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JP7635066B2 - How to measure oral health - Google Patents
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JP7635066B2 - How to measure oral health - Google Patents

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Description

本開示は、口腔衛生状態を測定する方法等に関する。 The present disclosure relates to a method for measuring oral hygiene status, etc.

う蝕や歯周病の予防において、口腔衛生状態をよい状態に維持することは重要である。口腔衛生状態を確認する方法としては、歯石や歯垢の付着状態、その結果として起こる歯肉出血を確認する方法などがあり、これらの方法は、現状、歯科医師等による口腔内診査を受診することが主流であり、簡便な口腔衛生状態の確認方法の開発が望まれている。 Maintaining good oral hygiene is important for preventing dental caries and periodontal disease. Methods for checking oral hygiene include checking the amount of tartar and plaque on the teeth and the resulting gingival bleeding. Currently, these methods are mainly performed by undergoing oral examinations by dentists, etc., and there is a need for a simpler method for checking oral hygiene.

また、健康診断における歯科健診の導入率が低いことからも、簡便な口腔衛生状態の確認方法の開発が課題とされている。 In addition, the adoption rate of dental examinations in health checkups is low, making the development of a simple method for checking oral hygiene status a challenge.

特許第6779776号公報Patent No. 6779776

本開示は、歯石や歯肉出血の有無などの口腔衛生状態を測定する方法を提供することを課題とする。また、歯科健診なしに、歯石や歯肉出血の有無などの口腔衛生状態を測定する方法を提供することも課題の1つである。 The objective of the present disclosure is to provide a method for measuring oral hygiene, such as the presence or absence of tartar or bleeding gums. Another objective is to provide a method for measuring oral hygiene, such as the presence or absence of tartar or bleeding gums, without a dental checkup.

本発明者らは、歯石の付着や歯肉出血がある場合には、ない場合と比較して、血液試料の酸化HDL量の反映値を、血液試料のHDL量の反映値で除した値が高いことを見出し、さらに改良を重ねた。 The inventors discovered that when there is dental calculus or gingival bleeding, the value reflecting the amount of oxidized HDL in a blood sample divided by the value reflecting the amount of HDL in the blood sample is higher than when there is no dental calculus or gingival bleeding, and have made further improvements.

本開示は、例えば以下の項に記載の主題を包含する。
項1.
血液試料の酸化HDL量の反映値を、血液試料のHDL量の反映値で除した値を指標として、当該血液試料を採取した対象の口腔衛生状態を測定する方法。
項2.
口腔衛生状態が、歯石付着状態、又は歯肉出血状態である、項1に記載の方法。
項3.
(A)血液試料の酸化HDL量の反映値を測定する工程、及び
(B)血液試料のHDL量の反映値を測定する工程、
を含む、項1又は2に記載の方法。
項4.
前記酸化HDL量の反映値の測定が、
(1)血液試料と、遷移金属化合物及び酸性緩衝液を含む溶液とを混合する工程を含む方法により行われる、
項3に記載の方法。
項5.
前記酸化HDL量の反映値の測定が、
さらに、
(2)前記工程(1)により産生されたフリーラジカルを測定する工程を含む方法により行われる、
項4に記載の方法。
項6.
前記HDL量の反映値の測定が、HDL直接法により行われる、項3に記載の方法。
項7.
前記酸化HDL量の反映値が、単位時間あたりの吸光度変化である、項1~6のいずれかに記載の方法。
項8.
前記HDL量の反映値が、濃度である、項1~7のいずれかに記載の方法。
The present disclosure includes, for example, the subject matter described in the following sections:
Item 1.
A method for measuring the oral hygiene state of a subject from whom a blood sample was taken, using as an index a value reflecting the amount of oxidized HDL in a blood sample divided by a value reflecting the amount of HDL in the blood sample.
Item 2.
Item 2. The method according to item 1, wherein the oral hygiene condition is a dental tartar buildup condition or a gingival bleeding condition.
Item 3.
(A) measuring a value reflective of the amount of oxidized HDL in a blood sample; and (B) measuring a value reflective of the amount of HDL in a blood sample.
3. The method according to claim 1 or 2, comprising:
Item 4.
The measurement of the reflection value of the amount of oxidized HDL
(1) The method is carried out by a method including a step of mixing a blood sample with a solution containing a transition metal compound and an acidic buffer solution,
Item 3. The method according to item 3.
Item 5.
The measurement of the reflection value of the amount of oxidized HDL
moreover,
(2) The method is carried out by a method including a step of measuring the free radicals produced in the step (1).
Item 5. The method according to item 4.
Item 6.
Item 4. The method according to Item 3, wherein the measurement of the reflection value of the HDL amount is carried out by a direct HDL method.
Item 7.
Item 7. The method according to any one of Items 1 to 6, wherein the reflection value of the amount of oxidized HDL is a change in absorbance per unit time.
Item 8.
Item 8. The method according to any one of Items 1 to 7, wherein the reflection value of the HDL amount is a concentration.

歯石や歯肉出血の有無などの口腔衛生状態を測定する方法が提供される。また、歯科健診なしに、歯石や歯肉出血の有無などの口腔衛生状態を測定する方法が提供される。 A method for measuring oral hygiene, such as the presence or absence of tartar or bleeding gums, is provided. Also provided is a method for measuring oral hygiene, such as the presence or absence of tartar or bleeding gums, without the need for a dental checkup.

歯の番号及び名称を示す図である。FIG. 1 is a diagram showing tooth numbers and names. CIありの群及びなし群における、各対象の血液試料の酸化HDL量の反映値を、血液試料のHDL量の反映値で除した値(oxHDL/HDL)をプロットした結果を示す。The graph shows plots of the value reflecting the amount of oxidized HDL in blood samples of each subject divided by the value reflecting the amount of HDL in the blood samples (oxHDL/HDL) in the groups with and without CI. BOPありの群及びなし群における、各対象の血液試料の酸化HDL量の反映値を、血液試料のHDL量の反映値で除した値(oxHDL/HDL)をプロットした結果を示す。The results are plotted as a value reflecting the amount of oxidized HDL in blood samples divided by a value reflecting the amount of HDL in blood samples (oxHDL/HDL) for each subject in the groups with and without BOP.

以下、本開示に包含される各実施形態について、さらに詳細に説明する。
本開示は、対象の口腔衛生状態を測定する方法を包含する。本明細書において、当該方法を、「本開示の測定方法」と表記することがある。
Each embodiment included in the present disclosure will be described in further detail below.
The present disclosure encompasses a method for measuring the oral hygiene status of a subject. In this specification, the method may be referred to as the "measurement method of the present disclosure."

