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JPH0314004B2 - - Google Patents
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JPH0314004B2 - - Google Patents

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JPH0314004B2
JPH0314004B2 JP56046072A JP4607281A JPH0314004B2 JP H0314004 B2 JPH0314004 B2 JP H0314004B2 JP 56046072 A JP56046072 A JP 56046072A JP 4607281 A JP4607281 A JP 4607281A JP H0314004 B2 JPH0314004 B2 JP H0314004B2
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JP
Japan
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eimeria
sporozoites
comparative example
solution
oocysts
Prior art date
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JP56046072A
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Kenji Shibata
Masami Kojima
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Nisshin Seifun Group Inc
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Description

【発明の詳細な説明】
本発明は家禽類のコクシジウム症を免疫的に予
防し得る抗コクシジウム剤および該抗コクシジウ
ム剤の接種方法に関する。 家禽類すなわち鶏、七面鳥、うずら、ほろほろ
鳥などのコクシジウム症はある種の寄生性原虫の
感染により起きる伝染病で世界各国に広く分布し
ている。コクシジウム症はたとえば鶏ではアイメ
リア・テネラ(Eimeria,tenella)、アイメリ
ア・アセルブリナ(E.acervulina)、アイメリ
ア・ネカトリツクス(E.necatrix)、アイメリ
ア・ブルネツテイ(E.brunetti)、アイメリア・
マキシマ(E.maxima)、などにより、七面鳥で
はアイメリア・メレアグリミテイス(E.
meleagrimitis)、アイメリア・アデノイデス(E.
adenoides)、アイメリア・ガロパボニス(E.
gallopovonis)などにより、うずらではアイメリ
ア・ウズラ(E.uzura)、アイメリア・ツノダイ
(E.tsunodai)などにより、そしてほろほろ鳥で
はアイメリア・グレニエリ(E.grenieri)、アイ
メリア・ヌミダエ(E.numidae)などにより惹起
されることが知られている。これに感染した動物
は下痢、血便等の症状を呈し、治療が遅れた場合
または症状が重い場合には斃死することも少なく
ない。 そして斃死に至らなくても発育が阻害されるた
めにコクシジウム症は家禽飼育業者にとつては最
も被害の大きい疾患の一つとされてきた。 従来、かかるコクシジウム症の予防としてはワ
クチンを含めて薬剤の経口投与が行われている。 コクシジウム症のワクチン(主に鶏について行
なわれている)はコクシジウム症を起しやすい数
種類のオーシストの混合液であり、このものを家
禽に経口投与するものである。しかしながら、こ
うした薬剤の投与による予防法は薬剤の耐性獲得
による効果の減退等の問題があり、またワクチン
による予防法は投与量によつては副作用が発現す
る可能性があつた。 本発明者らは前記問題を解決すべく研究を行つ
た結果、家禽類のコクシジウム原虫の1種である
アイメリア・テネラのスポロゾイトが家禽類の抗
