RS65437B1

RS65437B1 - (r) i (s) enantiomeri n-(5-(3-hidroksipirolidin-1-il)-2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin-6-il)-2-(2-metilpiridin-4-il)oksazol-karboksamida kao inhibitori irak4 za lečenje kancera

Info

Publication number: RS65437B1
Application number: RS20240415A
Authority: RS
Inventors: Venkateshwar Rao Gummadi; Susanta Samajdar
Original assignee: Aurigene Oncology Ltd
Priority date: 2014-01-13
Filing date: 2015-01-12
Publication date: 2024-05-31
Also published as: KR102785576B1; ZA202007276B; US11981685B2; IL317922A; US20250361244A1; SI3805233T1; PT3805233T; SMT201800680T1; ES2846678T3; CY1121433T1; AU2019283795B2; US10995100B2; ZA202007275B; JP2019077729A; IL311677A; SG10201811204RA; US10640517B2; US20240294547A1; EA031913B1; FI3805233T3

Description

Opis

[0001] Ova prijava zahteva pravo prvenstva po osnovu indijskih privremenih prijava 158/CHE/2014, podnete 13. januara 2014. i 3000/CHE/2014, podnete 20. juna 2014.

OBLAST PRONALASKA

[0002] Ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja korisna za lečenje kancera i inflamatornih bolesti povezanih sa kinazom povezanom sa receptorom interleukina-1 (IRAK) i preciznije na jedinjenja koja moduliraju funkciju IRAK-4. Pronalazak takođe obezbeđuje jedinjenja ovog pronalaska za upotrebu u postupcima lečenja bolesti povezanih sa IRAK-4.

OSNOV PRONALASKA

[0003] Kinaza-4 (IRAK-4) povezana sa receptorom interleukina-1 (IL-1) je enzim serin/treonin kinaza koji igra suštinsku ulogu u transdukciji signala pomoću receptora Toll/IL-1 (TIR). Različiti enzimi IRAK su ključne komponente u putevima transdukcije signala posredovanim receptorom interleukina-1 (IL-1R) i receptorima sličnim Toll-u (TLR) (Janssens, S, et al. Mol. Cell.11, 2003, 293-302). U familiji proteina IRAK kod sisara postoje četiri člana: IRAK-1, IRAK-2, IRAK-M i IRAK-4. Ove proteine karakteriše tipičan N-terminalni domen smrti koji posreduje u interakciji sa adapterskim proteinima familije MyD88 i centralno lociran kinazni domen. Pokazalo se da IRAK proteini, kao i MyD88, igraju ulogu u transdukciji signala različitih od onih koji potiču sa receptora IL-1R, uključujući signale pokrenute aktivacijom receptora IL-18 (Kanakaraj, et al. J. Exp. Med.

189(7): 1999, 1129-38) i receptora LPS (Yang, et al., J. Immunol.163, 1999, 639-643). Od četiri člana familije proteina IRAK kod sisara, smatra se da je IRAK-4 „glavni IRAK“. U uslovima prekomerne ekspresije, svi IRAK mogu da posreduju u aktivaciji nuklearnog faktora-kB (NF-kB) i stresom-indukovanih signalnih kaskada protein kinaze aktivirane mitogenom (MAPK). Međutim, pokazalo se da samo IRAK-1 i IRAK-4 imaju aktivnu kinaznu aktivnost. Dok bi aktivnost IRAK-1 kinaze mogla da bude nepotrebna za njenu funkciju u IL-1 indukovanoj aktivaciji NF-kB (Kanakaraj et al, J. Exp. Med. 187(12), 1998, 2073-2079) i (Xiaoxia Li, et al. Mol. Cell. Biol.19(7), 1999, 4643-4652), IRAK-4 zahteva svoju kinaznu aktivnost za transdukciju signala (Li S, et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 99(8), 2002, 5567-5572) i (Lye, E et al, J. Biol. Chem. 279(39); 2004, 40653-8). S obzirom na centralnu ulogu IRAK4 u signalizaciji Toll-like/IL1R i imunološkoj zaštiti, inhibitori IRAK4 se koriste kao dragoceni terapeutici u lečenju inflamatornih bolesti, sepse i autoimunih poremećaja (Wietek C, et al, Mol. Interv. 2: 2002, 212-215).

[0004] Miševi kojima nedostaje IRAK-4 su vijabilni i pokazuju potpuno odsustvo proizvodnje inflamatornih citokina kao odgovor na IL-1, IL-18 ili LPS (Suzuki et al. Nature, 416(6882), 2002, 750-756). Slično, humani pacijenti kojima nedostaje IRAK-4 su ozbiljno imunokompromitovani i ne reaguju na ove citokine (Medvedev et al. J. Exp. Med., 198(4), 2003, 521-531 i Picard et al. Science 299(5615), 2003, 2076-2079). Knock-in miševi koji imaju neaktivan IRAK4 su potpuno otporni na šok izazvan lipopolisaharidima i CpG (Kim TW, et al. J Exp Med 204: 2007, 1025 -36) i (Kawagoe T, et al. J Exp Med 204(5): 2007, 1013-1024) i pokazuju da je kinazna aktivnost IRAK4 neophodna za proizvodnju citokina, aktivaciju MAPK i indukciju NF-κ B regulisanih gena kao odgovor na TLR ligande (Koziczak-Holbro M, et al. J Biol Chem; 282 (18): 2007; 13552 -13560). Inaktivacija IRAK4 kinaze (IRAK4 KI) kod miševa dovodi do rezistencije na EAE zbog smanjenja infiltriranja inflamatornih ćelija u CNS i smanjene proizvodnje IL-17 posredovane antigen-specifičnim CD4+ T-ćelijama (Kirk A et al. The Journal of Immunology, 183(1), 2009, 568-577).

[0005] Kristalne strukture su otkrile da IRAK-4 sadrži karakteristična strukturna svojstva i serin/treonin i tirozin kinaze, kao i dodatne nove atribute, uključujući jedinstveni tirozinski ostatak čuvara kapije (eng. – gatekeeper). Strukturna analiza IRAK-4 otkrila je osnovnu sličnost sa familijom kinaza; ATP-vezujući usek umetnut između strukture u vidu dva režnja. N-terminalni režanj se sastoji uglavnom od uvijene petolančane antiparalelne beta-ploče i jednog alfa-heliksa, a veći C-terminalni režanj je pretežno u vidu alfa-heliksa. Ipak, struktura otkriva nekoliko jedinstvenih svojstava IRAK-4 kinaze, uključujući dodatni alfa-heliks sa N-terminalnog produžetka u N-terminalnom režnju, dužu petlju između heliksa alfa-D i alfa-E i značajno pomereni heliks alfa G, kao i njemu susedne petlje. ATP-vezujuće mesto u IRAK-4 nema dubok džep pozadi, ali ima karakterističan prednji džep. Ovaj jedinstveno oblikovan džep za vezivanje pruža odličnu priliku za dizajniranje inhibitora IRAK-4.

[0006] Razvoj inhibitora IRAK-4 kinaze stvorio je nekoliko novih klasa povezivača proteina koji uključuju tiazol i piridin amide (George M Buckley, et al. Bioorg. Med. Chem. Lett., 18(11), 2008, 3211-3214), aminobenzimidazole (Powers JP, et al. Bioorg. Med. Chem. Lett., 16(11), 2006, 2842-2845), imidazo[1,2-a] piridine (Buckley GM, et al. Bioorg. Med. Chem. Lett.18(11), 2008, 3656-3660) i (Buckley G, et al. Bioorg. Med. Chem. Lett.18(11), 2008, 3291-3295), imidazo[1,2-b]piridazine i benzimidazol-indazole (WO2008030579; WO2008030584). Po svemu sudeći, svi su još uvek u ranoj pretkliničkoj fazi. WO2010/071819 opisuje biciklične heterociklične derivate za lečenje dijabetesa i srodnih metaboličkih bolesti. WO2013/042137 opisuje biciklična heterociklilna jedinjenja inhibitora kinaze kao inhibitore IRAK4.

[0007] Uprkos brojnim otkrićima o različitim inhibitorima kinaze, sa porastom broja pacijenata pogođenih bolestima posredovanim enzimom kinaze, javlja se nezadovoljena potreba za novijim lekovima kojima takve bolesti mogu efikasnije da se leče. Još uvek postoji potreba za novijim inhibitorima kinaze uključujući multikinazne inhibitore, koji se takođe mogu koristiti u lečenju poremećaja izazvanih varijacijama u aktivnosti različitih kinaza, i koji imaju širu ulogu. Oni takođe mogu da se koriste kao deo drugih terapeutskih režima za lečenje poremećaja, sami ili u kombinaciji sa jedinjenjima protein kinaze dobro poznatim stručnjacima u ovoj oblasti.

