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JPH0343253B2 - - Google Patents
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JPH0343253B2 - - Google Patents

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JPH0343253B2
JPH0343253B2 JP10287690A JP10287690A JPH0343253B2 JP H0343253 B2 JPH0343253 B2 JP H0343253B2 JP 10287690 A JP10287690 A JP 10287690A JP 10287690 A JP10287690 A JP 10287690A JP H0343253 B2 JPH0343253 B2 JP H0343253B2
Authority
JP
Japan
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sporozoites
oocysts
formalin
eimeria
coccidiosis
Prior art date
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JP10287690A
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Kenji Shibata
Masami Kojima
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Nisshin Seifun Group Inc
Original Assignee
Nisshin Seifun Group Inc
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Publication date
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  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Description

【発明の詳細な説明】
[産業上の利用分野] 本発明は家禽類の抗コクシジウム症を免疫的に
予防し得る抗コクシジウム剤および該抗コクシジ
ウム剤の接種方法に関する。 [従来の技術] 家禽類、すなわち鶏、七面鳥、うずら、ほろほ
ろ鳥などのコクシジウム症はある種の寄生性原虫
の感染により起きる伝染病で世界各国に広く分布
している。コクシジウム症は例えば鶏ではアイメ
リア・テネラ(Eimeria tenella)、アイイメリ
ア・アセルブリナ(E.acervulina)、アイメリ
ア・ネカトリツクス(E.necatrix)、アイメリ
ア・ブルネツテイ(E.brunetti)、アイメリア・
マキシマ(E.maxima)などにより、七面鳥では
アイメリア・メレアグリミテイス(E.
meleagrimitis)、アイメリア・アデノイデス(E.
adenoides)、アイメリア・ガロパボニス(E.
gallopovonis)などにより、うずらではアイメリ
ア・ウズラ(E.uzura)、アイメリア・ツノダイ
(E.tsunodai)などにより、そしてほろほろ鳥で
はアイメリア・グレニエリ(E.grenieri)、アイ
メリア・ヌミダエ(E.numidae)などによりひき
おこされることが知られている。これに感染した
動物は下痢、血便等の症状を呈し、治療が遅れた
場合または症状が重い場合は斃死することも多
く、そして斃死に至らなくても発育が阻害され
る。そのためにコクシジウム症は家禽飼育業者に
とつては最も被害の大きい疾病の一つとされてき
た。 従来、かかるコクシジウム症の予防としてワク
チンを含めて薬剤の経口投与が行われている。コ
クシジウム症のワクチン(主に鶏について行われ
ている)はコクシジウム症を起こしやすい数種類
のオーシストの混合液であり、このものを家禽に
経口投与するものである。しかしながら、こうし
