JPH0245827B2 - Kureachininsokuteiyoshakusoseibutsu - Google Patents
KureachininsokuteiyoshakusoseibutsuInfo
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- JPH0245827B2 JPH0245827B2 JP5391382A JP5391382A JPH0245827B2 JP H0245827 B2 JPH0245827 B2 JP H0245827B2 JP 5391382 A JP5391382 A JP 5391382A JP 5391382 A JP5391382 A JP 5391382A JP H0245827 B2 JPH0245827 B2 JP H0245827B2
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- Expired - Lifetime
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-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/70—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving creatine or creatinine
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Description
本発明は、体液中のクレアチニンを定量測定す
るための試薬組成物に関するものである。 クレアチニンは、筋肉の収縮エネルギー源の一
つであるクレアチンリン酸より生じたクレアチン
が、非酵素的に脱水して生成したものであり、生
体内では全く利用されずに終末代謝産物として尿
中に排泄される。そして、クレアチニンの測定は
腎炎や腎不全等の腎障害ならびに筋ジストロフイ
ー症等の診断及び治療の経過の観察に有意義な情
報を与える。 体液中のクレアチニンの測定法は、アルカリ性
のもとでピクリン酸とクレアチニンの活性メチレ
ン基とを縮合反応させ、生ずる呈色を比色定量す
るヤツフエ法が広く行われている。 しかしながら、この測定方法はピクリン酸とク
レアチニンの活性メチレンの反応であるため、ク
レアチニンに対して特異的でなく、アセト酢酸や
オキシ酪酸など血清中の他の活性メチレン基含有
物質が類似の呈色反応を起し、プラスの誤差を生
む。その為、血清中に存在する蛋白質等の妨害物
質の干渉を除くためには除蛋白の操作を必要とし
た、しかし、除蛋白操作は煩雑で、迅速性を要求
される臨床検査法としては適当でない。 そこで、除蛋白操作を要せず、蛋白質等の干渉
を抑制する方法として界面活性剤が使用されるよ
うになる。従来、この界面活性剤には、イオン性
の高級アルコール硫酸エステル又は非イオン性の
ポリオキシエチレン・オキサイド縮合型を用い
る。特に、ラウリル硫酸塩は広く用いられている
が、冬期の低温保存時或は測定時に析出・沈殿し
易いため試薬が白濁し、大きな欠点となつてい
た。 本発明者は、以上の点に鑑み界面活性剤を種々
検討した結果、デシル硫酸塩を用いることによ
り、従来の欠点を解決し得る安定なクレアチニン
の測定用試薬を見出し、本発明を完成した。 本発明は、アルカリ試液系、ピクリン酸試液
系、酸性溶液及び標準試液系の構成から成る。 アルカリ試薬系は、例えばホウ砂と水酸化ナト
リウム又はそのカリウム塩等が使用される。ピク
リン酸試液系はピクリン酸とデシル硫酸のナトリ
ウム、カリウム又はリチウム等の主成分と水酸化
ナトリウム又はそのカリウム等が使用される。酸
性溶液はPHを酸性側にすることのできる酸性物質
が望しい。例えば、酢酸、塩酸、硫酸、硝酸など
を使用する。標準試液系はクレアチニンと塩酸等
が使用される。 本発明によれば、氷冷及び冷蔵庫保存（マイナ
ス１℃から３℃で16日間）での結晶の析出につい
て、デシル硫酸塩濃度０〜６％までで析出はみら
れない。同様の濃度及び保存条件でピクリン酸試
液系とアルカリ試液系との１：１の割合での混合
液においても結晶折出はみなれない。この保存条
件における従来のラウリル硫酸塩を含んだピクリ
ン酸試液系では折出を認める。表−１はピクリン
酸試液中とそれにアルカリ試液を加えた混合液
（測定液）中のデシル硫酸ナトリウム濃度と従来
のラウリル硫酸ナトリウム濃度の折出・沈殿の有
無の比較を示すものである。
るための試薬組成物に関するものである。 クレアチニンは、筋肉の収縮エネルギー源の一
