JPH03852B2

JPH03852B2 -

Info

Publication number: JPH03852B2
Application number: JP58203683A
Authority: JP
Inventors: Fujio Nakagame; Haruo Pponda; Tetsupei Maruyama; Noriko Saito; Tomoaki Kimoto
Original assignee: Terumo Corp
Current assignee: Terumo Corp
Priority date: 1983-11-01
Filing date: 1983-11-01
Publication date: 1991-01-09
Also published as: JPS6097917A

Description

【発明の詳細な説明】発明の背景技術分野本発明は新規な腸管吸収性ウロキナーゼ組成物
に関する。

さらに詳しくは、ウロキナーゼ、高級脂肪酸、
ポリアルキレングリコールおよびカルシウム塩を
含有する腸管吸収性ウロキナーゼ組成物に関する
ものである。

ウロキナーゼはフイブリンおよび血栓の溶解酵
素であり、臨床上、血栓溶解剤として脳血管閉
塞、心筋梗塞、肺栓塞等各種の血栓症の治療に使
用されており、また、制ガン剤との併用療法にも
用いられている。

先行技術および問題点ウロキナーゼは経口投与すると胃で分解失活さ
れ、腸管からの吸収が悪いため、従来は静脈内も
しくは皮下注射または静脈内点滴注射により投与
されている。これらの投与方法によれば、ウロキ
ナーゼを分解失活することなく投与することがで
きるが、投与の度に医師の手を煩わせなければな
らず、また患者に苦痛を与える欠点がある。

さらにウロキナーゼは血中半減期がわずか約15
分と短いため、上記従来の投与方法でウロキナー
ゼの血中濃度を一定の水準に保つことは困難であ
り、薬効の持続性に欠けていた。

発明の目的本発明は腸管からの吸収性が優れた腸管吸収性
ウロキナーゼ組成物を提供することを目的とす
る。

さらに本発明は、吸収が徐々に行なわれ、薬効
が持続する腸管吸収性ウロキナーゼ組成物を提供
することを目的とする。

上記目的を達成するために、本発明は下記の腸
管吸収性ウロキナーゼ組成物からなる。

(1) ウロキナーゼ、高級脂肪酸、ポリアルキレン
グリコールおよびカルシウム塩を含有する腸管
吸収性ウロキナーゼ組成物。

(2) 前記高級脂肪酸が炭素原子10〜20個を有する
高級脂肪酸である第１項記載の腸管吸収性ウロ
キナーゼ組成物。

(3) 前記高級脂肪酸が１〜４個の二重結合を有す
る炭素原子数18〜20の不飽和高級脂肪酸である
第２項記載の腸管吸収性ウロキナーゼ組成物。

(4) 前記不飽和高級脂肪酸がオレイン酸である第
３項記載の腸管吸収性ウロキナーゼ組成物。

(5) 前記ポリアルキレングリコールがポリエチレ
ングリコールである第１項記載の腸管吸収性ウ
ロキナーゼ組成物。

(6) 前記ウロキナーゼがウロキナーゼ保持リポソ
ーム製剤である第１項記載の腸管吸収性ウロキ
ナーゼ組成物。

(7) 前記ウロキナーゼ保持リポソーム製剤が水素
添加レシチンを膜材とするリポソーム製剤であ
る第６項記載の腸管吸収性ウロキナーゼ組成
物。

(8) 前記ウロキナーゼ100単位に対し、前記高級
脂肪酸0.01〜２mg、前記ポリアルキレングリコ
ール0.01〜５mgおよび前記カルシウム塩0.0001
〜0.1mgを含有する第１項記載の腸管吸収性ウ
ロキナーゼ組成物。

発明の具体的説明ウロキナーゼは、前述したように経口投与した
場合には胃で分解失活され、また腸溶剤等の手段
により胃での分解失活を防いだとしても腸管から
の吸収効率が悪い。

そこで本発明者等は鋭意研究した結果、ウロキ
ナーゼに高級脂肪酸、ポリアルキレングリコー
ル、カルシウム塩を配合すると意外にも経口投与
によつて腸管からウロキナーゼが効率良く吸収さ
れ、しかも長時間にわたつて高い血中濃度を示す
ことを知り本発明を完成した。