本開示の測定方法は、対象から採取した血液試料の酸化HDL量の反映値を、血液試料のHDL量の反映値で除した値を指標とする。本開示の測定方法は、対象から採取した血液試料の酸化HDL量の反映値を測定することを含んでいてもよく、血液試料のHDL量の反映値を測定することを含んでいてもよい。 The measurement method of the present disclosure uses as an index a value reflecting the amount of oxidized HDL in a blood sample collected from a subject divided by a value reflecting the amount of HDL in the blood sample. The measurement method of the present disclosure may include measuring a value reflecting the amount of oxidized HDL in a blood sample collected from a subject, or may include measuring a value reflecting the amount of HDL in the blood sample.

対象としては、ヒトであってもよく、非ヒト哺乳動物であってもよい。
ヒトとしては、例えば、健常者であってもよく、歯周病に罹患したヒト(歯周病患者)であってもよく、歯周病の罹患が疑われるヒトであってもよい。また、対象としては、HbA1cが5.6%未満のヒト、空腹時血糖が110mg/dL未満のヒト、BMIが30未満のヒト、あるいはこれらの特徴を2種以上併せ持つヒトなどが挙げられる。
非ヒト哺乳動物としては特に限定されず、例えば、ペット、家畜、実験動物等として飼育される哺乳動物が例示される。例えば、イヌ、ネコ、サル、ウシ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、ウサギ、マウス、ラット、ラクダ、リャマ等が挙げられる。
The subject may be a human or a non-human mammal.
The human may be, for example, a healthy individual, a human suffering from periodontal disease (a periodontal disease patient), or a human suspected of suffering from periodontal disease. Examples of the subject include a human with HbA1c of less than 5.6%, a human with fasting blood glucose of less than 110 mg/dL, a human with a BMI of less than 30, or a human with two or more of these characteristics.
The non-human mammal is not particularly limited, and examples thereof include mammals kept as pets, livestock, laboratory animals, etc. Examples thereof include dogs, cats, monkeys, cows, horses, sheep, goats, pigs, rabbits, mice, rats, camels, llamas, etc.

血液試料としては、対象から採取された血液由来の試料であれば特に限定されず、例えば、全血であってもよいし、あるいは血液の分離物(例えば血清、血漿等)であってもよい。なお、対象から採取した血液試料を保存する方法、条件等については特に限定されず、常法に従って行うことができる。 The blood sample is not particularly limited as long as it is a sample derived from blood collected from a subject, and may be, for example, whole blood or a blood separation product (e.g., serum, plasma, etc.). The method and conditions for storing the blood sample collected from the subject are not particularly limited, and may be carried out according to standard methods.

対象から血液試料を採取する方法としては特に限定されず、常法に従って行えばよい。なお、血液試料として血清又は血漿を用いる場合には、取り扱い易さ、感染防止等の観点から、血清又は血漿分離剤を含む真空採血管などを用いることが好ましい。
また、採取した血液試料は、そのまま用いてもよく、凍結乾燥等して保存した後、当該凍結乾燥物を後述する適当な溶媒に溶解して用いてもよく、また、採取した血液試料を、そのまま冷凍保存した後、あるいは後述する適当な溶媒に溶解する等して冷凍保存した後、使用時に解凍して用いてもよい。
The method for collecting a blood sample from a subject is not particularly limited and may be performed according to a conventional method. When serum or plasma is used as a blood sample, it is preferable to use a vacuum blood collection tube containing a serum or plasma separator from the viewpoints of ease of handling, prevention of infection, etc.
In addition, the collected blood sample may be used as is, or may be freeze-dried or otherwise stored and then the freeze-dried product may be dissolved in a suitable solvent as described below and then used. In addition, the collected blood sample may be frozen and stored as is, or may be frozen and stored after being dissolved in a suitable solvent as described below, and then thawed when ready for use.

酸化HDL量の反映値としては、血液試料に含まれる酸化HDL量を反映する値をいい、例えば酸化HDLの重量(質量)、濃度等が挙げられる。また、例えば、血液試料に含まれる酸化HDL量を反映する測定値であってもよく、例えば吸光度、蛍光強度、等を用いることができる。当該測定値は、測定補助試薬を用いて測定された値であってもよい。当該測定補助試薬としては、例えば蛍光色素、酸化HDL特異的認識分子(例えば抗体若しくはその断片)、あるいはそれらの2以上組み合わせ等が挙げられる。 The value reflecting the amount of oxidized HDL refers to a value reflecting the amount of oxidized HDL contained in the blood sample, such as the weight (mass) or concentration of oxidized HDL. Alternatively, for example, a measured value reflecting the amount of oxidized HDL contained in the blood sample may be used, such as absorbance or fluorescence intensity. The measured value may be a value measured using a measurement auxiliary reagent. Examples of the measurement auxiliary reagent include a fluorescent dye, an oxidized HDL-specific recognition molecule (e.g., an antibody or a fragment thereof), or a combination of two or more of these.

血液試料の酸化HDL量の反映値を測定する方法としては、特に限定的ではなく、常法に従って行うことができる。例えば、ELISA法を使用して酸化HDL(マロンジアルデヒド修飾HDL)を測定する方法や、質量分析機により、HDLを構成する蛋白質のApo-A1のニトロ化やクロロ化を測定する方法、特許第6779776号公報(特許文献1)に記載の、(1)血液試料と、遷移金属化合物及び酸性緩衝液を含む溶液とを混合する工程を含む方法などが挙げられる。中でも、(1)血液試料と、遷移金属化合物及び酸性緩衝液を含む溶液とを混合する工程を含む方法により測定することが好ましい。本明細書において、当該工程を「工程(1)」と記載する場合がある。さらに、(2)前記工程(1)により産生されたフリーラジカルを測定する工程を含む方法により測定することが、より好ましい。本明細書において、当該工程を「工程(2)」と記載する場合がある。 The method for measuring the reflected value of the amount of oxidized HDL in a blood sample is not particularly limited, and can be performed according to a conventional method. For example, a method for measuring oxidized HDL (malondialdehyde-modified HDL) using an ELISA method, a method for measuring the nitration or chlorination of Apo-A1, a protein that constitutes HDL, using a mass spectrometer, and a method including (1) a step of mixing a blood sample with a solution containing a transition metal compound and an acidic buffer solution, as described in Japanese Patent Publication No. 6779776 (Patent Document 1), are included. Among these, it is preferable to perform the measurement by a method including (1) a step of mixing a blood sample with a solution containing a transition metal compound and an acidic buffer solution. In this specification, this step may be referred to as "step (1)". Furthermore, it is more preferable to perform the measurement by a method including (2) a step of measuring the free radicals produced by the step (1). In this specification, this step may be referred to as "step (2)".