CILJEVI PRONALASKA

[0008] Jedan cilj ovde je da se obezbede biciklična heterociklilna jedinjenja, kao što je ovde definisano, ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, kao inhibitori kinaze, konkretno inhibitori IRAK4.

[0009] Još jedan cilj je obezbeđivanje bicikličnih heterociklilnih derivata, kako je ovde definisano, ili farmaceutski prihvatljive soli, za lečenje i prevenciju bolesti ili poremećaja, konkretno za njihovu upotrebu kod bolesti ili poremećaja kod kojih inhibicija enzima kinaze, tačnije enzima IRAK4, predstavlja prednost.

SUŠTINA PRONALASKA

[0010] U jednom aspektu prema ovom pronalasku, obezbeđeno je jedinjenje odabrano od

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu je čistoća jedinjenja najmanje 95%, određeno tečnom hromatografijom visokih performansi (HPLC).

[0011] Tačnije, pronalazak se odnosi na biciklična heterociklilna jedinjenja definisana gore, ili farmaceutski prihvatljive soli, kao lek, inhibiranjem IRAK ili IRAK4 ili drugih srodnih kinaza.

[0012] Biciklični heterociklilni derivati ovog pronalaska imaju terapeutsku ulogu inhibicije IRAK ili IRAK4 ili drugih srodnih kinaza korisnu u oblasti bolesti i/ili poremećaja koji uključuju, ali nisu ograničeni na kancere, alergijske bolesti i/ili poremećaje, autoimune bolesti i/ili poremećaje, inflamatorne bolesti i/ili poremećaje i/ili stanja povezana sa inflamacijom i bolom, proliferativne bolesti, hematopoetske poremećaje, hematološke malignitete, poremećaje kostiju, fibrotične bolesti i/ili poremećaje, metaboličke poremećaje, mišićne bolesti i/ili poremećaje, respiratorne bolesti i/ili poremećaje, plućne bolesti i/ili poremećaje, genetske razvojne bolesti i/ili neurološke i neurodegenerativne bolesti i/ili poremećaje, hronične inflamatorne demijelinizacione neuropatije, kardiovaskularne, vaskularne ili srčane bolesti i/ili poremećaje, oftalmološke/očne bolesti i/ili poremećaje, zarastanje rana, infekcije i virusna oboljenja. Stoga će inhibicija jedne ili više kinaza imati višestruke terapeutske indikacije.

DETALJAN OPIS PRONALASKA

[0013] Osim ako nije drugačije definisano, svi tehnički i naučni termini korišćeni ovde imaju isto značenje koje obično podrazumeva stručnjak u oblasti kojoj pripada predmet koji se ovde razmatra. Kako se koristi u specifikaciji i priloženim zahtevima, osim ukoliko nije drugačije specificirano, sledeći termini imaju navedeno značenje u cilju lakšeg razumevanja ovog pronalaska.

[0014] Neodređeni i određeni oblici jednine „neki“, „jedan“ i „taj“ obuhvataju i množinu osim ako kontekst jasno ne navodi drugačije.

[0015] Kako se ovde koristi, termin „uključujući“, kao i drugi oblici, kao što su „uključuju“, „uključuje“ i „uključeno“, nisu ograničavajući.

[0016] Izraz „farmaceutski prihvatljiv“ odnosi se na jedinjenja ili kompozicije koje su fiziološki podnošljive i koje tipično ne izazivaju alergijsku ili sličnu neželjenu reakciju, uključujući, ali ne ograničavajući se na želudačne tegobe ili vrtoglavicu kada se daju sisarima.

[0017] Izraz „farmaceutski prihvatljiva so“ odnosi se na proizvod dobijen reakcijom jedinjenja ovog pronalaska sa odgovarajućom kiselinom ili bazom. Farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja ovog pronalaska uključuju one izvedene iz pogodnih neorganskih baza kao što su soli Li, Na, K, Ca, Mg, Fe, Cu, Al, Zn i Mn; primeri farmaceutski prihvatljivih, netoksičnih kiselih adicionih soli su soli amino grupe formirane sa neorganskim kiselinama kao što su hidrohlorid, hidrobromid, hidrojodid, nitrat, sulfat, bisulfat, fosfat, izonikotinat, acetat, laktat, salicilat, citrat, tartarat, pantotenat, bitartarat, askorbat, sukcinat, maleat, gentizinat, fumarat, glukonat, glukaronat, saharat, format, benzoat, glutamat, metansulfonat, etansulfonat, benzensulfonat, 4-metilbenzensulfonat ili p-toluensulfonat i slične soli. Određena jedinjenja pronalaska (jedinjenja formule (I)) mogu da formiraju farmaceutski prihvatljive soli sa različitim organskim bazama, kao što su lizin, arginin, guanidin, dietanolamin ili metformin. Pogodne bazne soli uključuju, ali nisu ograničene na soli aluminijuma, kalcijuma, litijuma, magnezijuma, kalijuma, natrijuma ili cinka.

[0018] Kako se ovde koristi, termin „farmaceutski prihvatljiv nosač“ odnosi se na bilo koji od standardnih farmaceutskih nosača, kao što je fosfatno puferisani fiziološki rastvor, voda, emulzije (npr., kao što su emulzije ulje/voda ili voda/ulje) i različite vrste sredstva za vlaženje. Kompozicije takođe mogu uključivati stabilizatore i konzervanse. Primeri nosača, stabilizatora i adjuvansa se pominju u literaturi kao što je Martin, Remington's Pharmaceutical Sciences, 15th Ed., Mack Publ. Co., Easton, PA [1975].

[0019] Termin „tretman“/„lečenje“ označava bilo koji tretman bolesti kod sisara, uključujući: (a) inhibiciju bolesti, tj. usporavanje ili zaustavljanje razvoja kliničkih simptoma; i/ili (b) olakšavanje bolesti, tj. izazivanje regresije kliničkih simptoma i/ili (c) ublažavanje ili suzbijanje bolesti i/ili pratećih simptoma.

[0020] Kako se ovde koriste, termini „sprečiti“, „sprečavanje“ i „prevencija“ odnose se na postupak sprečavanja pojave bolesti i/ili njenih pratećih simptoma ili zaštite subjekta od dobijanja bolesti. Kako se ovde koriste, „sprečiti“, „sprečavanje“ i „prevencija“ takođe uključuju odlaganje početka bolesti i/ili njenih pratećih simptoma i smanjenje rizika kod subjekta za dobijanje bolesti.

[0021] Kako se ovde koristi, termin „subjekt“ se odnosi na životinju, poželjno sisara i najpoželjnije čoveka.

[0022] Kako se ovde koristi, izraz „terapeutski efikasna količina“ se odnosi na količinu jedinjenja pronalaska, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, efikasnu u stvaranju željenog terapeutskog odgovora kod određenog pacijenta koji pati od bolesti ili poremećaja posredovanog enzimima kinaze, posebno enzimima IRAK ili IRAK4. Posebno, termin „terapeutski efikasna količina“ uključuje količinu jedinjenja pronalaska, ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, koja, kada se primenjuje, indukuje pozitivnu modifikaciju bolesti ili poremećaja koji se leči, ili je dovoljna da spreči razvoj, ili ublaži u izvesnoj meri, jedan ili više simptoma bolesti ili poremećaja koji se leči kod subjekta. Pod terapeutskom količinom jedinjenja se može smatrati količina jedinjenja koja se koristi za lečenje subjekta, koja je, u okviru pouzdane medicinske procene, dovoljno niska da se izbegnu nepotrebni ili ozbiljni neželjeni efekti. Terapeutski efikasna količina jedinjenja će varirati u zavisnosti od konkretnog stanja koje se leči, težine stanja koje se leči ili sprečava, trajanja tretmana, prirode istovremene terapije, starosti i fizičkog stanja krajnjeg korisnika, specifičnog upotrebljenog jedinjenja i konkretnog farmaceutski prihvatljivog nosača koji se koristi.

[0023] U jednom primeru izvođenja, ovaj pronalazak obezbeđuje jedinjenje odabrano od

ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, pri čemu je čistoća jedinjenja najmanje 95%, određeno tečnom hromatografijom visokih performansi (HPLC).