従つて本発明は、ウロキナーゼ、高級脂肪酸、
ポリアルキレングリコールおよびカルシウム塩を
含有する腸管吸収性ウロキナーゼ組成物からな
る。

本発明において使用されるウロキナーゼは、医
薬として投与可能なものである限り何ら限定され
ない。通常分子量25000〜60000の人由来のウロキ
ナーゼが使用される。

本発明の組成物において、ウロキナーゼは、そ
れ自体の形態で含有されることもでき、また、ウ
ロキナーゼが脂肪小体（リポソーム）の空隙内に
取りこまれたウロキナーゼ保持リポソーム製剤の
形態で含有されることもできる。リポソーム製剤
の形態でウロキナーゼを本発明の組成物に含有さ
せる場合には、リポソームの膜材（脂質）として
水素添加レシチンを用いると、より一層腸管にお
けるウロキナーゼの吸収が徐々に行なわれ、優れ
た薬効の持続化を図ることができる。

本発明のウロキナーゼ保持リポソーム製剤はそ
れ自体公知の方法によつて製造される。例えば、
水素添加レシチンおよび所望によりステロール、
負電荷を与える物質をクロロホルム、エタノール
等の適当な溶媒に溶解し、得られた溶液から溶媒
を留去して水素添加レシチンの膜を調製する。得
られた膜をクロロホルム、エーテル等の適当な溶
媒に溶解し、この溶液にウロキナーゼの水溶液を
加え得られた混合液を激しく振盪し、好ましくは
超音波処理を行ない薬物水溶液を均一に分散させ
る。分散液から溶媒を留去してウロキナーゼ保持
リポソーム製剤を得る。かくして得られたリポソ
ームは必要により生理的に許容される水溶液例え
ば生理食塩水で洗浄した後、ペレツト、顆粒また
は粉末に成形される。

本発明における高級脂肪酸としては炭素原子10
〜20個を有する高級脂肪酸が望ましく、その例と
して、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、
パルミチン酸、ステアリン酸、アラキドン酸、オ
レイン酸、リノール酸リノレン酸等があげられ
る。特に１〜４個の二重結合を有する炭素原子数
18乃至20の不飽和高級脂肪酸、例えばオレイン
酸、リノール酸、リノレン酸、アラキドン酸が好
ましく、オレイン酸が最も好ましい。

本発明におけるポリアルキレングリコールの例
としてはポリエチレングリコール、ポリプロピレ
ングリコールがあげられる。ポリアルキレングリ
コールの重合度は５〜500が好ましく、重合度160
〜200のポリエチレングリコールが特に好適であ
る。

本発明におけるカルシウム塩は医薬製剤組成分
として投与可能な化合物の形態で使用される。例
えば塩化カルシウム、乳酸カルシウム、リン酸カ
ルシウムまたはグルコン酸カルシウムの形態で本
発明の組成物に含有せしめる。

本発明の組成物において、ウロキナーゼ、高級
脂肪酸、ポリアルキレングリコールおよびカルシ
ウム塩の配合割合は臨界的ではないがウロキナー
ゼ100単位に対して高級脂肪酸0.01〜２mg、特に
好ましくは0.05〜0.5mg、ポリアルキレングリコ
ール0.01〜５mg、特に好ましくは0.1〜１mg、カ
ルシウム塩0.0001〜0.1mg、特に好ましくは0.0005
〜0.005mgである。

本発明の組成物は常法に従つて経口または直腸
投与用に製剤化される。即ち、必要により炭酸カ
ルシウム、リン酸カルシウム、タルク、乳糖、デ
キストリン、でんぷんのような賦形剤、アラビア
ゴム、トラガント末のような結合剤、ラノリン、
ココナツト油等を加えて錠剤、カプセル剤または
坐剤とする。尚ウロキナーゼは胃液によつて分解
失活するので常法に従つて上記錠剤またはカプセ
ル腸溶皮例えばヒドロキシプロピルメチルセルロ
ースフタレートの膜を施すのが望ましい。

１錠（カプセル、坐剤）中のウロキナーゼの含
量は、ウロキナーゼの投与量によつて適宜選択さ
れる。例えば、血栓治療のためには１日に少なく
とも10万〜50万単位投与されるので１錠（カプセ
ル、坐剤）中にウロキナーゼ３万〜12万単位を含
有させるのが望ましい。