血液試料の酸化HDL量の反映値を測定する方法としては、血液試料からHDLを分離する工程が含まれていてもよい。本明細書において、当該工程を「工程(0)」と記載する場合がある。工程(0)により分離されたHDLを工程(1)において血液試料として用いることができる。血液試料からHDLを分離する方法としては、特に限定的ではなく、常法に従って行うことができる。例えば、デキストラン硫酸とマグネシウムイオンを用いたデキストラン硫酸法などの方法が挙げられる。 The method for measuring a value reflecting the amount of oxidized HDL in a blood sample may include a step of separating HDL from the blood sample. In this specification, this step may be referred to as "step (0)". The HDL separated in step (0) may be used as the blood sample in step (1). The method for separating HDL from a blood sample is not particularly limited, and may be performed according to a conventional method. For example, a method such as the dextran sulfate method using dextran sulfate and magnesium ions may be used.

遷移金属化合物は、混合液中で電離して金属イオンになり得るものであり、かつヒドロキシペルオキシド(R-OOH)と反応してフリーラジカルを産生し得るものであれば特に限定的ではなく、例えば、銅(II)化合物、鉄(II)化合物、(2価の鉄化合物)、鉄(III)化合物(3価の鉄化合物)などが挙げられる。これらの中でも、鉄(II)化合物、鉄(III)化合物などの鉄化合物が好ましい。鉄化合物としては、例えば、硫酸アンモニウム鉄(II)六水和物、塩化鉄(III)六水和物などが挙げられる。工程(1)において遷移金属化合物を用いることにより、1)ヒドロキシペルオキシドと反応する遷移金属イオンが十分量存在することにより少量の血液サンプルで酸化HDLの測定が可能となる、2)血液に含まれる鉄分の量に影響されることなく酸化HDLの測定が可能となる、などの有利な効果が奏される。 The transition metal compound is not particularly limited as long as it can be ionized in the mixed solution to become a metal ion and can react with hydroxyperoxide (R-OOH) to produce a free radical, and examples thereof include copper (II) compounds, iron (II) compounds (divalent iron compounds), and iron (III) compounds (trivalent iron compounds). Among these, iron compounds such as iron (II) compounds and iron (III) compounds are preferred. Examples of iron compounds include ammonium iron (II) sulfate hexahydrate and iron (III) chloride hexahydrate. By using a transition metal compound in step (1), advantageous effects such as 1) the presence of a sufficient amount of transition metal ions that react with hydroxyperoxide makes it possible to measure oxidized HDL with a small amount of blood sample and 2) the measurement of oxidized HDL is possible without being affected by the amount of iron contained in the blood are achieved.

なお、酸化HDL量の反映値は、3価の鉄化合物にくらべ、2価の鉄化合物を含む溶液で大きくなる。換言すると、3価の鉄化合物よりも2価の鉄化合物を用いた測定法は、高い感度で酸化HDLを測定できる。従って、上記した鉄化合物の中でも、2価の鉄化合物が特に好ましい。 The reflected value of oxidized HDL is greater in a solution containing a divalent iron compound than in a solution containing a trivalent iron compound. In other words, a measurement method using a divalent iron compound can measure oxidized HDL with higher sensitivity than a trivalent iron compound. Therefore, among the iron compounds mentioned above, a divalent iron compound is particularly preferred.

混合液中における遷移金属化合物の濃度としては、特に限定的ではなく、例えば、0.1~150μM程度、好ましくは、1~100μMとすることができる。 The concentration of the transition metal compound in the mixed solution is not particularly limited, and can be, for example, about 0.1 to 150 μM, preferably 1 to 100 μM.

酸性緩衝液としては、pHが酸性であり、かつ緩衝作用を有するものであれば特に限定されず、公知の緩衝液を用いることができる。例えば、酢酸緩衝液などが挙げられる。 There are no particular limitations on the acidic buffer solution, so long as it has an acidic pH and a buffering effect, and any known buffer solution can be used. For example, an acetate buffer solution can be used.

酸性緩衝液のpHは、酸性であれば特に限定的ではなく、2~6.9程度であることが好ましく、3~6.5程度であることがより好ましく、4.5~6であることがさらに好ましい。なお、後述する工程(2)において、フリーラジカルを測定する方法として、発色法を採用する場合には、酸性緩衝液のpHは3~6.9程度であることが特に好ましい。 The pH of the acidic buffer solution is not particularly limited as long as it is acidic, and is preferably about 2 to 6.9, more preferably about 3 to 6.5, and even more preferably 4.5 to 6. In addition, when a color development method is used as a method for measuring free radicals in step (2) described below, it is particularly preferable that the pH of the acidic buffer solution is about 3 to 6.9.

酸性緩衝液の濃度としては、特に限定的ではなく、例えば、0.005~0.5M、好ましくは、0.01~0.2Mである。 The concentration of the acidic buffer is not particularly limited, but is, for example, 0.005 to 0.5 M, preferably 0.01 to 0.2 M.

工程(1)における反応温度としては、特に限定的ではなく、例えば、20~40℃程度とすることができる。 The reaction temperature in step (1) is not particularly limited and can be, for example, about 20 to 40°C.

上記の通り、工程(1)では、血液試料に含まれる酸化HDLにおけるヒドロペルオキシド(R-OOH)と遷移金属イオンとが反応することによってペルオキシラジカル(R-OO)やアルコキシラジカル(R-O)等のフリーラジカルが産生される。工程(1)において産生されたフリーラジカルを測定することにより、酸化HDLを測定することができる。 As described above, in step (1), hydroperoxides (R-OOH) in oxidized HDL contained in the blood sample react with transition metal ions to produce free radicals such as peroxy radicals (R-OO . ) and alkoxy radicals (R-O . ). By measuring the free radicals produced in step (1), oxidized HDL can be measured.

従って、酸化HDL量の反映値の測定方法としては、さらに(2)上記工程(1)により産生されたフリーラジカルを測定する工程を含むことが好ましい。 Therefore, it is preferable that the method for measuring the reflection value of the amount of oxidized HDL further includes (2) a step of measuring the free radicals produced in the above step (1).

フリーラジカルを測定する方法としては、特に限定的ではなく、公知の方法を採用することができる。例えば、発色法、化学発光法、電子スピン共鳴法(ESR法)などが挙げられる。 The method for measuring free radicals is not particularly limited, and any known method can be used. Examples include the color development method, the chemiluminescence method, and the electron spin resonance method (ESR method).

発色法は、フリーラジカルと反応して発色する作用を有する物質(発色性物質)を用い、発色した物質の吸光度を分光光度計などを用いて測定する方法である。 The color-developing method uses a substance that reacts with free radicals to produce color (a color-developing substance), and measures the absorbance of the colored substance using a spectrophotometer or similar device.

発色性物質としては、フリーラジカルやアルコキシラジカルと反応して呈色する作用を有する化合物であれば特に限定されず、公知の化合物を用いることができる。例えば、下記一般式(1)で表される化合物又はその塩などが挙げられる。 The color-forming substance is not particularly limited as long as it is a compound that reacts with a free radical or an alkoxy radical to produce a color, and any known compound can be used. For example, a compound represented by the following general formula (1) or a salt thereof can be used.