[0024] U daljem primeru izvođenja, jedinjenje pronalaska može biti za upotrebu u lečenju poremećaja ili bolesti ili stanja posredovanih enzimom IRAK4, pogodno izabranih iz grupe koja se sastoji od kancera, inflamatornog poremećaja, autoimune bolesti, metaboličkog poremećaja, naslednog poremećaja, bolesti povezane sa hormonima, poremećaja imunodeficijencije, stanja povezanog sa smrću ćelija, destruktivnog koštanog poremećaja, trombinom-indukovane agregacije trombocita, bolesti jetre i kardiovaskularnog poremećaja.

[0025] Pogodno, kancer je odabran iz grupe koja se sastoji od solidnog tumora, benignog ili malignog tumora, karcinoma mozga, bubrega, jetre, želuca, vagine, jajnika, tumora želuca, dojke, mokraćne bešike, debelog creva, prostate, pankreasa, pluća, grlića materice, testisa, kože, kosti ili štitne žlezde; sarkoma, glioblastoma, neuroblastoma, multiplog mijeloma, gastrointestinalnog kancera, tumora vrata i glave, epidermalne hiperproliferacije, psorijaze, hiperplazije prostate, neoplazije, adenoma, adenokarcinoma, keratoakantoma, epidermoidnog karcinoma, krupnoćelijskog karcinoma, nesitnoćelijskog karcinoma pluća, Hočkinovog i ne-Hočkinovog limfoma, karcinoma mlečne žlezde, folikularnog karcinoma, papilarnog karcinoma, seminoma, melanoma; hematoloških maligniteta odabranih od leukemije, difuznog krupnoćelijskog B limfoma (DLBCL), aktiviranog DLBCL sličnog B-ćelijama, hronične limfocitne leukemije (CLL), hroničnog limfocitnog limfoma, primarnog limfoma sa izlivom, Burkitovog limfoma/leukemije, akutne limfocitne leukemije, B-ćelijske prolimfocitne leukemije, limfoplazmacitnog limfoma, Waldenstromove makroglobulinemije (WM), limfoma marginalne zone slezine, intravaskularnog krupnoćelijskog B limfoma, plazmacitoma i multiplog mijeloma.

[0026] Pogodno, inflamatorni poremećaj je odabran iz grupe koja se sastoji od alergija oka, konjunktivitisa, suvog keratokonjunktivitisa, prolećnog konjunktivitisa, alergijskog rinitisa, autoimunih hematoloških poremećaja (npr. hemolitička anemija, aplastična anemija, čista aplazija crvenih krvnih zrnaca i idiopatska trombocitopenija), sistemskog eritemskog lupusa, reumatoidnog artritisa, polihondritisa, skleroderme, Wegenerove granulamatoze, dermatomiozitisa, hroničnog aktivnog hepatitisa, mijastenije gravis, Steven-Johnsonovog sindroma, idiopatskog sprua, autoimune inflamatorne bolesti creva (npr. ulcerozni kolitis i Kronova bolest), sindroma iritabilnog kolona, celijakije, parodontopatije, oboljenja hijalinske membrane, bolesti bubrega, glomerularne bolesti, alkoholne bolesti jetre, multiple skleroze, endokrine ofalmopatije, Gravesove bolesti, sarkoidoze, alveolitisa, hroničnog hipersenzitivnog pneumonitisa, primarne bilijarne ciroze, uveitisa (anteriornog i posteriornog), Sjogrenovog sindroma, intersticijalne fibroze pluća, psorijatičnog artritisa, sistemskog juvenilnog idiopatskog artritisa, nefritisa, vaskulitisa, divertikulitisa, intersticijalnog cistitisa, glomerulonefritisa (npr. uključujući idiopatski nefrotički sindrom ili nefropatiju sa minimalnim promenama), hronične granulomatozne bolesti, endometrioze, leptospirozne bolesti bubrega, glaukoma, oboljenja mrežnjače, glavobolje, bola, sindroma kompleksnog regionalnog bola, hipertrofije srca, gubitka mišićne mase, kataboličkih poremećaja, gojaznosti, zastoja u rastu fetusa, hiperholesterolemije, srčanog oboljenja, hronične srčane insuficijencije, mezotelioma, anhidrotične ekodermalne displazije, Behčetove bolesti, inkontinencije pigmenti, Pagetove bolesti, pankreatitisa, sindroma nasledne periodične groznice, astme, akutne povrede pluća, akutnog respiratornog distres sindroma, eozinofilije, preosetljivosti, anafilakse, fibrozitisa, gastritisa, gastroenteritisa, nazalnog sinuzitisa, alergije oka, bolesti izazvanih silicijum dioksidom, hronične opstruktivne bolesti pluća (COPD), cistične fibroze, oštećenja pluća izazvanog kiselinom, plućne hipertenzije, polineuropatije, katarakte, upale mišića povezane sa sistemskom sklerozom, miozitisa sa inkluzionim telima, miastenije gravis, tiroiditisa, Adisonove bolesti, lihen planusa, apendicitisa, atopijskog dermatitisa, astme, alergije, blefaritisa, bronhiolitisa, bronhitisa, burzitisa, cervicitisa, holangitisa, holecistitisa, hroničnog odbacivanja transplantata, kolitisa, konjunktivitisa, cistitisa, dakrioadenitisa, dermatitisa, juvenilnog reumatoidnog artritisa, dermatomiozitisa, encefalitisa, endokarditisa, endometritisa, enteritisa, enterokolitisa, epikondilitisa, epididimitisa, fasciitisa, purpure Henoch-Schonlein, hepatitisa, supurativnog hidradenitisa, imunoglobulin A nefropatije, intersticijalne bolesti pluća, laringitisa, mastitisa, meningitisa, mijelitisa miokarditisa, miozitisa, nefritisa, ooforitisa, orhitisa, osteitisa, otitisa, pankreatitisa, parotitisa, perikarditisa, peritonitisa, faringitisa, pleuritisa, flebitisa, pneumonitisa, pneumonije, polimiozitisa, proktitisa, prostatitisa, pijelonefritisa, rinitisa, salpingitisa, sinuzitisa, stomatitisa, sinovitisa, tendonitisa, tonzilitisa, ulceroznog kolitisa, vaskulitisa, vulvitisa, alopecije areate, multiformnog eritema, herpetiformnog dermatitisa, skleroderme, vitiliga, hipersenzitivnog angiitisa, urtikarije, buloznog pemfigoida, pemfigusa vulgaris, pemfigusa foliaceus, paraneoplastičnog pemfigusa, stečene bulozne epidermolize, akutnog i hroničnog gihta, hroničnog gihtnog artritisa, psorijaze, psorijatičnog artritisa, reumatoidnog artritisa, periodičnog sindroma povezanog sa kriopirinom (CAPS) i osteoartritisa.

[0027] U sledećem primeru izvođenja, ovaj pronalazak obezbeđuje jedinjenje ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, kako je ovde definisano, za upotrebu u lečenju kancera, inflamatornog poremećaja, autoimune bolesti, metaboličkog poremećaja, naslednog poremećaja, bolesti povezane sa hormonima, poremećaja imunodeficijencije, stanja povezanog sa smrću ćelija, destruktivnog koštanog poremećaja, trombinom-indukovane agregacije trombocita, bolesti jetre i kardiovaskularnog poremećaja.

[0028] Pogodno, neurodegenerativna bolest je odabrana iz grupe koja se sastoji od Alchajmerove bolesti, Parkinsonove bolesti, amiotrofne lateralne skleroze, Hantingtonove bolesti, cerebralne ishemije i neurodegenerativne bolesti uzrokovane traumatskom povredom, glutamatne neurotoksičnosti, hipoksije, epilepsije i bolesti transplantata protiv domaćina.

[0029] Jedinjenja ovog pronalaska mogu da se pripreme od lako dostupnih polaznih materijala, korišćenjem sledećih opštih postupaka i procedura. Jasno je da tamo gde su dati tipični ili poželjni eksperimentalni uslovi (tj. temperature reakcija, vreme, molovi reagenasa, rastvarači itd.), mogu da se koriste i drugi eksperimentalni uslovi, osim ako nije drugačije navedeno. Optimalni uslovi reakcije mogu da variraju u zavisnosti od konkretnih reaktanata ili rastvarača koji se koriste, ali takve uslove stručnjak u ovoj oblasti može da odredi korišćenjem rutinskih postupaka optimizacije. Osim toga, pomoću detaljno opisanih postupaka, prosečan stručnjak može da pripremi dodatna jedinjenja ovog pronalaska za koja se ovde traži zaštita. Sve temperature su izražene u stepenima Celzijusa (°C) ukoliko nije drugačije naznačeno.