次に実施例および試験例を示して本発明をさら
に詳しく説明する。

実施例１ (1) ウロキナーゼ保持リポソーム粉末の調製水素
添加レシチン、コレステロールおよびジセチル
ホスフエートを７：７：１のモル比で混合し、
その50.6mgをクロロホルム15mlに溶解した溶液
を50mlのナス型フラスコに入れる。ロータリー
エバポレーターを用いて溶媒を留去し、フラス
コ内壁に薄膜を形成させる。次いでクロロホル
ム：イソプロピルエーテル＝１：１（容量比）
の混合溶媒６mlを加え薄膜を溶解したのち、ウ
ロキナーゼ18万単位を含有するリン酸緩衝液
（PH7.2，0.1M）１mlを加える。得られた混合
液を水浴型超音波洗浄機の中で４℃の温度にお
いて５分間超音波処理することによつて均一に
分散させる。この分散液を40℃の温度において
ロータリーエバポレーターを用いてゲルが生成
するまで溶媒を留去する。このゲルに生理食塩
水を５ml加え撹拌したのち、溶媒留去を更に10
分間継続し、リポソーム懸濁液を得る。この懸
濁液を100000Gで60分間遠心し、２度生理食塩
水で洗浄する。得られたペレツトを生理食塩水
に懸濁させ除菌処理を行ない薬物保持リポソー
ムを得る。このウロキナーゼ保持リポソームを
凍結乾燥し、粉末ウロキナーゼ保持リポソーム
を得る。

(2) オレイン酸35mgを硬化ヒマシ油水溶液の中に
懸濁し、これにポリエチレングリコール−6000
100mgおよび塩化カルシウム0.7mgを加えて溶解
させ、凍結乾燥して粉末化する。かくして得ら
れた粉末を上記１で調製したウロキナーゼ保持
リポソーム粉末とを混合して本発明の組成物を
得る。これに適量のポリエチレングリコール、
デキストリンを加えたものをゼラチンカプセル
に充填し、このカプセル剤に腸溶皮を施してウ
ロキナーゼカプセル剤とする。

実施例２実施例１(1)に準じて調製したウロキナーゼ保持
リポソーム粉末（６万単位含有）とオレイン酸35
mg、ポリエチレングリコール−6000 100mgおよび
塩化カルシウム0.7mgからなる粉末とを混合して
本発明の組成物を得る。これに適当量のデンプ
ン、乳糖、アラビアゴムを加えたものを打錠し、
この錠剤に腸溶皮を施してウロキナーゼ錠剤とす
る。

実施例３ウロキナーゼ60000単位を含む水溶液10mlにポ
リエチレングリコール−6000 50mgを加え、撹拌
溶解後凍結乾燥し、これにオレイン酸35mg、ポリ
エチレングリコール−6000 50mgおよび塩化カル
シウム0.7mgからなる粉末を混合しこれに適当量
のポリエチレングリコール、デキストリンを加え
たものをゼラチンカプセルに充填し、このカプセ
ル剤に腸溶皮を施してウロキナーゼカプセル剤と
する。

試験例１経胃投与による吸収試験実施例１に準じて調製された本発明のウロキナ
ーゼカプセル剤（10000単位、以下カカプセル剤
という）、実施例３に準じて調製された本発明の
ウロキナーゼカプセル剤（10000単位、以下カプ
セル剤２という）および高級脂肪酸、ポリアルキ
レングリコール、カルシウム塩を含まないウロキ
ナーゼ単味の対照用カプセル剤（10000単位、以
下カプセル剤３という）をそれぞれ体重200〜250
ｇのウイスター系雄性ラツトの胃内へ投与し、所
定の時間毎に採血して血中ウロキナーゼ濃度を合
成基質Ｓ−2444を用いて測定した。結果を第１図
にグラフで示す。

第１図において、●印線はカプセル剤を投与し
た場合（10例の平均）、▲印線はカプセル剤２を
投与した場合（10例の平均）、〇印線はカプセル
剤３を投与した場合（10例の平均）の血漿中ウロ
キナーゼ活性（I.U.／ml）をそれぞれ示す。

第１図に示すように、カプセル剤およびカプセ
ル剤２共に投与後１時間位で急速に血中濃度が上
昇し、６時間以上その血中濃度が持続した。これ
に対しカプセル剤３投与のものは１時間位で急速
に血中濃度が上昇するが、すみやかに減少してし
まい持続性が認められなかつた。