Figure 0007635066000001
Figure 0007635066000001

上記一般式(1)中、各Rは同一又は異なって、水素原子、ハロゲン原子、メチル、又はエチルを示す。特に、各Rの少なくとも2つがメチル又はエチルであることが好ましく、同一の窒素原子に置換するRが共にメチル又はエチルであることがより好ましい。 In the above general formula (1), each R may be the same or different and represents a hydrogen atom, a halogen atom, methyl, or ethyl. In particular, it is preferable that at least two of each R are methyl or ethyl, and it is more preferable that the Rs substituting the same nitrogen atom are both methyl or ethyl.

一般式(1)で表される化合物としては、N,N-ジメチル-p-フェニレンジアミン(DMPD)、N,N-ジエチル-p-フェニレンジアミン(DPD)が好ましい。 Preferred compounds represented by general formula (1) are N,N-dimethyl-p-phenylenediamine (DMPD) and N,N-diethyl-p-phenylenediamine (DPD).

一般式(1)で表される化合物の塩としては、例えば、硫酸塩、シュウ酸塩、二酢酸塩などが挙げられる。 Salts of the compound represented by general formula (1) include, for example, sulfates, oxalates, and diacetates.

反応工程において用いる一般式(1)で表される化合物又はその塩は、1種単独で用いてもよいし、2種以上を組み合わせて用いてもよい。 The compound represented by general formula (1) or a salt thereof used in the reaction step may be used alone or in combination of two or more.

また、一般式(1)で表される化合物は、必要に応じて、溶媒に溶解して使用することもできる。溶媒としては、特に限定的ではなく、例えば、純水、緩衝液、ジメチルスルホキシド(DMSO)などが挙げられる。溶液とする場合の濃度としては、特に限定的ではなく、例えば、0.1~50mM程度、好ましくは1~20mM程度とすることができる。 The compound represented by general formula (1) can also be dissolved in a solvent as needed. Examples of the solvent include, but are not limited to, pure water, a buffer solution, and dimethyl sulfoxide (DMSO). The concentration of the solution is not particularly limited, and can be, for example, about 0.1 to 50 mM, and preferably about 1 to 20 mM.

発色した物質の吸光度を測定する方法としては、特に限定的ではなく、常法により行うことができる。例えば、フリーラジカルと発色性物質とが反応することによって赤紫色を呈するラジカル陽イオンが生成されることから、公知の機器を用いて吸光度を測定することによってラジカル陽イオンを測定することができる。吸光度を測定する際の波長としては、例えば、460~570nm、好ましくは、500~560nmとすることができる。 The method for measuring the absorbance of the colored substance is not particularly limited and can be performed by a conventional method. For example, radical cations that exhibit a reddish purple color are generated by the reaction of free radicals with a color-forming substance, and the radical cations can be measured by measuring the absorbance using a known device. The wavelength for measuring the absorbance can be, for example, 460 to 570 nm, preferably 500 to 560 nm.

また、吸光度の測定を行う際、定量的に測定するために、測定開始時間と測定終了時間との間の吸光度の時間経過を測定することが好ましい。例えば、フリーラジカルと発色性物質との反応開始時点から3分経過時点を始点とし、反応開始時点から6分経過時点を終点として、吸光度の上昇速度(単位時間あたりの吸光度変化)を測定してもよい。 When measuring absorbance, it is preferable to measure the time course of absorbance between the start and end of the measurement in order to measure quantitatively. For example, the rate of increase in absorbance (change in absorbance per unit time) may be measured starting from 3 minutes after the start of the reaction between the free radicals and the color-forming substance and ending from 6 minutes after the start of the reaction.

化学発光法は、フリーラジカルと反応して発光する作用を有する物質(発光性物質)を用い、励起した物質が基底状態に戻る際に放出する光を発光光度計などを用いて測定する方法である。 The chemiluminescence method uses a substance (a luminescent substance) that reacts with free radicals to emit light, and measures the light emitted when the excited substance returns to its ground state using a luminescence spectrometer or similar.

発光物質としては、フリーラジカルと反応して発光する作用を有する化合物であれば特に限定されず、公知の化合物を用いることができる。例えば、ルミノール、Dansyl-TEMPO、ルシゲニンル、2-methyl-6-p-methoxyphenylethynylimidazopyrazinone(MPEC)、Hydroxyphenyl Fluorescein(HPF)、Aminophenyl Fluorescein(APF)、ウミホタル・ルシフェリン誘導体(MCLA)などが挙げられる。 The luminescent substance is not particularly limited as long as it is a compound that reacts with free radicals to emit light, and known compounds can be used. Examples include luminol, dansyl-TEMPO, lucigenin, 2-methyl-6-p-methoxyphenylethylimidazopyrazine (MPEC), hydroxyphenyl fluorescein (HPF), aminophenyl fluorescein (APF), and Cypridina luciferin derivative (MCLA).

発光した物質の光を測定する方法としては、特に限定的ではなく、用いる発光性物質の種類等に応じて適宜決定することができる。 The method for measuring the light emitted by the luminescent substance is not particularly limited and can be appropriately determined depending on the type of luminescent substance used, etc.

電子スピン共鳴法(ESR法)は、不対電子が磁場中に置かれた際に生じる準位間の遷移を観測する分光分析である。電子スピン共鳴法としては、特に限定的ではなく、公知の方法及び機器を用いて行うことができ、フリーラジカルを直接測定する直接法、スピントラップ剤とフリーラジカルとを反応させて行う間接法のいずれであってもよい。間接法を採用する場合、スピントラップ剤としては特に限定されず、公知のスピントラップ剤を用いることができる。スピントラップ剤としては、例えば、5,5-ジメチル-1-ピロリン-N―オキシド(DMPO)、2,5,5-トリエチル-1-ピロリン-N-オキシド(MPO)、3,3,5,5-テトラメチル-1-ピロリン-N-オキシド(TMPO)、N-tert-α-フェニルニトロン(PBN)などのニトロン系スピントラップ剤;2-メチル-2-ニトロソプロパン(MNP)、ニトロソデュレン(ND)などのニトロソ系スピントラップ剤などが挙げられる。 The electron spin resonance method (ESR method) is a spectroscopic analysis that observes the transition between levels that occurs when an unpaired electron is placed in a magnetic field. The electron spin resonance method is not particularly limited and can be performed using a known method and device, and may be either a direct method in which free radicals are directly measured or an indirect method in which a spin trapping agent is reacted with a free radical. When an indirect method is adopted, the spin trapping agent is not particularly limited and a known spin trapping agent can be used. Examples of the spin trapping agent include nitrone-based spin trapping agents such as 5,5-dimethyl-1-pyrroline-N-oxide (DMPO), 2,5,5-triethyl-1-pyrroline-N-oxide (M 3 PO), 3,3,5,5-tetramethyl-1-pyrroline-N-oxide (TMPO), and N-tert-α-phenylnitrone (PBN); and nitroso-based spin trapping agents such as 2-methyl-2-nitrosopropane (MNP) and nitrosodurene (ND).