[0030] U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja ovog pronalaska mogu takođe da sadrže neprirodne proporcije atomskih izotopa na jednom ili više atoma koji čine takva jedinjenja. Na primer, ovaj pronalazak takođe obuhvata izotopski obeležene varijante ovog pronalaska koje su identične onima ovde navedenim, ali zbog činjenice da je jedan ili više atoma jedinjenja zamenjeno atomom koji ima atomsku masu ili maseni broj različit od preovlađujuće atomske mase ili masenog broja atoma koji se obično nalaze u prirodi. Svi izotopi bilo kog određenog atoma ili elementa kako su specificirani su obuhvaćeni obimom jedinjenja pronalaska i njihovih upotreba. Primeri izotopa koji se mogu ugraditi u jedinjenja pronalaska uključuju izotope vodonika, ugljenika, azota, kiseonika, fosfora, sumpora, fluora, hlora i joda, kao npr.<2>Н („D”),<3>Н,<11>С,<13>С,<14>С,<l3>N,<15>N,<15>O,<l7>O,<l8>O,<32>Р,<33>Р,<35>S,<18>F,<36>Cl,<l23>I i<125>I. Izotopski obeležena jedinjenja ovog pronalaska se generalno mogu pripremiti primenom procedura analognih onima opisanim na šemama i/ili u primerima u nastavku, zamenom izotopski obeleženog reagensa za reagens koji nije izotopski obeležen.

Primeri

[0031] Podaci MS (masena spektrometrija) koji su dati u primerima dobijeni su pomoću sledeće opreme:

API 2000 LC/MS/MS/sa tri kvadrupola,

Agilent (1100) Technologies/LC/MS/DVL/sa jednim kvadrupolom i

Shimadzu LCMS-2020/sa jednim kvadrupolom.

[0032] Podaci NMR koji su dati u primerima dobijeni su korišćenjem opreme -<1>H-NMR: Varian-300, 400 i 600 MHz.

[0033] Skraćenice koje se koriste u ovoj specifikaciji mogu se sažeti u nastavku sa njihovim specifičnim značenjima.

[0034] °C (stepeni Celzijusa); δ (delta); % (procenat); Ac2O (anhidrid sirćetne kiseline); (Boc)2O (Boc anhidrid); bs (široki singlet); CDCl3(deuterisani hloroform); CH2Cl2/DCM (dihlorometan); DMF (dimetilformamid); DMSO (dimetil sulfoksid); DIPEA/DIEA (N, N-diizoopropil etilamin); DAST (dietilaminosumpor trifluorid); DMAP (dimetil amino piridin); DMSO-d6(deuterisani DMSO); d (dublet); dd (dublet dubleta); EDCI. HCl (1-(3-dimetil aminopropil)-3-karbodiimid hidrohlorid); EtOAc (etil acetat); EtOH (etanol); Fe (prah gvožđa); g (gram); H ili H2(vodonik); H2O (voda); HATU (1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridinijum 3-oksid heksafluorofosfat); HOBt (1-hidroksi benzotriazol); H2SO4(sumporna kiselina); HCl (hlorovodonična kiselina ili hidrohloridna so); h ili hr (časovi); Hz (herc); HPLC (tečna hromatografija visokih performansi); J (konstanta kuplovanja); K2CO3(kalijum karbonat); KOAc (kalijum acetat); KNO3(kalijum nitrat); LiOH (litijum hidroksid); NaHMDS (natrijum bis(trimetilsilil)amid); MeOH/CH3OH (metanol); mmol (milimol); M (molarni); ml (mililitar); mg (miligram); m (multiplet); mm (milimetar); MHz (megaherc); MS (ES) (masena spektroskopija elektro spreja); min (minuti); NaH (natrijum hidrid); NaHCO3(natrijum bikarbonat); Na2SO4(natrijum sulfat); NH4Cl (amonijum hlorid); N2(azot); NMR (nuklearna magnetna rezonantna spektroskopija); Pd(PPh3)2Cl2(Bis(trifenilfosfin)paladijum(II) dihlorid); Pd(OAc)2(paladijum diacetat); Pd(dppf)Cl2(1,1’-Bis(difenilfosfino)ferocen) paladijum(II) dihlorid; RT (sobna temperatura); s (singlet); TBAF (tetra-n-butilamonijum fluorid); TEA (trietilamin); TFA (trifluorosirćetna kiselina); TLC (tankoslojna hromatografija); THF (tetrahidrofuran); TFA (trifluorosirćetna kiselina); t (triplet); i Zn(CN)2(cink cijanid).

[0035] Jedinjenja ovog pronalaska se mogu dobiti sintetičkim hemijskim postupcima, čiji su primeri ovde prikazani. Podrazumeva se da redosled koraka u postupcima može da varira, da konkretno pomenuti reagensi, rastvarači i reakcioni uslovi mogu da se izmene i da reaktivne grupe mogu da budu protektovane i deprotektovane po potrebi.

INTERMEDIJERI

Intermedijer 1: Sinteza terc-butil (5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin-2-il)karbamata

[0036]

Korak 1: Priprema terc-butil (5-bromopiridin-2-il)karbamata

[0037] U rastvor 5-bromopiridin-2-amina (5.0 g, 28.901 mmol) u DCM (50 mL) dodat je DMAP (5.28 g, 43.351 mmol) i Boc anhidrid (7.56 g, 34.682 mmol) i mešan na RT tokom noći. Rastvarač je uklonjen destilacijom i smeša je prečišćena hromatografijom na koloni silika gela 60-120 korišćenjem 30% etil acetata u heksanu kao eluenta da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (5.5 g, 69.62%).

<1>HNMR (CDCl3,300 MHz): δ 8.327-8.320 (d, 1H), 8.10 (bs, 1H),7.92-7.89 (d, 1H), 7.76-7.73 (dd, 1H), 1.55 (s, 9H). LCMS: m/z: 217.0 (M-Boc)<+>.

Korak 2: Priprema terc-butil (5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin-2-il)karbamata

[0038] U hermetički zatvorenoj epruveti, terc-butil (5-bromopiridin-2-il)karbamat (5.0 g, 0.18315 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolan) (6.02 g, 23.8 mmol) i kalijum acetat (5.38 mg, 54.945 mmol) su rastvoreni u 1,4-dioksanu (50 mL) i pročišćeni argonom tokom 10 min. Dodat je Pd(dppf)Cl2(669 mg, 0.915 mmol) i smeša je zagrevana na 100 °C tokom 2 h. Rastvarač je uklonjen destilacijom i smeša je prečišćena hromatografijom na koloni silika gela 60-120 korišćenjem 40% etil acetata u heksanu kao eluenta da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (5.0 g, 85.32%).

PRIMERI

Primer 1 (referentni)

6'-amino-N-(2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin-6-il)-[2,3'-bipiridin]-6-karboksamid [0039]

Korak 1: Priprema oksazolo[4,5-b]piridin-2-tiola

[0040] Rastvor 2-aminopiridin-3-ola (5.0 g, 45.45 mmol) i kalijum etil ksantata (8.0 g, 49.99 mmol) u piridinu (50 mL) je zagrevan na 110 °C preko noći. Reakciona smeša je ohlađena na 0 °C, dodata je ledena voda i smeša je acidifikovanaa sa konc. HCl. Čvrsta supstanca je filtrirana i osušena pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (6.0 g, 86.95%).

<1>HNMR (DMSO-d6, 300MHz): δ 8.24-8.22 (d, 1H), 7.90-7.87 (d, 1H), 7.30-7.26 (m, 1H). LCMS: m/z: 153.0 (M+1)<+>.

Korak 2: Priprema 2-(metiltio)oksazolo[4,5-b]piridina

[0041] U mešani rastvor oksazolo[4,5-b]piridin-2-tiola (3.0 g, 19.73 mmol) u etil acetatu (30 mL) dodat je kalijum karbonat (3.81 g, 27.62 mmol) i metil jodid (3.08 g, 21.71 mmol) i smeša je mešana na RT preko noći. Reakciona smeša je razblažena vodom (100 ml), ekstrahovana etil acetatom (2x50 mL), osušena preko natrijum sulfata i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (3.0 g, 93.75%).

<1>HNMR (CDCl3, 300MHz): δ 8.46-8.44 (d, 1H), 7.71-7.68 (d, 1H), 7.20-7.15 (m, 1H), 2.81 (s, 3H). LCMS: m/z: 167.0(M+1)<+>.