試験例２経腸投与による吸収試験実施例１に準じて調製された本発明のウロキナ
ーゼカプセル剤（30000単位、以下カカプセル剤
４という）、実施例３に準じて調製された本発明
のウロキナーゼカプセル剤（30000単位、以下カ
プセル剤５という）および高級脂肪酸、ポリアル
キレングリコール、カルシウム塩を含まないウロ
キナーゼ単味の対照用カプセル剤（30000単位、
以下カプセル剤６という）をそれぞれ体重９〜13
Kgの健康なビーグル犬（７〜８ケ月令）に経腸投
与し、所定の時間毎に採血し、血中α₂−PI（α₂−
プラスミンインヒビター）活性をを合成基質Ｓ−
2251を用いて測定した。結果を第２図にグラフで
示す。

第２図において、●印線はカプセル剤４を投与
した場合（10例の平均）、▲印線はカプセル剤５
を投与した場合（10例の平均）、〇印線はカプセ
ル剤６を投与した場合（10例の平均）の血漿中の
α₂−PI活性（％）をそれぞれ示す。

第２図に示すように、カプセル剤４の場合は投
与後30分位で急速にα₂−PI活性が低下し、約10
時間持続した。またカプセル剤５の場合も同様に
投与後急速にα₂−PI活性が低下し、約６時間持
続した。これに対し、カプセル剤６の場合は、投
与後30分位で急速にα₂−PI活性が低下するがす
みやかに投与前の状態にもどつてしまい持続性に
欠けた。

上記試験例１および２から明らかなように、本
発明のウロキナーゼ組成物は、ウロキナーゼ単独
の場合にくらべ、吸収効率が増大し、かつ薬効が
持続する。

発明の作用効果本発明によれば、経腸投与可能なウロキナーゼ
組成物が提供される。ウロキナーゼは単独では腸
管から殆んど吸収されないが上述した如く、ウロ
キナーゼに高級脂肪酸、ポリアルキレングリコー
ルおよびカルシウム塩を酸合することにより、ウ
ロキナーゼの腸管からの吸収が著しく高められ
る。さらに本発明によれば、ウロキナーゼの薬効
が持続するウロキナーゼ組成物が提供される。ウ
ロキナーゼは血液中において速やかに分解される
ため従来の投与方法ではその薬効を長時間持続さ
せることは困難である。

しかるに本発明の組成物においてはウロキナー
ゼは腸管から徐々に吸収されるため、血液のウロ
キナーゼ濃度を長時間にわたつて高く維持するこ
とができ、薬効の持続化が達成される。特にウロ
キナーゼとしてウロキナーゼ保持リポソーム製剤
を使用する場合は、薬効の持続化が一層強められ
る。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明組成物および対照組成物を経胃
投与した場合の血漿中ウロキナーゼ活性（I.U.／
ml）を示すグラフである。第２図は本発明組成物
および対照組成物を経胃投与した場合の血漿中α₂
−PI活性（％）を示すグラフである。

Claims

【特許請求の範囲】１ウロキナーゼ、高級脂肪酸、ポリアルキレン
グリコールおよびカルシウム塩を含有する腸管吸
収性ウロキナーゼ組成物。２前記高級脂肪酸が炭素原子10〜20個を有する
高級脂肪酸である特許請求の範囲第１項記載の腸
管吸収性ウロキナーゼ組成物。３前記高級脂肪酸が１〜４個の二重結合を有す
る炭素原子数18〜20の不飽和高級脂肪酸である特
許請求の範囲第２項記載の腸管吸収性ウロキナー
ゼ組成物。４前記不飽和高級脂肪酸がオレイン酸である特
許請求の範囲第３項記載の腸管吸収性ウロキナー
ゼ組成物。５前記ポリアルキレングリコールがポリエチレ
ングリコールである特許請求の範囲第１項記載の
腸管吸収性ウロキナーゼ組成物。６前記ウロキナーゼがウロキナーゼ保持リポソ
ーム製剤である特許請求の範囲第１項記載の腸管
吸収性ウロキナーゼ組成物。７前記ウロキナーゼ保持リポソーム製剤が水素
添加レシチンを膜材とするリポソーム製剤である
特許請求の範囲第６項記載の腸管吸収性ウロキナ
ーゼ組成物。８前記ウロキナーゼ100単位に対し、前記高級
脂肪酸0.01〜２mg、前記ポリアルキレングリコー
ル0.01〜５mgおよび前記カルシウム塩0.0001〜0.1
mgを含有する特許請求の範囲第１項記載の腸管吸
収性ウロキナーゼ組成物。