JP2585079B2

JP2585079B2 - 新規ジペプチド化合物

Info

Publication number: JP2585079B2
Application number: JP63260239A
Authority: JP
Inventors: 任山本; 和治家永; 邦彦東浦; 正晴黒橋
Original assignee: Nippon Zoki Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Nippon Zoki Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1987-10-16
Filing date: 1988-10-14
Publication date: 1997-02-26
Anticipated expiration: 2012-02-26
Also published as: JPH02254A

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野）本発明は植物生長調整作用を有する新規ジペプチド化
合物に関する。

（従来の技術）近年、食料問題の深刻化が予想されており、農産物の
生産量の確保、さらには増産に向けての努力が必要とさ
れ、多くの研究が行われている。本発明者らは、異常気
象等による農産物の減産を最小限に留めることも重要で
あると考え、例えば、低温環境にさらされた農作物に対
し、その生長力の正常化作用を有する化合物を探索して
きた。その結果、本発明者らは本発明ジペプチド化合物
に植物生長調整作用のあることを見出し、本発明を完成
した。

（発明が解決しようとする問題点）本発明の目的は、植物生長調整作用を有する新規ジペ
プチド化合物及び該化合物を有効成分として含有する農
園芸用剤を提供することにある。

（問題点を解決するための手段）本発明ジペプチドは、下記一般式（Ｉ）で表される新
規化合物である。

〔式中、Ｒは水素又はアミノ基の保護基、Ｙは水素又は
保護基を有してもよい水酸基、Ｘは１以上の保護基を有
してもよい酸性アミノ酸残基を表す。〕本発明においては、ペプチド及びアミノ酸は国際純正
応用化学連合（IUPAC）−国際生化学連合（IUB）採用の
略号及び当該分野で繁用されている略号で表され、例え
ば下記の略号が使用される。

GABA:γ−アミノ酪酸 GABOB:β−ヒドロキシ−γ−アミノ酪酸 Glu:グルタミン酸 Asp:アスパラギン酸前記一般式（Ｉ）中、ＸはGlu、Ｄ−Glu、Asp、Ｄ−A
sp等の酸性アミノ酸残基を表し、該アミノ酸残基は１以
上の保護基を有してもよい。例えば好ましい化合物とし
て、GABA−Glu、GABA−Ｄ−Glu、GABA−Asp、GABA−Ｄ
−Asp、GABOB−Glu、GABOB−Ｄ−Glu、GABOB−Asp、GAB
OB−Ｄ−Asp等が挙げられる。

本発明ジペプチド化合物は、ペプチド化学における通
常の方法によって製造することができる。即ち、本発明
ジペプチド化合物の合成は、液相法でも固相法でも可能
である。

ペプチド結合を形成させるための縮合法としては、ア
ジド法、活性エステル法、混合酸無水物法、酸クロリド
法、酵素的縮合法、N,N′−ジシクロヘキシルカルボジ
イミド（DCC）、水溶性カルボジイミド、N,N′−カルボ
ニルジイミダゾール等の縮合剤を用いる方法、或いはDC
Cと共にＮ−ヒドロキシスクシンイミド、Ｎ−ヒドロキ
シ−５−ノルボルネン−2,3−ジカルボキシイミド、１
−ヒドロキシベンゾトリアゾール等の添加剤を使用する
DCC−添加剤法など通常のペプチド縮合法を利用するこ
とができる。

縮合反応に際して原料となるアミノ酸は、通常用いら
れる保護基を有しているものを用いることができ、反応
に関与しないアミノ基及び側鎖官能基を公知の方法で保
護したり、また反応に関与するカルボキシル基、アミノ
基を活性化させてもよい。

反応に関与しないアミノ基の保護基としては、通常の
ペプチド合成で用いられる保護基が利用でき、即ち、ｔ
−ブトキシカルボニル、ｔ−ペントキシカルボニル等の
低級アルコキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニ
ル等のアラルキルオキシカルボニル基又はｏ−クロロベ
ンジルオキシカルボニル、ｐ−ニトロベンジルオキシカ
ルボニル、ｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル等の
置換基を有するアラルキルオキシカルボニル基などが挙
げられる。

グルタミン酸、アスパラギン酸などの酸性アミノ酸残
基のカルボキシル基の保護基としては、通常のペプチド
合成で用いられるカルボキシル基の保護基、即ち、ベン
ジルオキシ等のアラルキルオキシ基、ｐ−メトキシベン
ジルオキシ等の置換基を有するアラルキルオキシ基、ｔ
−ブトキシ、ｔ−ペントキシ等の低級アルコキシ基、シ
クロペンチルオキシ、シクロヘキシルオキシ等のシクロ
アルキルオキシ基若しくは４−ピリジロキシ基などが利
用できる。