HDL量の反映値としては、血液試料に含まれるHDL量を反映する値をいい、例えば、HDLの重量(質量)、濃度等が挙げられる。また、例えば、血液試料に含まれるHDL量を反映する測定値であってもよく、例えば吸光度、蛍光強度、等を用いることができる。当該測定値は、測定補助試薬を用いて測定された値であってもよい。当該測定補助試薬としては、例えば蛍光色素、HDL特異的認識分子(例えば抗体若しくはその断片)、あるいはそれらの2以上組み合わせ等が挙げられる。 The value reflecting the amount of HDL refers to a value reflecting the amount of HDL contained in the blood sample, such as the weight (mass) or concentration of HDL. It may also be a measured value reflecting the amount of HDL contained in the blood sample, such as absorbance or fluorescence intensity. The measured value may be a value measured using a measurement auxiliary reagent. Examples of the measurement auxiliary reagent include a fluorescent dye, an HDL-specific recognition molecule (e.g., an antibody or a fragment thereof), or a combination of two or more of these.

血液試料のHDL濃度を測定する方法としては、特に限定的ではなく、常法に従って行うことができる。例えば、HDL直接法、HPLC法、沈殿法などが挙げられる。HDL直接法は、遊離しているHDLコレステロールを色素存在下でコレステロールエステラーゼ及びコレステロールオキシダーゼと反応させることで生じる有色物を、例えば波長560nmにて測定することにより、HDL濃度を算出する方法である。中でも、HDL直接法が好ましい。 The method for measuring the HDL concentration of a blood sample is not particularly limited, and can be performed according to a conventional method. Examples include the HDL direct method, the HPLC method, and the precipitation method. The HDL direct method is a method in which free HDL cholesterol is reacted with cholesterol esterase and cholesterol oxidase in the presence of a dye to produce a colored substance, which is measured at a wavelength of, for example, 560 nm to calculate the HDL concentration. Among these, the HDL direct method is preferred.

血液試料の酸化HDL量の反映値を、血液試料のHDL量の反映値で除した値は、同一の血液試料を用いて測定した反映値により算出してもよく、同一対象から採取した別の血液試料を用いて測定した反映値により算出してもよい。 The value obtained by dividing the reflected value of the oxidized HDL amount of a blood sample by the reflected value of the HDL amount of a blood sample may be calculated from the reflected value measured using the same blood sample, or may be calculated from the reflected value measured using a different blood sample taken from the same subject.

両反映値は、同じ測定方法に基づいていてもよく、異なる測定方法に基づいていてもよい。例えば、酸化HDL量の反映値をフリーラジカルと発色性物質との反応開始時点から3分経過時点を始点とし、反応開始時点から6分経過時点を終点として、吸光度の上昇速度(単位時間あたりの吸光度変化)(mOD/min)、HDL量の反映値を濃度(mg/dL)として算出してもよい。 Both reflected values may be based on the same measurement method or different measurement methods. For example, the reflected value of the amount of oxidized HDL may be calculated as the rate of increase in absorbance (change in absorbance per unit time) (mOD/min) with the starting point being 3 minutes after the start of the reaction between the free radicals and the color-forming substance, and the end point being 6 minutes after the start of the reaction, and the reflected value of the amount of HDL may be calculated as the concentration (mg/dL).

後述する実施例に示す通り、血液試料の酸化HDL量の反映値を、血液試料のHDL量の反映値で除した値が高い場合には、歯石の付着がある、又はその量が多い、あるいは歯肉出血がある、又はその量が多い可能性があり、口腔衛生状態が悪いと考えられる。このため、本開示の測定方法によれば、血液試料の酸化HDL量の反映値を、血液試料のHDL量の反映値で除した値を指標として、当該血液試料を採取した対象の口腔衛生状態を測定することができる。 As shown in the examples below, when the value reflected by the amount of oxidized HDL in a blood sample divided by the value reflected by the amount of HDL in a blood sample is high, there is a possibility that there is tartar adhesion or a large amount of tartar adhesion, or there is gingival bleeding or a large amount of tartar adhesion, and oral hygiene is considered to be poor. Therefore, according to the measurement method disclosed herein, the value reflected by the amount of oxidized HDL in a blood sample divided by the value reflected by the amount of HDL in a blood sample can be used as an index to measure the oral hygiene of the subject from whom the blood sample was taken.

口腔衛生状態としては、例えば、歯石付着状態(歯石の付着の有無、付着量、付着の程度等)、歯肉出血状態(出血の有無、出血量、出血の程度等)等が挙げられる。一般的に口腔衛生状態を調べる方法として、歯垢(プラーク量)を測定する方法もあるが、この方法がその日の口腔衛生状態を反映しているのに対して、歯石付着状態と歯肉出血状態は現在までの口腔衛生状態の累積結果を反映していると考えられる。 Oral hygiene status includes, for example, tartar adhesion status (presence or absence of tartar adhesion, amount of adhesion, degree of adhesion, etc.), gingival bleeding status (presence or absence of bleeding, amount of bleeding, degree of bleeding, etc.). One common method for checking oral hygiene status is to measure dental plaque (amount of plaque), but while this method reflects the oral hygiene status on that day, tartar adhesion status and gingival bleeding status are thought to reflect the cumulative results of oral hygiene status up to the present.

本開示の測定方法によれば、例えば、対象から採取した血液試料の酸化HDL量の反映値を、血液試料のHDL量の反映値で除した値が基準値以上の場合、基準値未満の場合と比較して、口腔衛生状態が悪い可能性があると予測(判定)することができる。 According to the measurement method disclosed herein, for example, when the value reflecting the amount of oxidized HDL in a blood sample taken from a subject divided by the value reflecting the amount of HDL in the blood sample is equal to or greater than a reference value, it is possible to predict (determine) that the oral hygiene condition is likely to be poor, compared to when the value is less than the reference value.