た薬剤の投与による予防法には、薬剤の耐性獲得
による効果の減退等の問題があり、またワクチン
による予防法は投与量によつては副作用が発現す
る可能性があつた。 [発明の内容] 本発明者らは前記問題を解決すべく研究を行つ
てきた。その結果、家禽類のコクシジウム原虫の
発育環の一つであるスポロゾイトのホルマリン処
理物が有効であること、しかもそれを家禽類の総
排泄腔に接種するとより予防効果が高いことを見
出した。 したがつて、本発明は、ホルマリン処
理した家禽類のコクシジウム原虫のスポロゾイト
を活性成分とする抗コクシジウム剤である。 更に、本発明は、該ホルマリン処理したスポロ
ゾイトを活性成分とする抗コクシジウム剤を家禽
類の総排泄腔に接種することを特徴とする家禽類
のコクシジウム症の予防法を包含する。 コクシジウム原虫のスポロゾイトはコクシジウ
ム原虫の発育環の一形態であり、本発明の抗コク
シジウム剤はかかるスポロゾイトをホルマリンで
処理したものを活性成分としている。 ワクチン等の製造時には、病原性微生物の活性
を弱めたり、不活化することを目的としてホルマ
リンによる処理が広く行われているが、本発明に
おけるスポロゾイトのホルマリン処理も上記のよ
うな病原性微生物のホルマリン処理で一般に採用
されているのと同様の条件下で行うことができ、
通常、濃度約0.05〜15%のホルマリン水溶液を用
いて、約0〜40℃の温度で処理するのがよい。処
理時間は、ホルマリン溶液の濃度や処理温度によ
り異なつてくるが、通常約15分間〜7日行うのが
よい。この場合に、ホルマリン処理されるスポロ
ゾイトは、場合によりスポロシスト、オーシスト
またはそれらの皮膜を含んでいてもよい。 以下に、スポロゾイトのホルマリン処理物の調
製法の例を示す。 コクシジウム症に感染した家禽類の糞、腸管壁
および腸管内容物から分離したコクシジウム原虫
の成熟オーシストの皮膜を磨砕してスポロシスト
を得る。次いでこのスポロシストに家禽類の胆汁
およびトリプシンを作用させて主としてスポロゾ
イトを含む生成物を得る。この生成物を直接また
はそこからスポロゾイトを単離し、それをホルマ
リン水溶液中に入れて一定時間放置した後、遠心
分離を行つて沈澱物をホルマリン処理したスポロ
ゾイトとして回収する。 上記のようにして調製したホルマリン処理した
スポロゾイトは、水、生理食塩水、緩衝液等に懸
濁した懸濁液の形態で接種しても、または固形状
に加工して接種してもよい。懸濁液の場合は付着
性や粘稠性を与えるような加工を行つてもよい。 本発明の抗コクシジウム剤の接種部位としては
口腔、筋肉および総排泄腔が挙げられるが、特に
総排泄腔に接種するのが好ましい。総排泄腔接種
の具体的な方法としては、家禽類の肛門にたらす
か、注入、挿入、スプレー等の方法が挙げられ
る。ホルマリン処理したスポロゾイトの接種量は
1羽当り約500個以上がよい。 本発明の抗コクシジウム剤を用いると副作用を
起こすことな家禽類のコクシジウム症を有効に防
止することができ、またコクシジウム症に感染し
た場合にはその症状を軽くすることができる。ま
た本発明の抗コクシジウム剤は他の家禽類の予防
及び治療剤、例えばニユーカツスル病ワクチン、
伝染性コリーザ治療剤等と併用または同時適用し
てもよい。更にコクシジウム症感染防止効果も例
えば初生雛に本発明の抗コクシジウム剤を接種し
た場合、75週以上の長期に亘つて有効である。 次に実施例により本発明を具体的に説明する
が、それにより限定されない。 実施例 1 鶏の初生雛(ブロイラー専用種ハバード)10羽
の肛門に下記に示す各試料を1羽当り1滴(ホル
マリン処理したスポロゾイトとして1万個)たら
す。次いでこの鶏に21曰令において1羽当り20万
個のアイメリア・テネラの成熟オーシストを経口
投与してコクシジウム症に感染させる。比較例は
試料を接種せずに感染のみを行つたものである。
また、対照はアイメリア・テネラのオーシストを
初生雛(ブロイラー専用種ハバード)10羽の肛門
に下記の試料(対照試料)を1羽当り1滴たら
し、21日令において1羽当り20万個のアイメリ
ア・テネラの成熟オーシストを経口投与してコク
シジウム症に感染させたものである。感染後8日