Korak 3: Priprema 2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridina

[0042] U rastvor 2-(metiltio)oksazolo[4,5-b]piridina (2.0 g,12.12 mmol) u THF (5 mL) dodat je morfolin (5 mL) i zagrevan na 75 °C preko noći. Rastvarač je uklonjen destilacijom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2.0 g, 83.3%).

<1>HNMR (DMSO-d6, 300MHz): δ 8.20-8.10 (d, 1H), 7.80-7.70 (d, 1H), 7.15-7.00 (m, 1H), 3.75-3.72 (m, 4H), 3.63-3.52 (m, 4H). LCMS: m/z: 206.5 (M+1)<+>.

Korak 4: Priprema 2-morfolino-6-nitrooksazolo[4,5-b]piridina

[0043] Rastvoru 2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridina (1.0 g, 4.854 mmol) u sirćetnoj kiselini (10 mL), dodata je pušljiva azotna kiselina (6 mL) i zagrevana na 100 °C tokom 4 sata. Reakciona smeša je ohlađena do 0 °C, dodat je led i čvrsta supstanca filtrirana da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (800 mg, 66.6%).<1>HNMR (DMSO-d6, 300MHz): δ 9.11-9.10 (d, 1H), 8.567-8.560 (d, 1H), 3.75 (s, 8H). LCMS: m/z: 250.9(M+1)<+>.

Korak 5: Priprema 2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin-6-amina

[0044] U rastvor 2-morfolino-6-nitrooksazolo[4,5-b]piridina (700 mg, 2.8 mmol) u THF dodat je amonijum hlorid (2.37 g, 44.80 mmol) u vodi (5 mL) i prah cinka (1.82 g, 28.0 mmol) i smeša je mešana na 50 °C tokom 1 h. Katalizator je filtriran kroz Celite<®>, smeša je ekstrahovana sa DCM (2 x 100 mL) i rastvarač je uklonjen destilacijom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (600 mg, 97.4%). LCMS: m/z: 221.1 (M+1)<+>.

Korak 6: Priprema 6-bromo-N-(2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin-6-il)pikolinamida

[0045] Rastvor 2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin-6-amina (600 mg, 2.727 mmol), 6-bromopikolinske kiseline (661 mg, 3.27 mmol), EDCI.HCl (797 mg, 4.09 mmol), HOBt (552 mg, 4.09 mmol), DIPEA (1.05 g, 8.181 mmol) u DMF (5 mL) je mešan na RT preko noći. Reakciona smeša je ugašena ledenom vodom i jedinjenje je ekstrahovano u etil acetatu (2x25 mL), osušeno preko natrijum sulfata i koncentrovano. Dobijeni sirovi proizvod je filtriran primenom hromatografije na koloni silika gela 60-120 i jedinjenje je eluirano korišćenjem 5% metanola u DCM kao eluenta da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (350 mg, 31.8%).

<1>HNMR (CDCl3, 300MHz): δ 9.79 (s, 1H), 8.46-8.45 (d, 1H), 8.32-8.31 (d, 1H), 8.26-8.23 (d, 1H), 7.82-7.68 (m, 2H), 3.85-3.67 (m, 8H). LCMS: m/z: 405.6 (M+1)<+>.

Korak 7: Priprema terc-butil (6-((2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin-6-il)karbamoil)-[2,3'-bipiridin]-6'-il)karbamata

[0046] U hermetički zatvorenu epruvetu su dodati 6-bromo-N-(2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin-6-il)pikolinamid(350 mg, 0.866 mmol), terc-butil (5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin-2-il)karbamat (360 mg, 1.126 mmol) (intermedijer 1), natrijum karbonat (275 mg, 2.598 mmol) u 1,2-dimetoksietanu (10 mL) i voda (2 mL). Reakciona smeša je pročišćena argonom 10 min, dodat je Pd(PPh3)2Cl2(31 mg, 0.043 mmol) i smeša je zagrevana na 95 °C preko noći. Rastvarač je uklonjen destilacijom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela 60-120 korišćenjem 5% metanola u DCM kao eluenta da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (300 mg, 67.11%). LCMS: m/z: 517.7 (M+1)<+>.

Korak 8: 6'-amino-N-(2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin-6-il)-[2,3'-bipiridin]-6-karboksamid

[0047] TFA (5 mL) je dodat u rastvor terc-butil (6-((2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin-6-il)karbamoil)-[2,3'-bipiridin]-6'-il)karbamata (300 mg, 0.580 mmol) u DCM (1 mL) i mešan na RT tokom 1 h. Nakon završetka reakcije, ovo je zatim prečišćeno pomoću prep. HPLC da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (34 mg, 14.05%).

<1>HNMR (DMSO-d6, 300MHz): δ 10.06 (s, 1H), 8.96-8.95 (d, 1H), 8.58-8.44 (d, 1H), 8.44-8.40 (dd, 1H), 8.31-8.30 (d, 1H), 8.11-7.95 (m, 3H), 6.59-6.56 (d, 1H), 6.38 (s, 2H), 3.75-3.66 (m, 8H).

LCMS: 98.20%, m/z = 418.1 (M+1)<+>. HPLC: 98.32%.

Primer 2 (referentni)

6'-amino-N-(5-ciklopropil-2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin-6-il)-[2,3'-bipiridin]-6-karboksamid hidrohlorid

[0048]

Korak 1: Priprema 2-amino-6-hloropiridin-3-ola

[0049] Pod istim reakcionim uslovima kao što je opisano u koraku 5 primera 1, 6-hloro-2-nitropiridin-3-ol (35 mg, 0.201 mmol) je redukovan prahom cinka (65 mg, 1.005 mmol) i amonijum hloridom (54 mg, 1.005 mmol).) u THF (2 mL) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (25 mg, 89%). LCMS: m/z: 145.2 (M+1)<+>.

Korak 2: Priprema 5-hlorooksazolo[4,5-b]piridin-2-tiola

[0050] Pod istim reakcionim uslovima kao što je opisano u koraku 1 primera 1, 2-amino-6-hloropiridin-3-ol (25 mg, 0.173 mmol) je ciklizovan korišćenjem kalijum etil ksantata (33 mg, 0.208 mmol) u piridinu (1 mL) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (25 mg, 78%).

<1>HNMR (DMSO-d6, 300MHz): δ 7.94-7.90 (d, 1H), 7.38-7.35 (d, 1H). LCMS: m/z: 187.1(M+1)<+>.

Korak 3: Priprema 5-hloro-2-(metiltio)oksazolo[4,5-b]piridina

[0051] Pod istim reakcionim uslovima kao što je opisano u koraku 2 primera 1, 5-hlorooksazolo[4,5-b]piridin-2-tiol (620 mg, 3.33 mmol) je metilovan korišćenjem kalijum karbonata (689 mg, 4.99 mmol) i metil jodida (567 mg, 3.99 mmol) u etil acetatu (10 mL) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (720 mg, 90%).LCMS: m/z: 201.1 (M+1)<+>.

Korak 4: Priprema 5-hloro-2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridina

[0052] Pod istim reakcionim uslovima kao što je opisano u koraku 3 primera 1, 5-hloro-2-(metiltio)oksazolo[4,5-b]piridin je supstituisan korišćenjem morfolina (2 mL) i THF (10 mL) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (750 mg, 88%).

<1>HNMR (DMSO-d6, 400MHz): δ 7.82-7.80 (d, 1H), 7.08-7.06 (d, 1H), 3.74-3.64 (m, 8H). LCMS: m/z: 240.2(M+1)<+>.

Korak 5: Priprema 5-hloro-2-morfolino-6-nitrooksazolo[4,5-b]piridina

[0053] Pod istim reakcionim uslovima kao što je opisano u koraku 4 primera 1, 5-hloro-2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin (50 mg) je nitriran korišćenjem sirćetne kiseline (0.2 mL) i pušljive azotne kiseline (0.1 mL) na 100 °C tokom 2 h da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (25 mg, 43%).

<1>HNMR (DMSO-d6, 300MHz): δ 8.60 (s, 1H), 3.72 (s, 8H)<+>.