対象から採取した血液試料の酸化HDL量の反映値を、血液試料のHDL量の反映値で除した値と比較する基準値としては、例えば、血液試料の酸化HDL量の反映値を、血液試料のHDL量の反映値で除した値が、酸化HDL量の反映値をフリーラジカルと発色性物質との反応開始時点から3分経過時点を始点とし、反応開始時点から6分経過時点を終点として、吸光度の上昇速度(単位時間あたりの吸光度変化)(mOD/min)、血液試料のHDL量(直接法)の反映値を濃度(mg/dL)として算出した場合に、0.5、0.6、又は0.7(mOD/min)/(mg/dL)程度等にすることができる。スクリーニングを目的とする際には、0.5(mOD/min)/(mg/dL)程度等とすることが好ましい。例えば、当該基準値は、潜在的口腔衛生不良者のスクリーニングを行う観点で偽陰性率(1-(感度))が低くなるよう設定することができる。また、酸化HDL量、HDL量の測定方法に応じて、一般的な検査の考え方に倣い、その検査目的に合わせて、感度、特異度、擬陽性率、偽陰性率、尤度比などを踏まえて、基準値を設定することができる。 The reference value for comparing the value obtained by dividing the reflected value of the oxidized HDL amount of the blood sample taken from the subject by the reflected value of the HDL amount of the blood sample can be, for example, about 0.5, 0.6, or 0.7 (mOD/min)/(mg/dL) when the reflected value of the oxidized HDL amount is calculated as the rate of increase in absorbance (change in absorbance per unit time) (mOD/min) and the reflected value of the HDL amount (direct method) of the blood sample as a concentration (mg/dL) with the starting point being 3 minutes after the start of the reaction between the free radical and the color-forming substance and the end point being 6 minutes after the start of the reaction. For screening purposes, it is preferable to set the value to about 0.5 (mOD/min)/(mg/dL). For example, the reference value can be set so that the false negative rate (1-(sensitivity)) is low in terms of screening for potential individuals with poor oral hygiene. In addition, depending on the method of measuring oxidized HDL and HDL amounts, the reference value can be set in accordance with the purpose of the test, taking into account the sensitivity, specificity, false positive rate, false negative rate, likelihood ratio, etc., following the general concept of testing.

また、対象から採取した血液試料の酸化HDL量の反映値を、血液試料のHDL量の反映値で除した値と比較する基準値としては、例えば、口腔衛生状態が正常な対象、より具体的には、歯石付着がなく、かつ歯肉出血がない対象から採取した血液試料の酸化HDL量の反映値を、血液試料のHDL量の反映値で除した値とすることができる。当該値は、過去に得られたデータから標準化されたものであってもよい。 The reference value for comparing the value reflecting the amount of oxidized HDL in a blood sample taken from a subject divided by the value reflecting the amount of HDL in the blood sample can be, for example, the value reflecting the amount of oxidized HDL in a blood sample taken from a subject with normal oral hygiene, more specifically, a subject without tartar and without gingival bleeding, divided by the value reflecting the amount of HDL in the blood sample. This value may be standardized from previously obtained data.

また、対象から採取した血液試料の酸化HDL量の反映値を、血液試料のHDL量の反映値で除した値と比較する基準値としては、例えば、複数の対象からなる集団における、血液試料の酸化HDL量の反映値を、血液試料のHDL量の反映値で除した値の平均値、中央値、25パーセンタイル値、75パーセンタイル値、又は最頻値等を基準値とすることもできる。 The reference value for comparing the value reflecting the amount of oxidized HDL in a blood sample taken from a subject divided by the value reflecting the amount of HDL in the blood sample can be, for example, the average, median, 25th percentile, 75th percentile, or mode of the value reflecting the amount of oxidized HDL in a blood sample divided by the value reflecting the amount of HDL in the blood sample in a group of multiple subjects.

また、本開示の測定方法によれば、同一対象の経時的な口腔衛生状態の変動を測定することもできる。例えば、対象から採取した血液試料の酸化HDL量の反映値を、血液試料のHDL量の反映値で除した値が経時的に増加した場合には、口腔衛生状態が悪化した可能性があると予測(判定)することができる。例えば、対象から採取した血液試料の酸化HDL量の反映値を、血液試料のHDL量の反映値で除した値が経時的に減少した場合には、口腔衛生状態が改善した可能性があると予測(判定)することができる。 Furthermore, according to the measurement method disclosed herein, it is also possible to measure changes in oral hygiene over time in the same subject. For example, if the value reflecting the amount of oxidized HDL in a blood sample taken from the subject divided by the value reflecting the amount of HDL in the blood sample increases over time, it is possible to predict (determine) that the oral hygiene condition may have deteriorated. For example, if the value reflecting the amount of oxidized HDL in a blood sample taken from the subject divided by the value reflecting the amount of HDL in the blood sample decreases over time, it is possible to predict (determine) that the oral hygiene condition may have improved.

本開示によれば、血液試料の酸化HDL量の反映値を、血液試料のHDL量の反映値で除した値を指標とすることにより、歯科専門家が不在の場合や歯科健診を実施していない場合であっても、例えば、健康診断等における血液検査等の結果をもとに、口腔衛生状態を測定することができる。 According to the present disclosure, by using the value reflecting the amount of oxidized HDL in a blood sample divided by the value reflecting the amount of HDL in a blood sample as an index, it is possible to measure oral hygiene status based on the results of blood tests in health checkups, for example, even when a dental professional is not present or a dental checkup has not been conducted.

本開示は、対象の口腔衛生状態を判定することを補助する方法をも包含する。本明細書において、当該方法を、「本開示の補助方法」と表記することがある。 The present disclosure also encompasses a method for assisting in assessing the oral hygiene status of a subject. In this specification, the method may be referred to as the "assisted method of the present disclosure."

本開示の補助方法は、対象から採取した血液試料の酸化HDL量の反映値を、血液試料のHDL量の反映値で除した値を指標とする。本開示の補助方法は、対象から採取した血液試料の酸化HDL量の反映値を測定することを含んでいてもよく、血液試料のHDL量の反映値を測定することを含んでいてもよい。 The assistance method of the present disclosure uses as an index a value reflecting the amount of oxidized HDL in a blood sample collected from a subject divided by a value reflecting the amount of HDL in the blood sample. The assistance method of the present disclosure may include measuring a value reflecting the amount of oxidized HDL in a blood sample collected from a subject, or may include measuring a value reflecting the amount of HDL in the blood sample.

対象から採取した血液試料の酸化HDL量の反映値、及び血液試料のHDL量の反映値等については、前述した「本開示の測定方法」についての記載を援用することができる。 The above-mentioned description of the "measurement method of the present disclosure" can be used to refer to the values reflecting the amount of oxidized HDL in the blood sample collected from the subject and the values reflecting the amount of HDL in the blood sample.

本開示の補助方法によれば、対象の口腔衛生状態を判定することを補助することができる。 The assistance method disclosed herein can assist in assessing the oral hygiene status of a subject.

なお、本明細書において「含む」とは、「本質的にからなる」と、「からなる」をも包含する(The term "comprising" includes "consisting essentially of” and "consisting of.")。また、本開示は、本明細書に説明した構成要件を任意の組み合わせで全て包含する。 In addition, in this specification, the term "comprising" includes "consisting essentially of" and "consisting of." In addition, the present disclosure includes all of the constituent elements described in this specification in any combination.