後に盲腸病変、糞中のオーシスト数、血便の有無
および斃死率について観察した。結果は表1に示
すとおりであつた。なお、評価は後記の方法にし
たがつて行つた。 本発明試料:アイメリア・テネラのスポロゾイト
330000個を10%ホルマリン水溶液に入れて4℃
で30分間放置し、次いでこの溶液を遠心分離し
て沈澱をPBS(−)溶液1ml中に懸濁せしめた
もの。 対照試料:アイメリア・テネラのオーシスト
41250個(スポロゾイトとして330000個)を
PBS(−)溶液1ml中に懸濁せしめたもの。 試料に用いたオーシストおよびホルマリン処理
する前のスポロゾイトの調製は、「J.Protozool.」
第9巻(2)154〜161頁(1962)に記載されている方
法に基づいて以下のように行つた。 アイメリア・テネラの成熟オーシストを経口投
与した鶏の糞、盲腸壁および盲腸内容物を集め、
3%重クロム酸ガリウム溶液に浮遊せしめ、そし
て28℃において2日間培養した。得られた成熟オ
ーシストを含む溶液を遠心分離(3000rpm、10分
間)し、そして沈澱を集める。次にこの沈澱を水
で洗浄し且つ飽和食塩水を添加する。この溶液を
遠心分離(3000rpm、10分間)し、上澄みを採
り、この上澄みを水で希釈し、希釈液を更に遠心
分離(1000rpm、3分間)し、そして沈澱を集め
る。この沈澱はほとんどオーシストのみよりなる
[対照試料で使用]。前記オーシストに水および5
%次亜塩素酸ナトリウム液を加え且つ15分間放置
した後、遠心分離(2000rpm、3分間)を行う。
得られた沈澱を水で洗浄し、次いでホモジナイザ
ーで磨砕する。この摩砕物はほとんどスポロシス
トよりなる。このスポロシストに5%鶏胆汁およ
び0.25%トリプシンPBS(−)溶液を加え、そし
て40℃の温浴中でおよそ1.5時間消化せしめる。
得られた消化液を遠心分離して沈澱を集め、そし
てこの沈澱をPBS(−)溶液で洗浄する。このも
のはほとんどスポロゾイトよりなる(本発明試料
はこのようにして得られたスポロゾイトを上記に
よりホルマリン処理したものである)。 上記の結果を下記の表1に示す。 [評価方法] 盲腸病変 盲腸の萎縮および出血の程度および炎症滲出物
の量の程度を次の尺度により示す。 :重度 :中程度 +:軽度 ⊥:極軽度 −:なし 血 液 程度は盲腸病変に準ずる。 糞中のオーシスト数 糞1g中のオーシストの数を表す。
【表】 実施例 2 鶏の初生雛(実施例1で用いたのと同じ鶏種)
10羽の肛門に下記に示すアイメリア・ブルネツテ
イの試料を1羽当り1滴(ホルマリン処理したス
ポロゾイトとして1万個)たらす。次いでこの鶏
に21日令において1羽当り20万個のアイメリア・
ブルネツテイの成熟オーシストを経口投与してコ
クシジウム症に感染させる。比較例は試料を接種
せずに感染のみを行つたものである。また、対照
はアイメリア・ブルネツテイのオーシストを初生
雛(実施例1で用いたのと同じ鶏種)10羽の肛門
に下記の試料(対照試料)を1羽当り1滴たら
し、21日令において1羽当り20万個のアイメリ
ア・ブルネツテイの成熟オーシストを経口投与し
てコクシジウム症に感染させたものである。感染
後7日目に腸下部病変カタール性滲出物について
観察し、さらに糞中のオーシストの数を数えた。
結果は表2に示すとおりであつた。なお、腸下部
病変カタール性滲出物程度は実施例1における盲
腸病変に準じて評価し、糞中のオーシスト数は実
施例1と同様にして数えた。 本発明試料:アイメリア・ブルネツテイのスポロ
ゾイト330000個を10%ホルマリン水溶液に入れ
て4℃で30分間放置し、次いでこの溶液を遠心
分離して沈澱をPBS(−)溶液1ml中に懸濁せ
しめたもの。 対照試料:アイメリア・ブルネツテイのオーシス
ト41250個(スポロゾイトとして330000個)を
PBS(−)溶液1ml中に懸濁せしめたもの。
【表】 実施例 3 鶏の初生雛(実施例1で用いたのと同じ雛種)
10羽の肛門に下記に示すアイメリア・ネカトリツ
クスの試料を1羽当り1滴(ホルマリン処理した
スポロゾイトとして1万個)たらす。次いでこの
鶏に21日令において1羽当り20万個のアイメリ
ア・ネカトリツクスの成熟オーシストを経口投与
してコクシジウム症に感染させる。比較例は試料