Korak 6: Priprema 5-ciklopropil-2-morfolino-6-nitrooksazolo[4,5-b]piridina

[0054] Pod istim reakcionim uslovima kao što je opisano u koraku 7 primera 1, 5-hloro-2-morfolino-6-nitrooksazolo[4,5-b]piridin (25 mg, 0.088 mmol) je kuplovan sa ciklopropil boronskom kiselinom (9 mg, 0.105 mmol) korišćenjem kalijum karbonata (24 mg, 0.176 mmol) i Pd(PPh3)4(5 mg, 0.004 mmol) u ksilenu (2 mL) da bi se dobio sirovi proizvod (50 mg). LCMS: m/z: 291.1 (M+1)<+>.

Korak 7: Priprema 5-ciklopropil-2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin-6-amina

[0055] Pod istim reakcionim uslovima kao što je opisano u koraku 5 primera 1, 5-ciklopropil-2-morfolino-6-nitrooksazolo[4,5-b]piridin (220 mg, 0.758 mmol) je redukovan prahom cinka (394 mg, 6.068 mmol) i amonijum hloridom (327 mg, 6.068 mmol) u THF/metanolu/H2O (5mL/1ml/0.5mL) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (160 mg, 84%). LCMS: m/z: 261.0 (M+1)<+>.

Korak 8: Priprema 6-bromo-N-(5-ciklopropil-2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin-6-il)pikolinamida

[0056] Pod istim reakcionim uslovima kao što je opisano u koraku 6 primera 1, 5-ciklopropil-2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin-6-amin (100 mg, 0.384 mmol) je kuplovan sa 6-bromopikolinskom kiselinom (85 mg, 0.423 mmol) korišćenjem EDCI.HCl (110 mg, 0.576 mmol), HOBt (77 mg, 0.576 mmol), TEA (0.22 mL, 1.538 mmol) u DMF (2 mL) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (75 mg, 44%). LCMS: m/z: 444.2 (M+1)<+>.

Korak 9: Priprema terc-butil (6-((5-ciklopropil-2-morfolinooksazolo[4,5-b] piridin-6-il)karbamoil)-[2,3'-bipiridin]-6'-il) karbamata

[0057] Pod istim reakcionim uslovima kao što je opisano u koraku 7 primera 1, 6-bromo-N-(5-ciklopropil-2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin-6-il)pikolinamid (75 mg, 0.169 mmol) je kuplovan sa terc-butil (5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin-2-il)karbamatom (65 mg, 0.203 mmol) (intermedijer 1) korišćenjem natrijum karbonata (53 mg, 0.507 mmol) i Pd(PPh3)2Cl2(7 mg, 0.0084 mmol) u 1,2-dimetoksietanu (5 mL) da bi se dobio sirovi proizvod. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela 60-120 korišćenjem 50% etil acetata u heksanu kao eluenta da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (50 mg, 54%). LCMS: m/z: 558.2 (M+1)<+>.

Korak 10: Priprema 6'-amino-N-(5-ciklopropil-2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin-6-il)-[2,3'-bipiridin]-6-karboksamida

[0058] Pod istim reakcionim uslovima kao što je opisano u koraku 8 primera 1, terc-butil (6-((5-ciklopropil-2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin-6-il)karbamoil)-[2,3'-bipiridin]-6'-il)karbamat (50mg, 0.089 mmol) je deprotektovan pomoću metanolne HCl (5 mL) da bi se dobio sirovi proizvod. Ovo je zatim prečišćeno preparativnom HPLC da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (40 mg, 90%).<1>HNMR (DMSO-d6, 400MHz): δ 10.78 (s, 1H), 9.059-9.055 (d, 1H), 8.93-8.90 (dd, 1H), 8.40-8.25 (bs, 2H), 8.21-8.20 (d, 1H), 8.15-8.11 (t, 1H), 8.07-8.05 (d, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.12-7.09 (d, 1H), 3.71-3.60 (m, 8H), 2.20-2.16 (m, 1H), 0.91-0.87 (m, 4H).

[0059] LCMS: 96.48%, m/z = 458.2 (M+1)<+>. HPLC: 98.7%.

Primer 38 (referentni)

(S)-N-(5-(3-aminopirolidin-1-il)-2-morfolinooksazolo [4,5-b ]piridin-6-il)-2-(2 -metilpiridin-4-il)oksazol-4-karboksamid

[0060]

Korak 1: Priprema terc-butil (S)-(1-(2-morfolino-6-nitrooksazolo[4,5-b]piridin-5-il)pirolidin-3-il)karbamata

[0061] U balon sa okruglim dnom sipan je 5-hloro-2-morfolino-6-nitrooksazolo[4,5-b]piridin (proizvod iz koraka 5 primera 2) (157 mg, 0.555 mmol), terc-butil (S)-pirolidin -3-ilkarbamat (125 mg, 0.555 mmol) kalijum karbonat (238 mg, 1.722 mmol) i DMF (5 mL) i mešan na RT preko noći. Dodata je ledena voda i čvrsta supstanca je filtrirana i osušena pod vakuumom da bi se dobio sirovi proizvod koji je kao takav korišćen za sledeći korak.

LCMS: m/z = 435.2 (M+1)<+>. HPLC: 80.36%.

Korak 2: Priprema terc-butil (S)-(1-(6-amino-2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin-5-il)pirolidin-3-il)karbamata

[0062] Sirovi terc-butil (S)-(1-(2-morfolino-6-nitrooksazolo[4,5-b]piridin-5-il)pirolidin-3-il)karbamat koji je gore dobijen je rastvoren u metanolu (30 mL) i dodato je 10% Pd/C (25 mg) i mešano pod balonom vodonika dva sata. Reakciona masa je filtrirana kroz Celite<®>i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (71 mg, 32%).

LCMS: m/z = 405.2 (M+1)<+>. HPLC:79.86%.

Korak 3: Priprema terc-butil (S)-(1-(6-(2-(2-metilpiridin-4-il)oksazol-4-karboksamido)-2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin-5-il)pirolidin-3-il)karbamata

[0063] Pod istim reakcionim uslovima kao što je opisano u koraku 6 primera 1, terc-butil (S)-(1-(6-amino-2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin-5-il)pirolidin-3-il)karbamat (70 mg, 0.341 mmol), kuplovan je sa 2-(2-metilpiridin-4-il)oksazol-4-karboksilnom kiselinom (115 mg, 0.284 mmol) korišćenjem EDCI.HCl (98 mg, 0.512 mmol), HOBt (46 mg, 0.341 mmol), DIPEA (0.148 mg, 1.1384 mmol) u DMF (4 mL) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (152 mg, 91%).

LCMS: m/z = 591.6 (M+1)<+>. HPLC: 86.43%.

Korak 4: Priprema (S)-N-(5-(3-aminopirolidin-1-il)-2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin-6-il)-2-(2-metilpiridin-4-il)oksazol-4-karboksamid hidrohlorida

[0064] Pod istim reakcionim uslovima kao što je opisano u koraku 8 primera 1, terc-butil (S)-(1-(6-(2-(2-metilpiridin-4-il)oksazol-4-karboksamido)-2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin-5-il)pirolidin-3-il)karbamat (150 mg, 0.2542 mmol) je deprotektovan korišćenjem metanolne HCl (5 mL) da bi se dobio sirovi proizvod. Ovo je zatim prečišćeno preparativnom HPLC da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (58 mg, 97%).

<1>HNMR (CD3OD, 400MHz): δ 8.97 (s, 1H), 8.93-8.91 (d, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.56-8.55 (d, 1H), 8.02 (s, 1H), 4.02-3.67 (m, 13H), 2.90 (s, 3H), 2.50-2.40 (m, 1H), 2.25-2.05 (m, 1H).

LCMS: 96.74%, m/z = 491.4 (M+1)<+>. HPLC: 95.27%.

Primer 39

(S)-N-(5-(3-hidroksipirolidin-1-il)-2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin-6-il)-2-(2-metilpiridin-4-il)oksazol-4-karboksamid

[0065]

Korak 1: Priprema (S)-1-(2-morfolino-6-nitrooksazolo[4,5-b]piridin-5-il)pirolidin-3-ola

[0066] Pod istim reakcionim uslovima kao što je opisano u koraku 1 primera 38, 5-hloro-2-morfolino-6-nitrooksazolo[4,5-b]piridin (proizvod iz koraka 5 primera 2) (200 mg, 0.704 mmol) je supstituisan sa (S)-pirolidin-3-olom (61 mg, 0.704 mmol) korišćenjem kalijum karbonata (291 mg, 2.112 mmol) i DMF (5 mL) da bi se dobio proizvod iz naslova (195 mg, 82%) LCMS: m/z = 335.9 (M+1)<+>.