また、上述した本開示の各実施形態について説明した各種特性(性質、構造、機能等)は、本開示に包含される主題を特定するにあたり、どのように組み合わせられてもよい。すなわち、本開示には、本明細書に記載される組み合わせ可能な各特性のあらゆる組み合わせからなる主題が全て包含される。 Furthermore, the various characteristics (properties, structures, functions, etc.) described for each embodiment of the present disclosure above may be combined in any way to identify the subject matter encompassed by the present disclosure. In other words, the present disclosure encompasses all subject matter consisting of any combination of the combinable characteristics described in this specification.

本開示の内容を以下の試験例を用いて具体的に説明する。しかし、本開示はこれらに何ら限定されるものではない。下記において、特に言及する場合を除いて、実験は大気圧及び常温条件下で行っている。 The contents of this disclosure will be specifically explained using the following test examples. However, this disclosure is in no way limited to these. In the following, unless otherwise specified, the experiments were performed under atmospheric pressure and room temperature conditions.

対象
HbA1cが5.6%以上、空腹時血糖が110mg/dL以上、又はBMIが30以上の対象を除外した男性159名を対象とした(年齢は、平均52.0歳、標準偏差6.4)。
また、口腔指標については、1人当たり代表歯6本について測定した(図1)。代表歯は、右上6、右上1、左上6、右下6、左下1、及び左下6とした。ただし、6が喪失している場合は、7で測定した。
The subjects were 159 men (mean age 52.0 years, standard deviation 6.4), excluding those with HbA1c of 5.6% or more, fasting blood glucose of 110 mg/dL or more, or BMI of 30 or more.
In addition, oral indices were measured for six representative teeth per person (Figure 1). The representative teeth were the upper right 6, the upper right 1, the upper left 6, the lower right 6, the lower left 1, and the lower left 6. However, if tooth 6 was missing, tooth 7 was measured.

試験例1 血液試料の酸化HDL量の反映値を、血液試料のHDL量の反映値で除した値(oxHDL/HDL)の算出
(1)血液試料の調製
真空採血管を用いて対象の静脈から血液を採取した後、1時間、室温に放置後、一般的な血清分離条件にて遠心分離を行い、上清(血清)を血液試料として得た後、-80℃で保存した。
Test Example 1 Calculation of the value reflecting the amount of oxidized HDL in a blood sample divided by the value reflecting the amount of HDL in a blood sample (oxHDL/HDL)
(1) Preparation of blood samples: Blood was collected from the vein of the subject using a vacuum blood collection tube, and then left at room temperature for 1 hour. Then, the blood was centrifuged under general serum separation conditions to obtain the supernatant (serum) as a blood sample, which was then stored at −80° C.

(2)酸化HDL量の反映値(oxHDL)の測定
0.1M酢酸緩衝液(pH4.8)と100μM硫酸アンモニウム鉄(II)六水和物との混合液をマイクロプレートの各wellに加え、37℃に保温した。次いで、各wellにN,N-ジエチル-p-フェニレンジアミン硫酸塩溶液(溶媒:DMSO)を加えた後、上記(1)で得られた血清を加えた。37℃に設定したマイクロプレートリーダー(バイオラッド社製)を用い、波長505nmの吸光度を測定した。なお、吸光度の測定は、Kineticsに設定し、10秒毎に計48回(合計8分間)測定し、測定開始3分後から6分後の各値から単位時間あたりの吸光度変化(単位:mOD/min)を算出することにより行った。
(2) Measurement of the reflectance value of oxidized HDL amount (oxHDL) A mixture of 0.1 M acetate buffer (pH 4.8) and 100 μM ammonium iron (II) sulfate hexahydrate was added to each well of the microplate and kept at 37° C. Next, N,N-diethyl-p-phenylenediamine sulfate solution (solvent: DMSO) was added to each well, and then the serum obtained in (1) above was added. The absorbance at a wavelength of 505 nm was measured using a microplate reader (manufactured by Bio-Rad) set at 37° C. The absorbance was measured by setting it to Kinetics, measuring a total of 48 times (for a total of 8 minutes) every 10 seconds, and calculating the absorbance change per unit time (unit: mOD/min) from each value 3 minutes after the start of measurement to 6 minutes after the start of measurement.

(3)HDL量の反映値の測定
血清を用いてHDL直接法により測定した(単位:mg/dL)。
(3) Measurement of the reflection value of HDL amount Using serum, HDL was measured by the direct HDL method (unit: mg/dL).

(4)血液試料の酸化HDL量の反映値を、血液試料のHDL量の反映値で除した値(oxHDL/HDL)の算出方法
上記(2)で算出した酸化HDL量の反映値(mOD/min)を、上記(3)で算出したHDL量の反映値(mg/dL)で除することによって、oxHDL/HDL(単位:(mOD/min)/(mg/dL))を算出した。
(4) Method for calculating the value (oxHDL/HDL) obtained by dividing the value reflecting the amount of oxidized HDL in the blood sample by the value reflecting the amount of HDL in the blood sample The value reflecting the amount of oxidized HDL (mOD/min) calculated in (2) above was divided by the value reflecting the amount of HDL (mg/dL) calculated in (3) above to calculate oxHDL/HDL (unit: (mOD/min)/(mg/dL)).

対象のoxHDLは、平均30.6mOD/min、標準偏差4.7、oxHDL/HDLは、平均0.54(mOD/min)/(mg/dL)、標準偏差0.16であった。 The subjects' oxHDL averaged 30.6 mOD/min with a standard deviation of 4.7, and oxHDL/HDL averaged 0.54 (mOD/min)/(mg/dL) with a standard deviation of 0.16.

試験例2 CI(Culculus Index)の測定
CIは歯石沈着の程度を示した指標である。代表歯6本について以下の基準に従って、CIを測定した。
<基準>
0:沈着は認められない
1:歯肉縁上歯石あり
2:歯肉縁下歯石あり
代表歯6本のCIについて、CIの最大値が0である場合には、「CIなし」と、CIの最大値が1以上である場合には、「CIあり」とした。
Test Example 2 Measurement of CI (Culculus Index) CI is an index showing the degree of tartar deposition. CI was measured for six representative teeth according to the following criteria.
<Standards>
0: No deposition observed 1: Supra-gingival calculus present 2: Subgingival calculus present Regarding the CI of the six representative teeth, if the maximum CI value was 0, it was recorded as "no CI," and if the maximum CI value was 1 or greater, it was recorded as "CI present."

試験例3 BOP(bleeding on probing)の測定
BOPはプロービング(プローブを使った歯周ポケットの診査)を行った後に生じる出血の有無の評価指標である。代表歯6本について、BOPを測定した。代表歯6本のうち1本でも出血がある場合には、「BOPあり」、6本とも出血がない場合には、「BOPなし」とした。
Test Example 3 Measurement of BOP (bleeding on probing) BOP is an evaluation index of the presence or absence of bleeding after probing (examination of periodontal pockets using a probe). BOP was measured for six representative teeth. If any one of the six representative teeth was bleeding, it was judged as "BOP present," and if none of the six teeth were bleeding, it was judged as "BOP absent."

