過ケーク
を蒸留水約100mlでそれぞれ３度洗浄した。濾液
および洗液を廃棄し、そして濾過ケークを空気乾
燥した。約94ｇの空気乾燥シクロデキストリン／
ｐ−キシレン包接化合物を得た。この物質につい
て行つた分析を下記の第１表に示した。この分析
は、常法のHPLCカラム上で行うことができる。

【表】 キストリン
次に、濾過ケークを蒸留水11部（846ml）に添
加し、磁気棒で約17時間攪拌して、一次沈殿の抽
出段階を行つた。溶解されない物質を濾過で取り
除き、この濾過ケークを100mlずつの水で３度洗
浄した。濾過ケークを空気乾燥し、別にとつてお
いた。濾液および洗液を併わせ、10％の固形物に
なるまで蒸発せしめた。この時点で、溶液中に約
21.1ｇの固形物が存在し、そして攪拌しながら10
％固形物溶液にトルエン1.21ｇを添加した。攪拌
を室温で３日間続けた。形成される沈殿および前
記の沈殿を濾過により取り除き、そして水24mlず
つで３度洗浄した。沈殿は、約63ｇの炭水化物を
含んでいた。濾液および洗液を煮沸してトルエン
を除去し、濃縮し、そして110℃で乾燥した。こ
れを濾過物として示し、この濾過物の組成を下
記の第２表に記載した。 先の抽出段階の処理に由来する沈殿（炭水化物
63ｇ）を、蒸留水567ｇ（９部）に溶解し、煮沸
して溶剤を除去して第２溶液を形成した。次に、
攪拌しながらトルエン12.6ｇ（炭水化物固形物の
20％）を加えた。３日経過後、沈殿を濾過により
取り除き、さらに分枝していないβ−シクロデキ
ストリンを取り除くために、得られた濾液（第３
溶液）に固形物の10％のトルエン下に３日間維持
した。沈殿を濾過により取り除き、濾液と洗液を
煮沸してトルエンを除去し、濃縮しそして110℃
で乾燥し、このものを濾過物として示した。濾
過物の構成を下記の第２表に示した。 さらに、濾過物と濾過物から回収された総
生成物も併せて第２表に示した（なお、濾過物
と濾過物の合計値が総生成物の値いと正確に一
致していないのは、測定誤差と統計的な偏差に起
因する）。

【表】 【図面の簡単な説明】

第１図は、分枝したβ−シクロデキストリンに
関する本発明の広範囲な態様を図示するものであ
り、第２図は、本発明の好ましい洗浄段階を図示
するものであり、第３図は、本発明による三次沈
殿および三次母液を形成する付加的な段階を図示
するものであり、第４図は、高純度の分枝したβ
−シクロデキストリンを得ることができる、本発
明による他の段階を図示するものであり、そして
第５図は、本発明に用いることができる、さらに
もう一つの別の段階を図示するものである。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 分枝したβ−シクロデキストリンの精製およ
   び分離方法であつて、次の (a) 第１溶液にβ−シクロデキストリン包接化合
   物を形成する化合物（complexant）を添加し
   て一次沈殿および一次母液を形成し、 (b) 前記一次沈殿を回収し、 (c) 前記一次沈殿に水を混合して第２溶液を形成
   し、 (d) 前記第２溶液にβ−シクロデキストリン包接
   化合物を形成する化合物を添加して二次沈殿お
   よび二次母液を形成し、 (e) 前記二次母液を回収し、そして (f) 前記二次母液から分枝したβ−シクロデキス
   トリンを回収する、段階を含んでなる前記方
   法。 ２ β−シクロデキストリン包接化合物を形成す
   る化合物（complexant）が、ｐ−キシレンおよ
   びトルエンからなる群から選ばれる請求項１記載
   の方法。 ３ 段階(a)を、約３日間かまたはそれ以上の間、
   約10℃〜約25℃間の温度で行う請求項１記載の方
   法。 ４ 段階(a)および(d)の両方を、約３日間かまたは
   それ以上の間、約10℃〜約25℃間の温度で行う請
   求項１記載の方法。 ５ (a)と(b)の両段階で添加されるβ−シクロデキ
   ストリン包接化合物を形成する化合物
   （complexant）の量が、溶液中に存在するβ−シ
   クロデキストリン100重量部を基に、約20重量部
   である請求項１記載の方法。 ６ 段階(b)の後で、かつ段階(c)の前にさらに前記
   一次沈殿を洗浄する段階を含んでなる請求項１記
   載の方法。 ７ 分枝したβ−シクロデキストリンの精製およ
   び分離方法であつて、次の (a) 第１溶液にβ−シクロデキストリン包接化合
   物を形成する化合物（complexant）を添加し
   て一次沈殿および一次母液を形成し、 (b) 前記一次沈殿を回収し、 (c) 前記一次沈殿に水を混合して第２溶液を形成
   し、 (d) 前記第２溶液にβ−シクロデキストリン包接
   化合物を形成する化合物を添加して二次沈殿お
   よび二次母液を形成し、 (e) 前記二次母液を回収し、そして (f) 前記二次母液から第３溶液を形成し、 (g) 第３溶液にβ−シクロデキストリン包接化合
   物を形成する化合物を添加して、三次沈殿およ
   び三次母液を形成し、 (h) 前記三次母液を回収し、そして (i) 前記三次母液から分枝したβ−シクロデキス
   トリン を回収する、段階を含んでなる前記方法。 ８ β−シクロデキストリン包接化合物を形成す
   る化合物（complexant）が、ｐ−キシレンおよ
   びトルエンからなる群から選ばれる請求項７記載
   の方法。 ９ 段階(a)，(b)および(h)におけるβ−シクロデキ
   ストリン包接化合物を形成する化合物
   （complexant）の添加を、約３日間、約10℃〜約
   25℃間の温度で行う請求項７記載の方法。 １０ 段階(a)，(b)および(h)における前記β−シク
   ロデキストリン包接化合物を形成する化合物の添
   加量が、溶液中に存在するβ−シクロデキストリ
   ン100重量部を基に、約20重量部である請求項７
   記載の方法。