コクシジウ剤として有効であることを見出して先
に出願した(特公昭63−54692号公報;特許第
1504463号)。そして更に研究を続けた結果、アイ
メリア・テネラ以外の家禽類のコクシジウム原虫
のスポロゾイトも抗コクシジウム剤として有効で
あること、しかもそれを家禽類の総排泄腔に接種
するのが一層有効であることを見出した。 したがつて、本発明はアイメリア・テネラを除
く家禽類のコクシジウム原虫のスポロゾイトを活
性成分とする抗コクシジウム剤である。 更に、本発明はアイメリア・テネラを除く家禽
類のコクシジウム原虫のスポロゾイトを活性成分
とする抗コクシジウム剤を家禽類の総排泄腔に接
種することを特徴とする家禽類のコクシジウム症
の予防法を包含する。 本発明で云うスポロゾイトはコクシジウム原虫
の発育環の一形態であり、生きているものを指
す。またスポロゾイトの他にスポロシストやオー
シストもしくはそれらの皮膜などの存在すること
を妨げないこのスポロゾイトの調製法の例を示す
と次のようである。 コクシジウム症に感染した家禽類の糞、腸管壁
および腸管内容物から分離したコクシジウム原虫
の成熟オーシストの皮膜を磨砕してスポロシスト
を得る。次いでこのスポロシストに家禽の胆汁お
よびトリプシンを作用させてスポロゾイトを得
る。このようにして得られたものは主としてスポ
ロゾイトを含むものである。 次いで前記スポロゾイトを水、生理食塩水、緩
衝液等に懸濁せしめて使用するか、または固形状
に加工して接種してもよい。懸濁液に関しては付
着性または粘稠性を与えるように加工してもよ
い。接種部位としては口腔、筋肉および総排泄腔
が挙げられるが、特に総排泄腔に接種するのが好
ましい。総排泄腔接種の具体的方法としては家禽
類の肛門にたらすか、または注入、挿入、スプレ
ーなどの方法が挙げられる。スポロゾイトの接種
量は1羽当り約500個以上がよい。 本発明に係る抗コクシジウム剤を用いれば副作
用を起こすことなく家禽類のコクシジウム症をほ
とんど完全に予防し得る。また本発明の抗コクシ
ジウム剤は他の家禽類予防及び治療剤例えばニユ
ーカツスル病ワクチンまたは伝染性コリーザ治療
剤のごときと併用または同時適用しても差支えな
い。更にコクシジウム症感染防御効果も例えば初
生雛に本発明の抗コクシジウム剤を接種した場
合、11週以上の長期間にわたり非常に有効なもの
である。 次に本発明の実施例を示し、効果について説明
する。 実施例 1 鶏の初生雛(ブロイラー専用種ハバード)10羽
の肛門に下記に示すアイメリア・ブルネツテイの
試料を1羽当り1滴(スポロゾイトとして1万
個)をたらした〔本発明、比較例1,2,3およ
び4〕。またオーシストを初生雛に経口接種した。
〔比較例5〕。 次いで、この鶏に21日令において1羽当り5万
個のアイメリア・ブルネツテイの成熟オーシスト
を経口投与してコクシジウム症に感染させた。感
染後7日目に腸下部病変と糞中オーシスト数を観
察した。 試料及び接種方法 本発明:アイメリア・ブルネツテイのスポロゾ
イト330000個をPBS(−)溶液1ml中に懸濁せし
めたもの。 比較例(1):アイメリア・ブルネツテイのスポロ
シスト165000個(スポロゾイト)として330000
個)をPBS(−)溶液1ml中に懸濁せしめたも
の。 比較例(2):アイメリア・ブルネツテイのオーシ
スト41250個(スポロゾイトとして330000個を
PBS(−)溶液1ml中に懸濁せしめたもの。 比較例(3):本発明の試料を60℃において30分間
加熱したもの。 比較例(4):アイメリア・ブルネツテイのスポロ
ゾイト330000個を10%ホルマリン溶液に入れ30分
間放置し、次いでこの溶液を遠心分離し、沈澱を
PBS(−)溶液1ml中に懸濁せしめたもの。 比較例(5):鶏1羽当りアイメリア・ブルネツテ
イのオーシスト1250個を経口接種する。 試料に用いたオーシスト、スポロシストおよび
スポロゾイトの調製は、「J.Protozool.」第9巻
(2)154〜161頁(1962)に記載されている方法に基
づいて以下のように行つた。 アイメリア・ブルネツテイの成熟オーシストを
経口投与した鶏の糞、盲腸壁および盲腸内容物を
集め、3%重クロム酸カリウム溶液に浮遊せし
め、そして28℃において2日間培養した。 得られた成熟オーシストを含む溶液を遠心分離