また、β−ヒドロキシ−γ−アミノ酪酸の水酸基の保
護基としては、通常のペプチド合成で用いられる水酸基
の保護基が利用でき、即ち、ベンジル等のアラルキル
基、ブロモベンジル、クロロベンジル等の置換基を有す
るアラルキル基、ｔ−ブチル等の低級アルキル基などが
挙げられる。

これらの置換基は、接触還元、酸分解等の通常の手段
により除去することができる。

縮合反応及び脱保護基反応における反応温度、時間、
溶媒等は、通常のペプチド合成で用いられる反応条件に
従って設定することができる。

本発明ジペプチド化合物はその薬学的に許容される塩
を包含し、例えば無機塩としてナトリウム、カリウム等
のアルカリ金属、カルシウム、バリウム等のアルカリ土
類金属、その他のアルミニウム等の金属との塩、或いは
アンモニウム等との有機アミンとの塩などが挙げられ
る。

又、本発明化合物はその金属錯化合物を包含し、例え
ば亜鉛、ニッケル、コバルト、銅、鉄等との錯化合物が
挙げられる。

これらの塩並びに金属錯化合物は公知の方法により遊
離の本発明ジペプチドより製造でき、或いは相互に変換
することができる。

本発明におけるアミノ酸残基はＤ−体、Ｌ−体、DL−
体の何れであってもよい。

得られた本発明化合物は、クロマトグラフィー、再結
晶等の通常の手段により精製し、元素分析、融点、NM
R、IR、UV、マススペクトル等により同定を行った。
尚、比旋光度はナトリウムのＤ線を用いて測定した。

以下に、本発明製造方法の一例を実施例により説明す
る。

尚、以下の実施例においては、置換基及び試薬等の略
号として次のものを用いる。

Z:ベンジルオキシカルボニル OBzl:ベンジルオキシ TosOH:トルエンスルホン酸 EDC.HCl:1−エチル−３−（３′−ジメチルアミノプロ
ピル）−カルボジイミド塩酸塩（実施例）実施例1. （１）5.36gのトリエチルアミン、11.9gのＺ−GABA−OH
及び26.5gのTosOH・Glu（OBzl）−OBzlを塩化メチレン2
50mlに溶かし、氷冷下にて53mmolのEDC.HClを加え、０
℃で２時間、室温で20時間かき混ぜた。溶媒を減圧下に
溜去した後、残渣を酢酸エチル−水に溶かし、有機層を
分離した。水層を酢酸エチルで抽出した後、有機層を合
わせて、10％クエン酸水溶液、水、５％炭酸水素ナトリ
ウム水溶液、飽和食塩水で順次洗浄した。無水硫酸ナト
リウム上で乾燥した後、溶媒を減圧下に溜去して、白色
結晶を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィ
ー（酢酸エチル／クロロホルム＝1/1で溶出）で精製し
て、17.4gのＺ−GABA−Glu（OBzl）−OBzlを得た。

収率:64％融点:94−95℃ 〔α〕²⁰:＋1.0（cl,CHCl₃）同様にして以下の化合物を得た。

Ｚ−GABA−Ｄ−Glu（OBzl）−OBzl 収率:69％融点:92−93℃ 〔α〕²⁰:−1.1（cl,CHCl₃）Ｚ−GABA−Asp（OBzl）−OBzl 収率:70％融点:105−106℃ 〔α〕²⁰:＋15.4（cl,CHCl₃）Ｚ−GABA−Ｄ−Asp（OBzl）−OBzl 収率:70％融点:104−106℃ 〔α〕²⁰:−15.9（cl,CHCl₃）Ｚ−DL−GABOB−Glu（OBzl）−OBzl 白色粉末状結晶（２）17.4gのＺ−GABA−Glu（OBzl）−OBzlをメタノー
ル200ml、アセトン50ml及び水10mlの混合溶媒に溶か
し、10％パラジウム−炭素触媒の存在下、常温で常圧水
素雰囲気下にて接触還元を行った。20時間後、原料の消
失を薄層クロマトグラフィーで確認した後、触媒を濾去
した。濾液を減圧下に溜去した後、残渣油状物に水とト
ルエンを加え、酢酸を減圧下に共沸除去した。残渣油状
物をエタノールから結晶化した後、水−エタノールより
再結晶して、白色粉末状の6.6gのGABA−Glu（化合物
１）を得た。

収率:89％融点:178−180℃ 〔ｄ〕²⁰:−4.9（cl,H₂O）元素分析:C₉H₁₆N₂O₅・0.2H₂OとしてＣ％Ｈ％Ｎ％計算値： 45.84 7.01 11.88 実測値： 46.02 7.30 11.75 NMR（0.1ND₂O,内部標準ｔ−BuOD δ＝1.23）： 1.91−2.02（3H,m）,2.13−2.22（1H,m）,2.42（2H,t,J
＝7.5Hz）,2.46（2H,t,J＝7Hz）,3.02（2H,t,J＝7.5H
z）,4.32（1H,dd,J＝5,9Hz）同様にして以下の化合物を得た。