つであるクレアチンリン酸より生じたクレアチン
が、非酵素的に脱水して生成したものであり、生
体内では全く利用されずに終末代謝産物として尿
中に排泄される。そして、クレアチニンの測定は
腎炎や腎不全等の腎障害ならびに筋ジストロフイ
ー症等の診断及び治療の経過の観察に有意義な情
報を与える。 体液中のクレアチニンの測定法は、アルカリ性
のもとでピクリン酸とクレアチニンの活性メチレ
ン基とを縮合反応させ、生ずる呈色を比色定量す
るヤツフエ法が広く行われている。 しかしながら、この測定方法はピクリン酸とク
レアチニンの活性メチレンの反応であるため、ク
レアチニンに対して特異的でなく、アセト酢酸や
オキシ酪酸など血清中の他の活性メチレン基含有
物質が類似の呈色反応を起し、プラスの誤差を生
む。その為、血清中に存在する蛋白質等の妨害物
質の干渉を除くためには除蛋白の操作を必要とし
た、しかし、除蛋白操作は煩雑で、迅速性を要求
される臨床検査法としては適当でない。 そこで、除蛋白操作を要せず、蛋白質等の干渉
を抑制する方法として界面活性剤が使用されるよ
うになる。従来、この界面活性剤には、イオン性
の高級アルコール硫酸エステル又は非イオン性の
ポリオキシエチレン・オキサイド縮合型を用い
る。特に、ラウリル硫酸塩は広く用いられている
が、冬期の低温保存時或は測定時に析出・沈殿し
易いため試薬が白濁し、大きな欠点となつてい
た。 本発明者は、以上の点に鑑み界面活性剤を種々
検討した結果、デシル硫酸塩を用いることによ
り、従来の欠点を解決し得る安定なクレアチニン
の測定用試薬を見出し、本発明を完成した。 本発明は、アルカリ試液系、ピクリン酸試液
系、酸性溶液及び標準試液系の構成から成る。 アルカリ試薬系は、例えばホウ砂と水酸化ナト
リウム又はそのカリウム塩等が使用される。ピク
リン酸試液系はピクリン酸とデシル硫酸のナトリ
ウム、カリウム又はリチウム等の主成分と水酸化
ナトリウム又はそのカリウム等が使用される。酸
性溶液はPHを酸性側にすることのできる酸性物質
が望しい。例えば、酢酸、塩酸、硫酸、硝酸など
を使用する。標準試液系はクレアチニンと塩酸等
が使用される。 本発明によれば、氷冷及び冷蔵庫保存（マイナ
ス１℃から３℃で16日間）での結晶の析出につい
て、デシル硫酸塩濃度０〜６％までで析出はみら
れない。同様の濃度及び保存条件でピクリン酸試
液系とアルカリ試液系との１：１の割合での混合
液においても結晶折出はみなれない。この保存条
件における従来のラウリル硫酸塩を含んだピクリ
ン酸試液系では折出を認める。表−１はピクリン
酸試液中とそれにアルカリ試液を加えた混合液
（測定液）中のデシル硫酸ナトリウム濃度と従来
のラウリル硫酸ナトリウム濃度の折出・沈殿の有
無の比較を示すものである。
【表】
本発明のクレアチニン測定用試薬は、従来のラ
ウリル硫酸塩を用いた試薬系に比べて冬期の低温
状態において試薬の折出・沈殿を防ぎ、極めて安
全で、簡便、正確なるクレアチニンの測定を提供
するものである。 以下、実施例につき、本発明を説明する。 実施例 １ (1) 試薬の調製 クレアチニンアルカリ試液 約800mlの水に8.35ｇの水酸化ナトリウム
と22.06ｇのホウ砂を加えて溶解し、水で全
量を1000mlに調製する。 クレアチニンピクリン酸試液 約800mlの水に1.06ｇの水酸化ナトリウム
と、7.10ｇのピクリン酸を加えて溶解し、次
に25.0ｇのデシル硫酸ナトリウムを加えて、
水で全量を1000mlに調製する。 クレアチニン酸性溶液 水1000mlに800mlの氷酢酸を溶解する。 クレアチニン標準液 約800mlの水に0.05ｇのクレアチニンと塩
酸9.0mlを溶解し、水で全量を1000mlに調製
する。 (2) 測定操作法 測定試液として用時、クレアチニンアルカ
リ試液とクレアチニンピクリン酸試液を１：
１の割合に混合する。 試験管に検体用として血清又は10倍希釈尿
（24時間尿を用いる）、試薬ブランク用として
純水、標準液を各々0.2mlとる。次いで、
各々に測定試液3.0mlを加え、混和して室温
に30〜35分間放置する。放置後、試薬系ブラ
ンクを対照に510nｍで検体（）、標準液の
吸光度を読み、検体用と試薬ブランク用を再
び試験管に戻す。吸光度の読み取り後30分以
内にクレアチニン酢酸試液を３滴、滴下して
混和後室温に10分間放置する。放置後、試薬
ブランクを対照として510nｍで検体（）
の吸光度を50分以内に測定する。そして、次
の式よりクレアチニン濃度を求める。 ＜式＞ 血清クレアチニン（mg／dl）＝検体（）
のO.D−検体（）のO.D／標準液のO.D×５
ウリル硫酸塩を用いた試薬系に比べて冬期の低温