(3000rpm、10分間)し、そして沈澱を集める。
次にこの沈澱を水で洗浄し且つ飽和食塩水を添加
する。この溶液を遠心分離(3000rpm、10分間)
し、上澄みを採り、この上澄みを水で希釈し、希
釈液を更に遠心分離(1000rpm、3分間)し、そ
して沈澱を集める。この沈澱はほとんどオーシス
トのみよりなる[比較例(2)で使用]。前記オーシ
ストに水および5%次亜塩素酸ナトリウム液を加
え且つ15分間放置した後、遠心分離(2000rpm、
3分間)を行う。得られた沈澱を水で洗浄し、次
いでホモジナイザーで磨砕する。この磨砕物はほ
とんどスポロシトよりなる[比較例1で使用]。
このスポロシストに5%鶏胆汁および0.25%トリ
プシンPBS(−)溶液を加え、そして40℃の温浴
中でおよそ1.5時間消化せしめる。得られた消化
液を遠心分離して沈澱を集め、そしてこの沈澱を
PBS(−)溶液で洗浄する。 このものはほとんどスポロゾイトよりなる(本
発明試料として使用)。 上記の結果を下記の表1に示す。表1中の評価
は下記により行つた。 [評価方法] 腸下部病変カタール性浸出物 :重度 :中程度 +:軽度 ⊥:極軽度 −:なし 糞中のオーシスト数 糞1g中のオーシスト数を表す。
【表】 実施例 2 鶏の初生雛(実施例1で用いたものと同じ鶏
種)10羽の肛門に下記に示すアイメリア・ネカト
リツクスの試料を1羽当り1滴(スポロゾイトと
して1万個)をたらした〔本発明、比較例1,
2,3および4〕。またはオーシストを初生雛に
経口接種した〔比較例(5)〕。 次いで、この鶏に21日令において1羽当り5万
個のアイメリア・ネカトリツクスの成熟オーシス
トを経口投与してコクシジウム症に感染させた。
感染後6日目に小腸病変出血および斃死率につい
て観察した。 試料及び接種方法 本発明:アイメリア・ネカトリツクスのスポロ
ゾイト330000個をPBS(−)溶液1ml中に懸濁せ
しめたもの。 比較例(1):アイメリア・ネカトリツクスのスポロ
シスト165000個(スポロゾイトとして330000個)
をPBS(−)溶液1ml中に懸濁せしめたもの。 比較例(2):アイメリア・ネカトリツクスのオーシ
スト41250個(スポロゾイトとして330000個)を
PBS(−)溶液1ml中に懸濁せしめたもの。 比較例(3):本発明の試料を60℃において30分間加
熱したもの。 比較例(4):アイメリア・ネカトリツクスのスポロ
ゾイト330000個を10%ホルマリン溶液に入れ30分
間放置し、次いでこの溶液を遠心分離し、沈澱を
PBS(−)溶液1ml中に懸濁せしめたもの。 比較例(5):鶏1羽当りアイメリア・ネカトリツク
スのオーシスト1250個を経口接種する。 試料に用いたオーシスト、スポロシストおよび
スポロゾイトの調製法は実施例1のアイメリア・
ブルネテイをアイメリア・ネカトリツクスに置き
かえ且つ、消化時間を1時間とした以外は同様の
方法で行つた。 上記の結果を下記の表2に示す。表2中の小腸
病変出血の評価は実施例1における腸下部病変カ
タール性浸出物の評価程度に準じて行つた。 表 2 小腸病変出血 斃死率(%) 本発明 − 0 比較例(1) 80 比較例(2) 90 比較例(3) 80 比較例(4) 30 比較例(5) 90 実施例3 七面鳥の初生雛10羽の肛門に下記に示す試料を
1羽当り1滴(スポロゾイトとして1万個)をた
らした〔本発明、比較例1,2,3および4〕。
またオーシストを初生雛10羽に経口接種した〔比
較例5〕。これらの七面鳥に21日令において1羽
当り20万個のアイメリア・メレアグリミテイスを
主体としてアイメリア・アデノイデスおよびアイ
メリア・ガルパボニスの成熟オーシストを含くむ
計20万個を経口投与して攻撃した。対照は試料を
接種せずに攻撃のみを行つた。感染7日目に十二
指腸病変、血便の有無および斃死率について観察
した。結果は表3に示す。なお評価は以下の方法
に従つて行つた。 試料及び接種方法 本発明:アイメリア・メレアグリミテイスを主
体としてアイメリア・アデノイデスおよびアイメ
リア・ガルパボニスのスポロゾイトを含む計
330000個をPBS(−)溶液1ml中に懸濁せしめた
もの。 比較例(1):アイメリア・メレアグリミテイスを主