を接種せずに感染のみを行つたものである。ま
た、対照はアイメリア・ネカトリツクスのオーシ
ストを初生雛(実施例1で用いたのと同じ鶏種)
10羽の肛門に下記の試料(対照試料)を1羽当り
1滴たらし、21日令において1羽当り20万個のア
イメリア・ブルネツテイの成熟オーシストを経口
投与してコクシジウム症に感染させたものであ
る。感染後6日目に小腸病変出血について観察
し、さらに斃死率を求めた。結果は表3に示すと
おりであつた。なお、小腸病変出血の程度は実施
例1における盲腸病変に準じて評価した。 本発明試料:アイメリア・ネカトリツクスのスポ
ロゾイト330000個を10%ホルマリン水溶液に入
れて25℃で30分間放置し、次いでこの溶液を遠
心分離して沈澱をPBS(−)溶液1ml中に懸濁
せしめたもの。 対照試料:アイメリア・ネカトリツクスのオーシ
スト41250個(スポロゾイトとして330000個)
をPBS(−)溶液1ml中に懸濁せしめたもの。 [表3] 小腸病変出血 斃死率(%) 比較例 90 本発明 + 30 対照例 90 実施例 4 うずらの初生雛10羽の肛門に下記に示す試料を
1羽当り1滴(ホルマリン処理したスポロゾイト
として1万個)たらす。次いでこれらのうずらに
21日令において1羽当り20万個のアイメリア・ツ
ノダイの成熟オーシストを経口投与してコクシジ
ウム症に感染させた。比較例は試料を接種せずに
感染のみを行つたものである。また、対照はアイ
メリア・ツノダイのオーシストをうずらの初生雛
10羽の肛門に下記の試料(対照試料)を1羽当り
1滴たらし、21日令において1羽当り20万個のア
イメリア・ブルネツテイの成熟オーシストを経口
投与してコクシジウム症に感染させたものであ
る。感染後7日目に盲腸病変出血および斃死率に
ついて観察した。結果は表4に示すとおりであつ
た。なお、評価の程度は実施例1における盲腸病
変に準じて行つた。 本発明試料:アイメリア・ツノダイのスポロゾイ
ト330000個を10%ホルマリン水溶液に入れて15
℃で30分間放置し、次いでこの溶液を遠心分離
して沈澱をPBS(−)溶液1ml中に懸濁せしめ
たもの。 対照試料:アイメリア・ツノダイのオーシスト
41250個(スポロゾイトとして330000個)を
PBS(−)溶液1ml中に懸濁せしめたもの。 [表4] 盲腸病変出血 斃死率(%) 比較例 90 本発明 + 30 対照例 90

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 1 ホルマリン処理した家禽類のコクシジウム原
    虫のスポロゾイトを活性成分とする抗コクシジウ
    ム剤。 2 ホルマリン処理した家禽類のコクシジウム原
    虫のスポロゾイトを活性成分とする抗コクシジウ
    ム剤を家禽類の総排泄腔に接種することを特徴と
    する家禽類のコクシジウム症の予防法。
JP10287690A 1990-04-20 1990-04-20 抗コクシジウム剤 Granted JPH02288835A (ja)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP10287690A JPH02288835A (ja) 1990-04-20 1990-04-20 抗コクシジウム剤

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JP10287690A JPH02288835A (ja) 1990-04-20 1990-04-20 抗コクシジウム剤

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JP4607281A Division JPS57159719A (en) 1981-03-27 1981-03-27 Coccidiostatic

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JPH02288835A JPH02288835A (ja) 1990-11-28
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