対象をCIありの群又はなしの群に分類し、各群におけるoxHDL/HDLをプロットした結果を図2に示す。図2中、カラムから上方に伸びた髭の先端は四分位範囲に1.5を乗じ、75パーセンタイル値に加えた値を示し、カラムの上端は75パーセンタイル値を示し、カラム中の横線は50パーセンタイル値(中央値)を示し、カラムの下端は25パーセンタイル値を示し、カラムから下方に伸びた髭の先端は四分位範囲に1.5を乗じ、25パーセンタイル値から減じた値を示す。 The subjects were classified into groups with and without CI, and the oxHDL/HDL in each group was plotted, as shown in Figure 2. In Figure 2, the tips of the whiskers extending upward from the columns indicate the interquartile range multiplied by 1.5 and added to the 75th percentile value, the top of the columns indicates the 75th percentile value, the horizontal line in the columns indicates the 50th percentile value (median), the bottom of the columns indicates the 25th percentile value, and the tips of the whiskers extending downward from the columns indicate the interquartile range multiplied by 1.5 and subtracted from the 25th percentile value.

図2に示すように、CIありの群のoxHDL/HDLは、CIなしの群のoxHDL/HDLに対して、有意に高いことが確認された。このことから、oxHDL/HDLが高い場合には、歯石の付着がある、又はその量が多い可能性があることが示唆された。つまり、oxHDL/HDLにより、歯石の付着量の程度(有無)を測定できることが示唆された。なお、当該データは、男性のみを対象として解析を行った結果であるが、対象に女性を含めて解析を行った場合にも、同様の結果が得られた。 As shown in Figure 2, it was confirmed that the oxHDL/HDL of the group with CI was significantly higher than that of the group without CI. This suggests that when oxHDL/HDL is high, there is a possibility that tartar adhesion is present or the amount is large. In other words, it is suggested that the degree (presence or absence) of tartar adhesion can be measured by oxHDL/HDL. Note that this data is the result of an analysis conducted on male subjects only, but similar results were obtained when the analysis was conducted including female subjects.

対象をBOPありの群又はなしの群に分類し、各群におけるoxHDL/HDLをプロットした結果を図3に示す。図3中、カラムから上方に伸びた髭の先端は四分位範囲に1.5を乗じ、75パーセンタイル値に加えた値を示し、カラムの上端は75パーセンタイル値を示し、カラム中の横線は50パーセンタイル値(中央値)を示し、カラムの下端は25パーセンタイル値を示し、カラムから下方に伸びた髭の先端は四分位範囲に1.5を乗じ、25パーセンタイル値から減じた値を示す。 The subjects were classified into groups with and without BOP, and the oxHDL/HDL in each group was plotted, as shown in Figure 3. In Figure 3, the tips of the whiskers extending upward from the columns indicate the interquartile range multiplied by 1.5 and added to the 75th percentile value, the top of the columns indicates the 75th percentile value, the horizontal line in the columns indicates the 50th percentile value (median), the bottom of the columns indicates the 25th percentile value, and the tips of the whiskers extending downward from the columns indicate the interquartile range multiplied by 1.5 and subtracted from the 25th percentile value.

図3に示すように、BOPありの群のoxHDL/HDLは、BOPなしの群のoxHDL/HDLに対して、有意に高いことが確認された。このことから、oxHDL/HDLが高い場合には、歯肉出血がある、又はその量が多い可能性があることが示唆された。つまり、oxHDL/HDLにより、歯肉出血量の程度(有無)を測定できることが分かった。なお、当該データは、男性のみを対象として解析を行った結果であるが、対象に女性を含めて解析を行った場合にも、同様の結果が得られた。 As shown in Figure 3, it was confirmed that the oxHDL/HDL of the group with BOP was significantly higher than that of the group without BOP. This suggests that when oxHDL/HDL is high, there is a possibility that gingival bleeding will occur or the amount of bleeding will be large. In other words, it was found that the degree (presence or absence) of gingival bleeding can be measured by oxHDL/HDL. Note that this data is the result of an analysis conducted on men only, but similar results were obtained when the analysis was conducted including women.

以上のことから、oxHDL/HDLが高い場合には、口腔衛生状態が悪い可能性があることが示唆された。つまり、oxHDL/HDLにより、口腔衛生状態を測定できることが示唆された。 These findings suggest that a high oxHDL/HDL ratio may indicate poor oral hygiene. In other words, it is possible to measure oral hygiene using oxHDL/HDL.

Claims (6)

血液試料の酸化HDL量の反映値を、血液試料のHDL量の反映値で除した値を指標として、当該血液試料を採取した対象の口腔衛生状態を測定する方法であって、
前記口腔衛生状態が歯肉出血状態である、方法
A method for measuring an oral hygiene state of a subject from whom a blood sample was taken , comprising: dividing a value reflecting an amount of oxidized HDL in a blood sample by a value reflecting an amount of HDL in the blood sample as an index;
The method, wherein the oral health condition is a bleeding gum condition .
血液試料の酸化HDL量の反映値を、血液試料のHDL量の反映値で除した値を指標として、当該血液試料を採取した対象の口腔衛生状態を測定する方法であって、
口腔衛生状態が歯石付着状態である、方法。
A method for measuring an oral hygiene state of a subject from whom a blood sample was taken, comprising: dividing a value reflecting an amount of oxidized HDL in a blood sample by a value reflecting an amount of HDL in the blood sample as an index;
The method wherein the oral hygiene condition is a tartar condition .
(A)血液試料の酸化HDL量の反映値を測定する工程、及び
(B)血液試料のHDL量の反映値を測定する工程、
を含む、請求項1又は2に記載の方法。
(A) measuring a value reflective of the amount of oxidized HDL in a blood sample; and (B) measuring a value reflective of the amount of HDL in a blood sample.
The method of claim 1 or 2, comprising:
前記酸化HDL量の反映値の測定が、
(1)血液試料と、遷移金属化合物及び酸性緩衝液を含む溶液とを混合する工程を含む方法により行われる、
請求項3に記載の方法。
The measurement of the reflection value of the amount of oxidized HDL
(1) The method is carried out by a method including a step of mixing a blood sample with a solution containing a transition metal compound and an acidic buffer solution,
The method according to claim 3.
前記酸化HDL量の反映値の測定が、
さらに、
(2)前記工程(1)により産生されたフリーラジカルを測定する工程を含む方法により行われる、
請求項4に記載の方法。
The measurement of the reflection value of the amount of oxidized HDL
moreover,
(2) The method is carried out by a method including a step of measuring the free radicals produced in the step (1).
The method according to claim 4.
前記HDL量の反映値の測定が、HDL直接法により行われる、請求項3に記載の方法。 The method according to claim 3, wherein the measurement of the reflection value of HDL amount is performed by a direct HDL method.
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