体としてアイメリア・アデノイデスおよびアイメ
リア・ガルパボニスのスポロシストを含む計
165000個(スポロゾイトとして330000個)を
PBS(−)溶液1ml中に懸濁せしめたもの。 比較例(2):アイメリア・メレアグリミテイスを主
体としてアイメリア・アデノイデスおよびアイメ
リア・ガルパボニスのオーシストを含む41250個
(スポロゾイトとして330000個)をPBS(−)溶
液1ml中に懸濁せしめたもの。 比較例(3):本発明の試料を60℃において30分間加
熱したもの。 比較例(4):アイメリア・メレアグリミテイスを主
体としてアイメリア・アデノイデスおよびアイメ
リア・ガルパボニスのスポロゾイトを含む330000
個を10%ホルマリン溶液に入れ30分間放置し、次
いでこの溶液を遠心分離し、沈澱をPBS(−)溶
液1ml中に懸濁せしめたもの。 比較例(5):アイメリア・メレアグリミテイスを主
体としてアイメリア・アデノイデスおよびアイメ
リア・ガルパボニスのオーシストを含む41250個
(スポロゾイトとして33000個)をPBS(−)溶液
1ml中に懸濁せしめたものを1羽当り1滴(約
0.03ml)経口接種する。 試料に用いたオーシスト、スポロシストおよび
スポロゾイトの調製法は実施例1に準じて行なつ
た。ただし実施例1における鶏の代わりに七面鳥
を用い、アイメリア・テネラの代わりにアイメリ
ア・メレアグリミテイス、アイメリア・アデノイ
デスおよびアイメリア・ガルパボニスを用い、オ
ーシストの集収部位を小腸管壁と小腸内容物と
し、鶏胆汁の代わりに七面鳥胆汁を用い、そして
消化時間を約1時間とした。 評価方法 十二指腸病変:十二指腸の出血の程度および炎症
の強さの程度を下記の尺度により示す。 :重度 :中等度 +:軽度 ⊥:極軽度 −:なし 血便:程度は十二指腸病変に準ずる。
【表】 実施例4 うずらの初生雛10羽の肛門に下記に示す試料を
1羽当り1滴(スポロゾイトとして1万個)をた
らした〔本発明1、比較例1,2,3および4〕。
またオーシストを初生雛10羽に経口接種した〔比
較例5〕。 試料及び接種方法 本発明:アイメリア・ツノダイのスポロゾイト
330000個をPBS(−)溶液1ml中に懸濁せしめた
もの。 比較例(1):アイメリア・ツノダイのスポロシスト
165000個(スポロゾイトとして330000個)を
PBS(−)溶液1ml中に懸濁せしめたもの。 比較例(2):アイメリア・ツノダイのオーシスト
41250個(スポロゾイトとして330000個)をPBS
(−)溶液1ml中に懸濁せしめたもの。 比較例(3):本発明の試料を60℃において30分間加
熱したもの。 比較例(4):アイメリア・ツノダイのスポロゾイト
330000個を10%ホルマリン溶液に入れ30分間放置
し、次いでこの溶液を遠心分離し、沈澱をPBS
(−)溶液1ml中に懸濁せしめたもの。 試料に用いたオーシスト、スポロシストおよび
スポロゾイトの調製法は実施例1に準じて行つ
た。ただし実施例1における鶏の代わりにうずら
を用いアイメリア・ブルネツテイの代わりにアイ
メリア・ツノダイを用い、そして鶏胆汁の代わり
にうずら胆汁を用いた。 上記の結果を下記の表4に示す。表4中の盲腸
病変出血の評価は実施例1における腸下部病変カ
タール性浸出物の評価程度に準じて行つた。 表 4 盲腸病変出血 斃死率(%) 本発明 − 0 比較例(1) 90 比較例(2) 90 比較例(3) 80 比較例(4) + 30 比較例(5) 90

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 1 アイメリア・テネラを除く家禽類のコクシジ
    ウム原虫のスポロゾイトを活性成分とする抗コク
    シジウム剤。 2 アイメリア・テネラを除く家禽類のコクシジ
    ウム原虫のスポロゾイトを活性成分とする抗コク
    シジウム剤を家禽類の総排泄腔に接種することを
    特徴とする家禽類のコクシジウム症の予防法。
JP4607281A 1981-03-27 1981-03-27 Coccidiostatic Granted JPS57159719A (en)

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