Korak 2: Priprema (S)-1-(6-amino-2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin-5-il)pirolidin-3-ola

[0067] Pod istim reakcionim uslovima kao što je opisano u koraku 2 primera 38, (S)-1-(2-morfolino-6-nitrooksazolo[4,5-b]piridin-5-il)pirolidin-3-ol (194 mg, 0.579 mmol) je redukovan korišćenjem 10% Pd/C (50 mg) u metanolu (40 mL) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (162 mg, 92%). LCMS: m/z = 306.1 (M+1)<+>.

Korak 3: Priprema (S)-N-(5-(3-hidroksipirolidin-1-il)-2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin-6-il)-2-(2-metilpiridin-4-il)oksazol-4-karboksamida

[0068] Pod istim reakcionim uslovima kao što je opisano u koraku 6 primera 1, (S)-1-(6-amino-2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin-5-il)pirolidin-3-ol (160 mg, 0.526 mmol) je kuplovan sa 2-(2-metilpiridin-4-il)oksazol-4-karboksilnom kiselinom (108 mg, 0.526 mmol) korišćenjem EDCI.HCl (151 mg, 0.789 mmol), HOBt (75 mg, 0.5523 mmol), DIPEA (0.272 mg, 2.104 mmol) u DMF (5 mL) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (45 mg, 17%).

<1>HNMR (CD3OD, 400MHz): δ 8.70 (s, 1H), 8.64-8.63 (d, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.94-7.93 (d, 1H), 7.87 (s, 1H), 4.49-4.45 (m, 1H), 3.84-3.71 (m, 10H), 3.70-3.47 (m, 2H), 2.67 (s, 3H), 2.13-2.10 (m, 1H), 2.00-1.80 (m, 1H). LCMS: 100%, m/z = 492.2 (M+1)<+>. HPLC: 97.90%.

Primer 41

(R)-N-(5-(3-hidroksipirolidin-1-il)-2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin-6-il)-2-(2-metilpiridin-4-il)oksazol-4-karboksamid

[0069]

Korak 1: Priprema (R)-1-(2-morfolino-6-nitrooksazolo[4,5-b]piridin-5-il)pirolidin-3-ola

[0070] Pod istim reakcionim uslovima kao što je opisano u koraku 1 primera 38, 5-hloro-2-morfolino-6-nitrooksazolo[4,5-b]piridin (proizvod iz koraka 5 primera 2) (200 mg, 0.704 mmol) je supstituisan sa (R)-pirolidin-3-olom (61 mg, 0.704 mmol) korišćenjem kalijum karbonata (291 mg, 2.112 mmol) i DMF (5 mL) da se dobije naslovni proizvod (231 mg, 98.7%). LCMS: m/z = 336.1 (M+1)<+>.

Korak 2: Priprema (R)-5-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)pirolidin-1-il)-2-morfolino-6-nitrooksazolo [4,5-b] piridina

[0071] U rastvor (R)-1-(2-morfolino-6-nitrooksazolo[4,5-b]piridin-5-il)pirolidin-3-ola (230 mg, 0.698 mmol) u DMF (5 mL) dodat je TBDMS hlorid (124 mg, 0.822 mmol) i imidazol (116 mg, 1.70 mmol) i smeša je mešana na RT preko noći. Reakciona masa je ugašena vodom i ekstrahovana etil acetatom da bi se dobio sirovi proizvod. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela 60-120 korišćenjem 1% metanola u DCM kao eluenta da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (310 mg, 99%). LCMS: m/z = 450.3 (M+1)<+>.

Korak 3: Priprema (R)-5-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)pirolidin-1-il)-2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin-6-amina

[0072] Pod istim reakcionim uslovima kao što je opisano u koraku 2 primera 38, (R)-5-(3-((tertbutildimetilsilil)oksi)pirolidin-1-il)-2-morfolino-6-nitrooksazolo[4,5-b]piridin (308 mg, 0.685 mmol) je redukovan korišćenjem 10% Pd/C (30 mg) u metanolu (20 mL) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (235 mg, 81%).LCMS: m/z = 420.2 (M+1)<+>.

Korak 4: Priprema (R)-N-(5-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)pirolidin-1-il)-2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin-6-il)-2-(2-metilpiridin-4-il)oksazol-4-karboksamida

[0073] Pod istim reakcionim uslovima kao što je opisano u koraku 6 primera 1, (R)-5-(3-((tercbutildimetilsilil)oksi)pirolidin-1-il)-2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin-6-amin (234 mg, 0.5587 mmol) je kuplovan sa 2-(2-metilpiridin-4-il)oksazol-4-karboksilnom kiselinom (114 mg, 0.5584 mmol) korišćenjem EDCI.HCl (180 mg, 0.840 mmol), HOBt (81 mg, 0.5863 mmol), DIPEA (0.290 mg, 2.237 mmol) u DMF (5 mL) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (167 mg, 50%).

LCMS: m/z = 606.2 (M+1)<+>.

Korak 5: Priprema (R)-N-(5-(3-hidroksipirolidin-1-il)-2-morfolinooksazolo[4,5-b]piridin-6-il)-2-(2-metilpiridin-4- il)oksazol-4-karboksamid

[0074] Pod istim reakcionim uslovima kao što je opisano u koraku 8 primera 1, (R)-N-(5-(3-((tercbutildimetilsilil)oksi)pirolidin-1-il)-2-morfolinooksazolo[4,5-b ]piridin-6-il)-2-(2-metilpiridin-4-il)oksazol-4-karboksamid (167 mg, 0.276 mmol) je deprotektovan korišćenjem metanolne HCl (5 mL) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (106 mg, 78%).

<1>HNMR (DMSO-d6, 300MHz): δ 9.82 (s, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.68-8.67 (d, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.80-7.77 (d, 1H), 7.66 (s, 1H), 4.86 (s, 1H), 4.27 (s, 1H), 3.72-3.6.0 (m, 11H), 3.25-3.21 (m, 1H), 2.58 (s, 3H), 1.89-1.78 (m, 2H). LCMS: 98.95%, m/z = 492.2 (M+1)<+>. HPLC: 95.08%.

Biohemijski test za IRAK-4

[0075] Ispitan je potencijal jedinjenja da inhibiraju enzim IRAK-4 u testu TR-FRET korišćenjem rekombinantne IRAK-4 kinaze kompanije Millipore, SAD. Pufer za ispitivanje je bio 50 mM Tris-HCl pH 7.5, 20 mM MgCl2, 1 mM EGTA, 2 mM DTT, 3 mM MnCl2i 0.01% Tween 20. Za test je korišćeno 5 ng IRAK-4 kinaze. Posle preinkubacije enzima sa ispitivanim jedinjenjem tokom 30 minuta na sobnoj temperaturi, dodata je mešavina supstrata koja sadrži 100 nM biotin histona H3 (Millipore, SAD) i 20 μM ATP (Sigma, SAD) i reakcija je inkubirana 30 minuta. Posle inkubacije, reakcija je zaustavljena dodavanjem smeše za zaustavljanje reakcije koja sadrži 40 mM EDTA, 1 nM europijum-anti-fosfo-histon H3 (Ser10) antitela (Perkin Elmer, SAD) i 20 nM Sure Light alofikocijanin-streptavidina (Perkin Elmer, SAD). Emisija fluorescencije na 615 nm i 665 nm je merena pri ekscitaciji od 340 nm, a procenat inhibicije je procenjen na osnovu odnosa intenziteta fluorescencije [(F665/F615)*10000]. Jedinjenja su inicijalno testirana na koncentracijama od 1 µM i 10 µM i potentna jedinjenja (>50% inhibicije na 1 µM) su uzeta za studije odgovora na dozu. Vrednosti IC50su procenjene prilagođavanjem podataka o doziodgovoru sigmoidalnom odnosu doza-odgovor (promenljivi nagib), pomoću programa za prilagođavanje krive koji koristi softver Graphpad Prism verzija 6.01.

[0076] Jedinjenja ovog pronalaska su ispitana u gore pomenutom testu i rezultati (IC50) su sumirani u tabeli 1. Vrednosti IC50za jedinjenja iz primera su navedene u nastavku gde se „A“ odnosi na IC50vrednost manju ili jednaku 50 nM, „B“ se odnosi na IC50vrednost u opsegu od 50.01 nM do 100 nM, a „C“ se odnosi na vrednost IC50veću od 100 nM.

Tabela 1: Vrednosti IC50 za aktivnost IRAK4 odabranih jedinjenja.