GABA−Ｄ−Glu（化合物２）収率:86％融点:175−176℃ 〔ｄ〕²⁰:＋5.0（cl,H₂O）元素分析:C₉H₁₆N₂O₅・0.2H₂OとしてＣ％Ｈ％Ｎ％計算値： 45.84 7.01 11.88 実測値： 45.84 7.11 11.70 NMR（0.1ND₂O,内部標準ｔ−BuOD δ＝1.23）： 1.92−2.04（3H,m）,2.15−2.24（1H,m）,2.43（2H,t,J
＝7.5Hz）,2.48（2H,t,J＝7Hz）,3.02（2H,t,J＝7.5H
z）,4.37（1H,dd,J＝5,9Hz） GABA−Asp（化合物３）収率:92％融点:184−185℃ 〔ｄ〕²⁰:＋11.7（cl,H₂O）元素分析:C₈H₁₄N₂O₅としてＣ％Ｈ％Ｎ％計算値： 44.03 6.47 12.84 実測値： 44.13 6.79 12.50 NMR（0.1ND₂O,内部標準ｔ−BuOD δ＝1.23）： 1.95（2H,tt,J＝7.5,7.5Hz）,2.43（2H,t,J＝7.5Hz）,
2.93（1H,dd,J＝7,17Hz）,2.98（1H,dd,J＝5,17Hz）,3.
01（2H,t,J＝7.5Hz）,4.77（1H,dd,J＝5,7Hz） GABA−Ｄ−Asp（化合物４）収率:89％融点:180−182℃ 〔ｄ〕²⁰:−11.0（cl,H₂O）元素分析:C₈H₁₄N₂O₅としてＣ％Ｈ％Ｎ％計算値： 44.03 6.47 12.84 実測値： 43.98 6.67 12.62 NMR（0.1ND₂O,内部標準ｔ−BuOD δ＝1.23）： 1.95（2H,tt,J＝7.5,7.5Hz）,2.42（2H,t,J＝7.5Hz）,
2.87（1H,dd,J＝7,17Hz）,2.94（1H,dd,J＝5,17Hz）,3.
10（2H,t,J＝7.5Hz）,4.69（1H,dd,J＝5,7Hz） DL−GABOB−Glu（化合物５）収率:62％ NMR（0.1ND₂O,内部標準ｔ−BuOD δ＝1.23）： 1.95−2.06（1H,m）,2.17−2.26（1H,m）,2.47−2.53
（2H,m）,2.54−2.58（2H,m）,2.96−3.03（1H,m）,3.1
6−3.22（1H,m）,4.23−4.31（1H,m）,4.40−4.46（1H,
m）（作用） 1.植物生長調整作用４℃で保存した稲（日本晴）を使用し、本発明化合物
の植物生長調整作用を調べた。

被検薬水溶液（１×10^-6M）で浸した濾紙をペトリ皿
中に入れて発芽床とし、供試種子を播種した。４日目に
発芽した種子を被検薬水溶液を含まない植物培養試験管
に移して生育試験を行った。移植後７日経過したものの
地上部及び地下部の長さと重量を測定した。一群30個体
とし、試験は20℃の暗所で行い、平均値と標準誤差を求
めた。

結果の一例を第１表及び第２表に示す。

（＊＊＊:p＜0.001、＊＊:p＜0.05、＊:p＜0.01）（効果）以上の結果より明らかなように、本発明化合物は優れ
た植物生長促進作用を有する。この植物生長促進作用
は、低温ストレス下（20℃、稲の最適生長温度は約30
℃）で生長が抑制された植物に対して特に顕著に作用
し、植物生長を正常化する特徴あるものである。

また、この植物生長正常化作用は、本発明化合物で種
子を発芽期間のみ処理することにより得られるため、非
常に簡便且つ経済的であり、本発明化合物は農園芸用薬
剤等として極めて有用である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者東浦邦彦兵庫県加東郡社町木梨字川北山442番１日本臓器製薬株式会社生物活性科学研究所内 (72)発明者黒橋正晴兵庫県加東郡社町木梨字川北山442番１日本臓器製薬株式会社生物活性科学研究所内 (56)参考文献特開昭49−127916（ＪＰ，Ａ)

Claims

(57)【特許請求の範囲】

【請求項１】一般式（Ｉ）：〔式中、Ｒは水素又はアミノ基の保護基、Ｙは水素又は
保護基を有してもよい水酸基、Ｘは１以上の保護基を有
してもよい酸性アミノ酸残基を表す。〕で表される化合物及びその薬学的に許容される塩。
【請求項２】一般式（Ｉ）：〔式中、Ｒは水素又はアミノ基の保護基、Ｙは水素又は
保護基を有してもよい水酸基、Ｘは１以上の保護基を有
してもよい酸性アミノ酸残基を表す。〕で表される化合物又はその薬学的に許容される塩の少な
くとも一種を有効成分として含有する植物生長調整剤。