状態において試薬の折出・沈殿を防ぎ、極めて安
全で、簡便、正確なるクレアチニンの測定を提供
するものである。 以下、実施例につき、本発明を説明する。 実施例 １ (1) 試薬の調製 クレアチニンアルカリ試液 約800mlの水に8.35ｇの水酸化ナトリウム
と22.06ｇのホウ砂を加えて溶解し、水で全
量を1000mlに調製する。 クレアチニンピクリン酸試液 約800mlの水に1.06ｇの水酸化ナトリウム
と、7.10ｇのピクリン酸を加えて溶解し、次
に25.0ｇのデシル硫酸ナトリウムを加えて、
水で全量を1000mlに調製する。 クレアチニン酸性溶液 水1000mlに800mlの氷酢酸を溶解する。 クレアチニン標準液 約800mlの水に0.05ｇのクレアチニンと塩
酸9.0mlを溶解し、水で全量を1000mlに調製
する。 (2) 測定操作法 測定試液として用時、クレアチニンアルカ
リ試液とクレアチニンピクリン酸試液を１：
１の割合に混合する。 試験管に検体用として血清又は10倍希釈尿
（24時間尿を用いる）、試薬ブランク用として
純水、標準液を各々0.2mlとる。次いで、
各々に測定試液3.0mlを加え、混和して室温
に30〜35分間放置する。放置後、試薬系ブラ
ンクを対照に510nｍで検体（）、標準液の
吸光度を読み、検体用と試薬ブランク用を再
び試験管に戻す。吸光度の読み取り後30分以
内にクレアチニン酢酸試液を３滴、滴下して
混和後室温に10分間放置する。放置後、試薬
ブランクを対照として510nｍで検体（）
の吸光度を50分以内に測定する。そして、次
の式よりクレアチニン濃度を求める。 ＜式＞ 血清クレアチニン（mg／dl）＝検体（）
のO.D−検体（）のO.D／標準液のO.D×５
第１図は本発明の試薬と従来法の試薬との相関
を示すグラフである。
を示すグラフである。
Claims (1)
- １ アルカリ試液系、ピクリン酸試液系及び酸性
溶液から成る試薬系において、界面活性剤として
デシル硫酸塩を用いることを特徴とする体液中の
クレアチニン測定用試薬組成物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5391382A JPH0245827B2 (ja) | 1982-04-02 | 1982-04-02 | Kureachininsokuteiyoshakusoseibutsu |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5391382A JPH0245827B2 (ja) | 1982-04-02 | 1982-04-02 | Kureachininsokuteiyoshakusoseibutsu |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58172554A JPS58172554A (ja) | 1983-10-11 |
| JPH0245827B2 true JPH0245827B2 (ja) | 1990-10-11 |
Family
ID=12955946
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5391382A Expired - Lifetime JPH0245827B2 (ja) | 1982-04-02 | 1982-04-02 | Kureachininsokuteiyoshakusoseibutsu |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0245827B2 (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0625767B2 (ja) * | 1986-03-07 | 1994-04-06 | 株式会社ヤトロン | クレアチニン測定試薬 |
| AU2014384759B2 (en) | 2014-02-28 | 2021-07-22 | Nitto Denko Corporation | Urinalysis device and dry reagent for quantitative urinalysis |
-
1982
- 1982-04-02 JP JP5391382A patent/JPH0245827B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS58172554A (ja) | 1983-10-11 |
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