Claims

Patentni zahtevi 1. Jedinjenje odabrano od
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu je čistoća jedinjenja najmanje 95%, određeno tečnom hromatografijom visokih performansi (HPLC). 2 Jedinjenje prema zahtevu 1, gde je jedinjenje
3. Jedinjenje prema zahtevu 1, gde je jedinjenje
4. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1-3 za upotrebu kao lek.
5. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1-3 za upotrebu u lečenju kancera, inflamatornog poremećaja, autoimune bolesti, metaboličkog poremećaja, naslednog poremećaja, bolesti povezane sa hormonima, poremećaja imunodeficijencije, stanja povezanog sa smrću ćelija, destruktivnog koštanog poremećaja, trombinom-indukovane agregacije trombocita, bolesti jetre i kardiovaskularnog poremećaja.
6. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1-3 za upotrebu u lečenju inflamatornog poremećaja.
7. Jedinjenje za upotrebu prema zahtevu 6, gde je inflamatorni poremećaj izabran od alergije oka, konjunktivitisa, suvog keratokonjunktivitisa, prolećnog konjunktivitisa, alergijskog rinitisa, autoimunih hematoloških poremećaja, hemolitičke anemije, aplastične anemije, čiste aplazije crvenih krvnih zrnaca, idiopatske trombocitopenije, sistemskog eritemskog lupusa, reumatoidnog artritisa, polihondritisa, skleroderme, Wegenerove granulamatoze, dermatomiozitisa, hroničnog aktivnog hepatitisa, mijastenije gravis, Steven-Johnsonovog sindroma, idiopatskog sprua, autoimune inflamatorne bolesti creva, ulceroznog kolitisa, Kronove bolesti, sindroma iritabilnog kolona, celijakije, parodontopatije, oboljenja hijalinske membrane, bolesti bubrega, glomerularne bolesti, alkoholne bolesti jetre, multiple skleroze, endokrine ofalmopatije, Gravesove bolesti, sarkoidoze, alveolitisa, hroničnog hipersenzitivnog pneumonitisa, primarne bilijarne ciroze, uveitisa, anteriornog uveitisa, posteriornog uveitisa, Sjogrenovog sindroma, intersticijalne fibroze pluća, psorijatičnog artritisa, sistemskog juvenilnog idiopatskog artritisa, nefritisa, vaskulitisa, divertikulitisa, intersticijalnog cistitisa, glomerulonefritisa, idiopatskog nefrotičkog sindroma, nefropatije sa minimalnim promenama, hronične granulomatozne bolesti, endometrioze, leptospirozne bolesti bubrega, glaukoma, oboljenja mrežnjače, glavobolje, bola, sindroma kompleksnog regionalnog bola, hipertrofije srca, gubitka mišićne mase, kataboličkih poremećaja, gojaznosti, zastoja u rastu fetusa, hiperholesterolemije, srčanog oboljenja, hronične srčane insuficijencije, mezotelioma, anhidrotične ekodermalne displazije, Behčetove bolesti, inkontinencije pigmenti, Pagetove bolesti, pankreatitisa, sindroma nasledne periodične groznice, astme, akutne povrede pluća, akutnog respiratornog distres sindroma, eozinofilije, preosetljivosti, anafilakse, fibrozitisa, gastritisa, gastroenteritisa, nazalnog sinuzitisa, alergije oka, bolesti izazvanih silicijum dioksidom, hronične opstruktivne bolesti pluća (COPD), cistične fibroze, oštećenja pluća izazvanog kiselinom, plućne hipertenzije, polineuropatije, katarakte, upale mišića povezane sa sistemskom sklerozom, miozitisa sa inkluzionim telima, miastenije gravis, tiroiditisa, Adisonove bolesti, lihen planusa, apendicitisa, atopijskog dermatitisa, astme, alergije, blefaritisa, bronhiolitisa, bronhitisa, burzitisa, cervicitisa, holangitisa, holecistitisa, hroničnog odbacivanja transplantata, kolitisa, konjunktivitisa, cistitisa, dakrioadenitisa, dermatitisa, juvenilnog reumatoidnog artritisa, dermatomiozitisa, encefalitisa, endokarditisa, endometritisa, enteritisa, enterokolitisa, epikondilitisa, epididimitisa, fasciitisa, purpure Henoch-Schonlein, hepatitisa, supurativnog hidradenitisa, imunoglobulin A nefropatije, intersticijalne bolesti pluća, laringitisa, mastitisa, meningitisa, mijelitisa, miokarditisa, miozitisa, nefritisa, ooforitisa, orhitisa, osteitisa, otitisa, pankreatitisa, parotitisa, perikarditisa, peritonitisa, faringitisa, pleuritisa, flebitisa, pneumonitisa, pneumonije, polimiozitisa, proktitisa, prostatitisa, pijelonefritisa, rinitisa, salpingitisa, sinuzitisa, stomatitisa, sinovitisa, tendonitisa, tonzilitisa, ulceroznog kolitisa, vaskulitisa, vulvitisa, alopecije areate, multiformnog eritema, herpetiformnog dermatitisa, skleroderme, vitiliga, hipersenzitivnog angiitisa, urtikarije, buloznog pemfigoida, pemfigusa vulgaris, pemfigusa foliaceus, paraneoplastičnog pemfigusa, stečene bulozne epidermolize, akutnog i hroničnog gihta, hroničnog gihtnog artritisa, psorijaze, psorijatičnog artritisa, reumatoidnog artritisa, periodičnog sindroma povezanog sa kriopirinom (CAPS) i osteoartritisa.
8. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1-3 za upotrebu u lečenju kancera.
9. Jedinjenje za upotrebu prema zahtevu 8, gde je kancer izabran iz grupe koja se sastoji od solidnog tumora, benignog ili malignog tumora, karcinoma mozga, bubrega, jetre, želuca, vagine, jajnika, tumora želuca, dojke, mokraćne bešike, debelog creva, prostate, pankreasa, pluća, grlića materice, testisa, kože, kosti ili štitne žlezde; sarkoma, glioblastoma, neuroblastoma, multiplog mijeloma, gastrointestinalnog kancera, tumora vrata i glave, epidermalne hiperproliferacije, psorijaze, hiperplazije prostate, neoplazije, adenoma, adenokarcinoma, keratoakantoma, epidermoidnog karcinoma, krupnoćelijskog karcinoma, nesitnoćelijskog karcinoma pluća, Hočkinovog i ne-Hočkinovog limfoma, karcinoma mlečne žlezde, folikularnog karcinoma, papilarnog karcinoma, seminoma, melanoma; hematoloških maligniteta odabranih od leukemije, difuznog krupnoćelijskog B limfoma (DLBCL), aktiviranog DLBCL sličnog B-ćelijama, hronične limfocitne leukemije (CLL), hroničnog limfocitnog limfoma, primarnog limfoma sa izlivom, Burkitovog limfoma/leukemije, akutne limfocitne leukemije, B-ćelijske prolimfocitne leukemije, limfoplazmacitnog limfoma, Waldenstromove makroglobulinemije (WM), limfoma marginalne zone slezine, intravaskularnog krupnoćelijskog B limfoma, plazmacitoma i multiplog mijeloma.
10. Jedinjenje za upotrebu prema zahtevu 8 ili 9, gde je kancer leukemija, difuzni krupnoćelijski B limfom (DLBCL), aktivirani DLBCL sličan B-ćelijama, hronična limfocitna leukemija (CLL), hronični limfocitni limfom, primarni limfom sa izlivom, Burkitov limfom/leukemija, akutna limfocitna leukemija, B-ćelijska prolimfocitna leukemija, limfoplazmacitni limfom, Waldenstromova makroglobulinemija (WM), limfom marginalne zone slezine, intravaskularni krupnoćelijski B limfom, plazmacitom i multipli mijelom.
11. Jedinjenje za upotrebu prema bilo kom od zahteva 8 do 10, gde je kancer difuzni krupnoćelijski B limfom (DLBCL).
12. Jedinjenje za upotrebu prema bilo kom od zahteva 8 ili 10, gde je kancer aktivirani DLBCL sličan B-ćelijama.
13. Jedinjenje za upotrebu prema bilo kom od zahteva 8 do 10, gde je kancer hronična limfocitna leukemija (CLL).
14. Jedinjenje za upotrebu prema bilo kom od zahteva 8 do 10, gde je kancer hronični limfocitni limfom.
15. Jedinjenje za upotrebu prema bilo kom od zahteva 8 do 10, gde je kancer Waldenstromova makroglobulinemija (WM).
16. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1-3 za upotrebu u lečenju autoimune bolesti. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5